北京GXcDNA链合成试剂盒(微量样本)大量库存促销

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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京GXcDNA链合成试剂盒(微量样本)大量库存促销，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京GXcDNA链合成试剂盒(微量样本)大量库存促销
编号：WE0128
规格：25次|100次
产地：国产|进口
  本试剂盒是专为两步法RT-PCR步实验配制的cDNA链合成试剂盒。该试剂盒使用的逆转录酶是一种利用大肠杆菌工程菌进行重组与表达的全新GX逆转录酶，去除了RNase H活性并增强了其热稳定性，可利用极低量的总RNA或mRNA合成cDNA链，起始样本量可低至pg级。UltraRT逆转录酶与RNA亲合能力强，能通读GC含量高，二级结构复杂的RNA模板，获得高产量的cDNA。
  本试剂盒包含从RNA模板逆转录成cDNA链所需的所有试剂，含有Super RTGX逆转录酶、反应缓冲液、引物、dNTP等，使用简单方便。本系统对后续的PCR以及定量PCR试验兼容性高，适用各种PCR反应的DNA聚合酶。

试剂盒组成：

 

组份	25次	100次
UltraRT，200 U/μl	25μl	100μl
5×UltraRT Buffer	120μl	500μl
Primer Mix	60μl	240μl
dNTP Mix，2.5 mM Each	120μl	500μl
RNase-Free Water	1ml	1ml

产品特点：
1、GX逆转录：与RNA模板亲和力高，逆转录效率高达90%，可识别pg级别的模板。
2、自由应对复杂模板：即使GC含量高，二级结构复杂的模板，无需高温变性，也可得到良好结果。
3、使用方便：试剂盒包含除RNA模板外的逆转录所需全部试剂。

注意事项：
1、在操作过程中应避免RNase污染，防止RNA降解或实验中的交叉污染，建议在专门的区域进行RNA操作，使用专门的仪器和耗材，操作人员带口罩和一次性手套并经常更换手套。
2、实验尽量使用一次性塑料器皿，若使用玻璃器皿，应使用0.1%DEPC(焦碳酸二乙酯)水溶液在37℃处理12小时，并在120℃下高压灭菌30分钟后使用，或者将玻璃器皿在180℃下干热灭菌60分钟后使用。实验中用到的无菌水应使用0.1%的DEPC处理后进行高压灭菌。
3、本试剂盒中的所有试剂使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。所涉及的酶类使用后应尽快放回-20℃，避免反复冻融。
4、若起始RNA的量小于50ng，建议加入RNA酶YZ剂(RNasin)。本试剂盒并未提供，如需要可单独向本公司订购，货号：WE0223。

使用方法：
注意：1ng-5μg总RNA可建立20μl反应体系，如果总RNA量大于5μg，请按比例扩大反应体系。

I逆转录操作步骤：

1、将RNA模板、Primer Mix、dNTP Mix、UltraRT Buffer、UltraRT和RNase-Free Water溶解并置于冰上备用。
2、根据以下表格配制反应体系，总体积为20μl。
 

试剂	20μl反应体系	终浓度
dNTP Mix，2.5 mM Each	4μl	500μM Each
Primer Mix	2μl
RNA Template	Xμl	50 pg-5μg
5×UltraRT Buffer	4μl	1×
UltraRT，200 U/μl	1μl
RNase-Free Water	up to 20μl

注意：
a.若起始RNA的量小于50ng，则建议加入RNA酶YZ剂(RNasin)。本试剂盒并未提供，如需要可单独向本公司订购，货号：WE0223。
b.Primer Mix由Oligo(dT)和Random Primer配制而成。可根据实验需要可使用Oligo-dT Primer或Gene Specific Primer，建议 20μl 反应体系Oligo-dT Primer 50 pmol，或Gene Specific Primer 2pmol。

3、涡旋震荡混匀，短暂离心，使管壁上的溶液收集到管底。
4、42℃孵育30-50分钟，85℃孵育5分钟。反应结束后，短暂离心，置于冰上冷却。
5、逆转录产物可直接用于PCR反应和荧光定量PCR反应，或置于-20℃长期保存。

II若逆转录效率低，或RNA模板二级结构复杂、GC含量高时，建议采用以下步骤：

1、将RNA模板、Primer Mix、dNTP Mix、UltraRT Buffer、UltraRT和RNase-FreeWater溶解并置于冰上备用。
2、根据以下表格配置反应体系，总体积为15μl 。
 

