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北京现货Calmodulin/CALM2 mRNA原位杂交试剂盒优惠价

产品信息
  • 特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

    北京现货Calmodulin/CALM2 mRNA原位杂交试剂盒优惠价的品Pai:百奥莱博,是优质的基因结构和功能产品,用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多Calmodulin/CALM2 mRNA原位杂交试剂盒等基因结构和功能产品请联*(代"系")我司咨询订购。


    名称:北京现货Calmodulin/CALM2 mRNA原位杂交试剂盒优惠价
    品Pai:百奥莱博
    规格:100T
    编号:ZN0176
    基本信息:
    保存条件:4℃保存一年
    工作量:100张切片。
    有效期:一年。
    适用种属:hμman,rat,guinea pig,mouse,rabbit
    标记方式:3’—尾段标记
    试剂盒中内容:
    1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml;
    2.预杂交液 2ml;
    3.Calmodulin/CALM2 mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml;
    4.封闭液 5ml;
    5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml;
    6.SABC-POD 5ml;
    7.生物素化过氧化物酶 5ml。
    用户自备试剂:
    原位杂交专用盖玻片;POLY-L-LYSINE;DEPC;20%甘油
    缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC,0.5×SSC,0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
    一.培养细胞和冰冻切片
    准备工作:
    固定液:4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6);1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
    3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
    2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g,柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O,分子量294)8.8g。
    0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
    0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
    20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
    原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
    操作程序:
    注意:Z重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以YZRNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
    1.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
    2.细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
    3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
    4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
    5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
    6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
    7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
    8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
    9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
    10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
    11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛"):37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
    12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
    13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
    14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
    15.必要时苏木素复染,充分水洗。
    16.酒精脱水,二甲*透明,封片。
    二.石蜡切片
    如果有条件的话,应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后,及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6),含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块,固定1小时即可,较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感,如动物大脑,固定时间30-40分钟,一般不要超过1小时。
    1.常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
    2.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。
    3.石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
    4.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间,例如5分钟,10分钟,20分钟,30分钟。以找到的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
    结果观察:
    Calmodulin/CALM2的细胞胞浆着色呈棕黄色。
    注意事项:
    由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数,加上基因仅由四个碱基排列组合而成,因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照,基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时,用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释,一般稀释2—10倍;并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况;如果出现大量的细胞核着色,往往和标本固定时间过长有关,应重新处理标本。

    北京现货Calmodulin/CALM2 mRNA原位杂交试剂盒优惠价正在火爆,除此之外,为您推荐下别产品:

    ·TSARG7 mRNA原位杂交试剂盒
    编号:ZN1447
    规格:100T
    基本信息:
    保存条件:4℃保存一年
    工作量:100张切片。
    有效期:一年。
    适用种属:mouse
    标记方式:3’—尾段标记
    试剂盒中内容:
    1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml;
    2.预杂交液 2ml;
    3.TSARG7 mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml;
    4.封闭液 5ml;
    5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml;
    6.SABC-POD 5ml;
    7.生物素化过氧化物酶 5ml。
    用户自备试剂:
    原位杂交专用盖玻片;POLY-L-LYSINE;DEPC;20%甘油
    缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC,0.5×SSC,0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
    一.培养细胞和冰冻切片
    准备工作:
    固定液:4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6);1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
    3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
    2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g,柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O,分子量294)8.8g。
    0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
    0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
    20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
    原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
    操作程序:
    注意:Z重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以YZRNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
    1.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
    2.细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
    3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
    4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
    5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
    6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
    7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
    8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
    9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
    10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
    11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛"):37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
    12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
    13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
    14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
    15.必要时苏木素复染,充分水洗。
    16.酒精脱水,二甲*透明,封片。
    二.石蜡切片
    如果有条件的话,应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后,及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6),含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块,固定1小时即可,较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感,如动物大脑,固定时间30-40分钟,一般不要超过1小时。
    1.常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
    2.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。
    3.石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
    4.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间,例如5分钟,10分钟,20分钟,30分钟。以找到的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
    结果观察:
    TSARG7的细胞胞浆着色呈棕黄色。
    注意事项:
    由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数,加上基因仅由四个碱基排列组合而成,因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照,基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时,用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释,一般稀释2—10倍;并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况;如果出现大量的细胞核着色,往往和标本固定时间过长有关,应重新处理标本。


