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名称:Southern专用DNA Marker(DIG标记) 核酸电泳和回收
英文名:Southern DNA Marker(Labeled by DIG)
编号:BTN120654B
产地:国产|进口
规格:20次
本产品是用DIG标记的lambda/Hind Ⅲ DNA Marker,可以用做Southern杂交的Marker,便于准确确定杂交片段的大小。
产品特点:
1. 即开即用,非常方便。
2. 每个DNA片段显色强度均匀。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 按常规方法制备琼脂糖胶和酶切基因组DNA。
2.上样。在胶的两侧的加样孔中各加入10μL本产品。
3. 按常规方法电泳。
4. EB或其他染料染色后UV 观察结果。
5.转膜。
6. 按常规的方法杂交和检测DIG的方法检测。
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Southern专用DNA Marker(DIG标记) 核酸电泳和回收关键词:Southern DNA Marker(Labeled by DIG),BTN120654B,Southern专用DNA Marker(DIG标记)
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Southern专用DNA Marker(DIG标记) 核酸电泳和回收关键词:Southern DNA Marker(Labeled by DIG),BTN120654B,Southern专用DNA Marker(DIG标记)
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·TRIzol试剂伴侣
编号:BTN81027
英文名称:TRIzol-Mate
规格:50次
TRIzol是用于总RNA提取(主要是动物总RNA提取)的产品,具有广大的客户群。但其缺点之一是一直没有柱式升级产品,客户仍然要使用既繁琐又费事的非柱式操作(另一缺点是不能用于富含多糖和多酚的材料)为解决此问题,我们特推出本产品,其操作流程如下:

产品特点:
1. RNA 质量更好,因为操作简短减少了RNA在提取过程中的降解。
2. RNA 纯度更高,OD260/OD280一般在 1.9以上,比经典 TRIzol法得到的更纯。
3. 专门的洗涤条件能有效去除基因组 DNA,进一步减少其对 RNA的污染。
4.适用于其他基于酸酚/ 异硫*酸胍提取原理的RNA提取产品,包括TRIzol、TRIzol LS、TRI Reagent等。
5.可以省略*仿处理步骤,避免接触有毒试剂(但效果稍差)。
6.跟TRIzol 结合使用,把经典操作变成了柱式操作,简化了实验流程,用户可以节约30分钟的时间。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 50ml |
| 硅胶膜离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| RNA洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
使用及效果:
使用方法:1. 按 TRIzol的使用说明书进行总 RNA提取到加*仿之前一步。
2. 如果需要加*仿,则继续按TRIzol的使用说明书操作,用*仿处理裂解液离心后得到上清液。如果省略*仿处理步骤,则需要将裂解物直接离心。
3. 将经过*仿处理得到的上清液或没有经过*仿处理直接离心得到的裂解液转移至一个干净的1.5mL塑料离心管中。注意:如果是经过*仿处理,则离心后,下层有机相和中间层将含有DNA和蛋白质,避免触及,否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见,可以留下100μl上清液不取。同时吸取上清时Z好缓慢进行,否则容易吸出交界面的不可见的丝状DNA。
4. 加入等体积的溶液A,颠倒混匀 30秒。
5. 根据混合物的多少,一次或分两次转移到离心吸附柱中。
6. 每次转移后,需要13000-15000g室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。
7. 加0.7mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。一次洗涤一般足够去除杂质。但如果样品OD260/280 比值不高,可以再用0.3mL 通用洗柱液重复此步一次。
8.室温离心半分钟。此步对去除残留通用洗柱液十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响RNA的质量和使用。
9. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 收集管中,加入50-100μl RNA 洗脱液。
10.室温离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
11. RNA 完整性的电泳检测:如果需要做Northern杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。
12. RNA产量产率测定:将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度 X 体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
13. RNA 纯度测定:无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响RT-PCR等反应。
疑难解答:Q:上样孔里的红色荧光物一定是DNA污染吗?
A:不是。用TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳RNA时容易产生此现象,百奥莱博初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA 通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物,加RNase处理后,这些红色荧光物(RNA)一般会消失。为避免此现象,建议Z好使用甲醛变性胶电泳和RNA 专用上样液(如我公司的RNAload)。
Q:如何确认和去处除污染的基因组DNA?
A:如果怀疑有DNA污染,可以用RNase处理RNA样品,然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失,则表示是基因组DNA污染。进一步确认可以使用PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用百奥莱博的非酶的DNA 去除剂DNA Scavenger或RNase-free DNase,由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染,所以必须严格按照厂家提供的说明书进行操作。
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温馨提示:不可用于临床ZL。