试剂	20μl反应体系	终浓度
dNTP Mix，2.5 mM Each	4μl	500μM Each
Primer Mix	2μl
RNA Template	Xμl	50 pg-5μg
RNase-Free Water	up to 15μl

注意： Primer Mix由Oligo(dT)和Random Primer配制而成。可根据实验需要可使用Oligo-dT Primer或Gene Specific Primer。

3、70℃孵育10分钟，迅速冰浴2分钟。
4、短暂离心，使管壁上的溶液收集到管底。
5、继续向以上反应液中加入以下试剂：

试剂	20μl反应体系	终浓度
5×UltraRT Buffer	4μl	1×
UltraRT，200 U/μl	1μl

注意：若起始RNA的量小于50ng，则建议加入RNA酶YZ剂(RNasin)。本试剂盒并未提供，如需要可单独向本公司订购，货号：WE0223。
6、42℃孵育30-50分钟，85℃孵育5分钟。
7、反应结束后，短暂离心，置于冰上冷却。
8、逆转录产物可直接用于PCR反应和荧光定量PCR反应，或置于-20℃长期保存。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。

北京GXcDNA链合成试剂盒(微量样本)大量库存促销正在火爆，除此之外，为您推荐下别产品：

·BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶)(低含量ROX校正染料)
编号：WE0155
英*(代"文")名称：BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG)(Low ROX)
规格：5ml
  本品是专用于探针法(TaqMan，Molecular Beacon等)实时荧光定量PCR的预混体系，浓度为2×，包含 BaldStar Taq DNA polymerase、PCR Buffer、dNTPs(dTTP全部被dUTP所取代)、UNG酶和Mg2+，操作简单方便。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后的cDNA靶序列的检测，如基因表达分析，拷贝数分析，SNP基因型分析等。本产品中运用了dUTP-UNG防污染系统，在PCR反应体系配制过程中加入了dUTP，因此就形成了含有dU碱基的扩增产物。而此产物可以在下次进行PCR反应前，由PCR体系中的UNG酶处理消除。这样就有效的去除了PCR产物的残留污染，大大降低了由于扩增产物污染而导致的假阳性。UNG酶在PCR循环中的预变性步骤即可被灭活，因此不会影响新的含dU碱基PCR产物的形成。本品含有的 BaldStar Taq DNA Polymerase是一种经化学修饰的、全新GX热启动酶，在常温下没有聚合酶活性，有效避免在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增，酶的激活须在95℃下孵育10分钟。独特的 PCR缓冲体系与热启动酶的组合，显著提高了PCR的扩增效率，荧光信号更强，灵敏度更高，可以检测单拷贝的模板。使用本产品可以得到更广的线性范围，对目的基因定量更准确。

  ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差，一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同，因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器(WE0154)：
Roche LightCycler 480，Roche LightCyler 96，Bio-rad iCyler iQ，iQ5，CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器(WE0155)：
ABI Prism7500/7500 Fast，QuantStudio® 3 System，QuantStudio® 5 System，QuantStudio® 6 Flex System，QuantStudio® 7 Flex System，ViiA 7 system，Stratagene Mx3000/Mx3005P，Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器(WE0156)：
ABI Prism7000/7300/7700/7900，Eppendorf，ABI Step One/Step One Plus等。

产品组成：

组份	WE0154-5ml	WE0155-5ml	WE0156-5ml
2×BaldStar TaqMan Mixture(UNG)	5×1ml	5×1ml	5×1ml
50×Low ROX	-	200μl	-
50×High ROX	-	-	200μl
ddH2O	5×1ml	5×1ml	5×1ml

注意事项：
1、使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。
2、避免反复冻融本品，反复冻融可能使产品性能下降。本产品长期保存可置于-20℃，避光。如果在短期内需要频繁使用，可在2～8℃保存。


使用方法：
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系	终浓度
2×BaldStar TaqMan Mixture(UNG)	25μl	1×
Forward Primer，10μM	1μl	0.2μM
Reverse Primer，10μM	1μl	0.2μM
Probe，10μM	1μl	0.2μM
Template DNA	2μl
50×Low ROX or High ROX(可选)	1μl	1×
ddH2O	up to 50μl