    北京现货Calmodulin/CALM2 mRNA原位杂交试剂盒优惠价关键词:百奥莱博,ZN0176,Calmodulin/CALM2 mRNA原位杂交试剂盒

    PY02-064  抗生素检定培养基Ⅱ号(PH6.5-6.6)  250克  
    C1801 巴比西鼠血清(无菌过滤)
    乳清酸 N,N-Diethylformamide 65-86-1
    α-甘油磷酸*盐 Thioflavine S 927-20-8
    ARB12676 大鼠颗粒酶A(Gzms-A)含量分析 Rat granzymes a,gzms-a ELISA KIT
    低糖DMEM(含双抗)   500ml
    ARB12106 大鼠可溶性CD14(sCD14)定量分析 Rat soluble cluster of differentiation 14,scd14 ELISA KIT
    56-87-1 L-Lysine  L-赖*酸
    枸橼酸*抗凝剂(3.2%,无菌)   100ml
    D-虫荧光素* 2-Nitrobenzaldehyde 103404-75-7
    钼酸铵 9-Aminoacridine hydrochloride monohydrate 12054-85-2
    BL0922 RBITC标记羊抗人白蛋白抗体
    PY02-429  假单胞CFC选择性培养基基础  250克  
    ARB13488 鸡热休克蛋白20(HSP-20)代做ELISA实验 Chicken heat shock protein 20,hsp-20 ELISA KIT
    2,5-二*恶唑 Thioflavin T 92-71-7
    23491-52-3 Bis Benzlimide Hoechst NO33342 荧光染料
    北京现货Calmodulin/CALM2 mRNA原位杂交试剂盒优惠价关键词:百奥莱博,ZN0176,Calmodulin/CALM2 mRNA原位杂交试剂盒

    369-07-3 邻硝基*(代"*")-β-D吡喃半乳糖苷 ONPG
    ARB10713 人多效生长因子(PTN)酶免分析 Human pleiotrophin,ptn ELISA KIT
    多重PCR扩增试剂盒 
    1-乙基-3-(3-二甲*丙基)碳二亚胺盐*(代"酸")盐 D-Arginine 25952-53-8
    ZCPTH01 猪凝血酶 500ku
    F030827 BIOTIN标记兔抗鸭IgY IgG抗体 Rabbit Anti-Duck IgY*BIOTIN
    ARB11240 人毒蕈碱型乙酰胆碱受体亚型M1(M-AChRM1)elisa检测操作说明书 Human muscarinic acetylcholine receptor m1,m-achr m1 ELISA KIT
    BL1239 SOC固体培养基(干粉)
    溶菌酶(蛋清) AEC 12650-88-3
    CYB163057 羊抗鸡IgG-FITC
    ARB13519 鱼类超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA检测服务 Fish high sensitivity c-reactive protein,hs-crp ELISA KIT
    蚯蚓酶 Trizol Reagent
    DN1501 新型植物基因组DNA快速提取试剂盒
    EB缓冲液(pH7.2)   100ml
    PY01-125  3-吲哚丁酸  1克  
    *化铯 Phosphodiesterase Ⅱ from bovine spleen 7647-17-8
    73-32-5 L-Isoleucine   L-异亮*酸
    血红蛋白检测试剂盒(比色法)   50T
    无水磷酸肌酸二*盐 Tetrapropylammonium bromide 922-32-7
    F040401 乙肝表面抗原 HBSAg
    6892-68-8 二硫赤藓醇 DTE

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    温馨提示:不可用于临床ZL。
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