注意：
1)通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果，可以在0.1-1.0μM作为设定范围的参考。
2)使用的探针浓度，与使用的荧光定量PCR仪、探针种类、荧光标记物质种类有关，实际使用时请参照仪器说明书，或各荧光探针的具体使用要求进行浓度的调节。
3)通常DNA模板的量以10-100ng基因组DNA或1-10ng cDNA为参照，因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同，可对模板进行梯度稀释，以确定的模板使用量。
4)不同仪器的激发光学系统有所不同，根据使用荧光定量的仪器选择加入50× Low ROX or 50×High ROX。

2、PCR反应程序
注意！本产品预变性反应必须在95℃ 10分钟下完成！

两步法PCR：

步骤	温度	时间	循环数
UNG酶消化	37℃/50℃	2-10 min
预变性	95℃	10 min
变性	95℃	15 s	35-40个循环
退火/延伸	60℃	1 min

注意：
1)本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、10 min条件下实现酶的活化。
2)建议采用两步法PCR反应程序，若因使用Tm值较低的引物等原因，得不到良好的实验结果时，可尝试进行三步法PCR扩增。

三步法PCR：

步骤	温度	时间	循环数
UNG酶消化	37℃/50℃	2-10 min
预变性	95℃	10 min
变性	95℃	15 s	35-40个循环
退火	55℃-65℃	30s
延伸	72℃	30s

储存条件：-20℃，避免反复冻融


北京GXcDNA链合成试剂盒(微量样本)大量库存促销关键词：GXcDNA链合成试剂盒,GXcDNA链合成试剂盒(微量样本),UltraRT cDNA Synthesis Kit,WE0128

ARB10278 人大肠癌专一抗原2(CCSA-2)含量检测 Human colon cancer-specific antigen-2,ccsa-2 ELISA KIT
邻*二甲醛 Monoacetone glucose 643-79-8
Von Ebener"s液   500ml
F030638 FITC标记山羊人IgM抗体 Polyclonal Goat Anti-Human IgG FC*FITC
BL0800 人血清IgA抗原(液体)70-80%纯度
ARB13914 猪低分子肝素(LMWH)ELISA代测服务 Porcine low molecular weight heparin,lmwh ELISA KIT
H0401 小牛血浆(去红细胞、无菌过滤)
ARB10049 人Apelin 12(AP12)Elisa方法检测 Human apelin 12,ap12 ELISA KIT
PY08-041  胆盐乳糖发酵培养基 10ml  10支/盒，用于药品大肠菌群的测定
90-05-1 α-甲氧基酚(愈创木酚)
BTN100204 一站式PCR-SSCP套装 One-Stop PCR-SSCP Pack
SJ0683 50bp plus
BTN131196 Therminator II DNA聚合酶 Therminator II DNA Polymerase
BL0292 DMEM(低)
BTN130926 DNA样品采集拭子 DNA Sample Swab
ARB12815 小鼠乙酰胆碱(ACH)含量分析 Mouse acetylcholine,ach ELISA KIT
Rho123细胞膜电位检测试剂盒   50T |100T
Oligo (dT) 18 引物 100ul
C1601 驴血清(无菌过滤) 100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
葡聚糖凝胶G-75 D-Xylose 37224-29-6
北京GXcDNA链合成试剂盒(微量样本)大量库存促销关键词：GXcDNA链合成试剂盒,GXcDNA链合成试剂盒(微量样本),UltraRT cDNA Synthesis Kit,WE0128

BL1258 MarkerⅡDNA Ladder
叶绿素B Glycine 519-62-0
PY02-277  MUGal肉汤基础  100克  
H0301 新生牛血浆(去红细胞、无菌过滤)
ARB14078 大鼠高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)酶标法分析 
葡聚糖凝胶LH-60 VBT
ARB12517 大鼠热休克蛋白27(HSP-27)检测服务 Rat heat shock protein 27,hsp-27 ELISA KIT
柠檬酸铋铵 DL-Lactic acid 31886-41-6
F030835 BIOTIN标记山羊抗鸡IgY IgG抗体 Polyclonal Goat Anti-Chicken IgY(IgG)*BIOTIN
13292-46-1 Rifampicin 利福平
γ-谷*酰基转移酶(GGT)检测试剂盒(重氮微板法)   100T
ARB12633 大鼠葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)elisa检测操作说明书 Rat glucose-dependent insulin-releasing polyPeptide,gip ELISA KIT

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