免DNA提取PCR试剂盒(细胞组织裂解物直接PCR试剂盒) 核酸扩增(PCR)

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")免DNA提取PCR试剂盒(细胞组织裂解物直接PCR试剂盒) 核酸扩增(PCR)，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：免DNA提取PCR试剂盒(细胞组织裂解物直接PCR试剂盒) 核酸扩增(PCR)
规格：100次
品Pai：百奥莱博
编号：BTN130985
产地：国产|进口
本产品是可以直接用新鲜的动物、植物、细菌样品的裂解液进行PCR扩增的试剂盒。

产品特点：
1. 操作简单，免去DNA提取、蛋白去除、RNA去除等步骤，5分钟即得用于PCR的模板。
2. 兼容性广，可以用于几乎所有的分子生物学样品，包括细菌、昆虫、真菌、各种植物、各种动物、法医样品(包括全血液、血痕、精斑、唾液、毛发、组织样品、口腔细胞和FTA卡)、石蜡组织切片等。
3. 提供离心管专用研磨杵，便于处理棘手样品。
4. 环保健康，不使用任何有毒有害的试剂。
5. 尤其适用于大规模育种筛选和临床筛选。
6. 本试剂盒可以处理100份不同的样品，足够100次PCR实验。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	12ml
溶液B	12ml
PCR MagicMix 3.0	1ml
研磨杵	100只
说明书	1份

储存条件：溶液A、溶液B和离心管专用研磨杵可以常温和放置，PCR MagicMix 3.0需要低温运输、-20℃保存。有效期一年。

使用方法：
1. 首次使用本产品时需要详细检查溶液A和溶液B是否有结晶析出。如果有需要37℃溶解后摇晃均匀待用。未用完部分可以放常温保存。
2. 根据材料不同参考下表取少量样品到1.5mL塑料离心管中。

样品种类	取样量
动物组织	1-5mg
鼠尾	2mm长
血液样品	不超过20μl
植物叶片	1-5mg
植物种子(去皮)	1-5mg
酵母培养物	0.2-0.5mL培养物沉淀
细菌培养物	0.2-0.5mL培养物沉淀

注意：未列出样品，用户需要自己摸索用量。对富含多醌多酚的植物材料(如棉花)，组织使用量Z好不要超过0.5mg。
3. 加入100μl溶液，确保溶液A完全将样品淹埋。
4. 用研磨杵小心将样品在离心管内捣碎。血液一般情况捣碎30秒即可；实体组织需要捣碎到溶液的颜色变浑浊(植物叶片的话，溶液的颜色将变成绿色)。如需更多研磨杵，可从我司另购。对棘手的样品，还可以增加95℃保温10-60分钟一步，待温度冷却到室温后再进入下一步。残留的实体组织碎片不会影响后续试验。
5. 加入100μL溶液B，震荡10秒混匀。
6. 常温12000rpm离心2分钟。
7. 将上清液转移到一个干净的1.5mL离心管中。如果不用，可以放-80℃长期保存。如果用于后续PCR，请直接进入下步。
8. 直接用裂解液作为模板设置30μl体系的PCR反应体系如下：

成分	用量
PCR MagicMix 3.0	15μl
细胞裂解液(来于上步)	1-5μl
自备PCR引物1(10uM)	1μl
自备PCR引物2(10uM)	1μl
补水到	30μl

注意：裂解液体积Z好不要超过PCR体积的1/10。如果需要增加模板的加入量，则PCR体系应该相应的增加。如果加入5μL裂解液，则可以使用50μL的PCR体系。
9. 放入PCR仪中进行PCR,PCR参数需要根据引物Tm值和靶分子长度等参数设置。一般不低于35次循环。
10. PCR结束后取5-10μL直接上样电泳(本产品不需要上样液)，红色染料电泳速度相当于50bp DNA片段。

注意事项：
1．如果反应体系不是30μl，各成分需要等按比例增加或减少。
2．如果细胞裂解液中有不明PCRYZ物(植物、土壤和血液等DNA样品常含此类YZ物)，可以在PCR体系中加入1/10的PCRYZ物清除剂(BTN60804，30μL体系中加3μL)，可能会对PCR有帮助。

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·乙酰化牛血清白蛋白
编号：BTN131017
英文名称：Bovine Serum Albumin, Acetylated
规格：400μL
乙酰化牛血清白蛋白可以用作酶的稳定剂或作为一种载体蛋白。本产品为浓度为它是利用经过改良的Gonzalez等的方法制备的，并通过去离子水充分透析除去杂质，无DNA酶及RNA酶活性。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·柱式细菌DNA提取试剂盒(含)
编号：BTN60802B
英文名称：Bacteria DNA column extraction kit(with lysozyme)
规格：50次
本试剂盒可以用于绝大多数革氏阳性和阴性细菌基因组DNA的快速提取。

试剂盒特点：
1. 操作简单，整个过程不到20分钟。
2.产率一般在5-20μg/mL过液培养的饱和菌液(108-109个细胞)。
3. OD260/280一般在1.8以上，可直接用于PCR、酶切、杂交等实验。
4. DNA片段长度一般在40-50 Kb左右。
5. 每次提取可以处理0.1-1.5mL的细菌，也可以使用菌落。
6. 价廉物美，与国外同类产品相比质量相当，但价格便宜。
7. 安全无毒，本试剂盒对人体无害，无腐蚀性和刺激性气味。
8. 本产品分A型(无溶菌酶，适用于革氏阴性细菌)和B型(含溶菌酶，适用于革氏阳性细菌)。

试剂盒组成：

成分	A型	B型
溶菌酶干粉	无	600mg
溶液A	15ml	15ml
溶液B	7.5ml	7.5ml
溶液C	30ml	30ml
离心吸附柱	50套	50套
通用洗柱液	50ml	50ml
DNA洗脱液2.0	10ml	10ml
说明书	1份	1份

储存条件：常温运输及保存(溶菌酶需要-20℃保存)，有效期一年。

使用方法：
注意：溶液A和溶液B容易产生沉淀，溶液B十分粘稠，均需要放置在65℃预热使沉淀溶解、粘稠度降低，用前充分摇匀。

一: 对革氏阴性细菌样品，只需用A型
1. 将0.1-1.5mL过夜培养的菌液转移到1.5mL离心管中，12000rpm室温离心1min沉淀细菌，弃上清。
2. 加入300μL预热的溶液A到细菌沉淀中，充分吹打均匀。
3. 再加入150μL预热的溶液B到离心管中，颠倒数次混匀。此时溶液中可能有白色丝状悬浮物产生。由于溶液B比较粘稠，可以采取称量方法取用，150μL约等于150-160mg。也可以将1mL枪头剪去一截再吸取。
4. 65℃放置3～5分钟。如果室温放置，DNA产量会降低10-20%。
5. 加入200μl自备*仿，震荡混匀10-30秒，此时溶液将呈乳白色。
6. 12000rpm室温离心2分钟。此时上清液将变得透明，中间层有白膜。小心转移上清液到一个新的1.5mL塑料离心管中，避免触及中间层的白膜。
7. 加入1.5倍体积(约0.7mL)的溶液C，颠倒混匀后全部转移到离心吸附柱中，室温放置至少2分钟。
8. 12000rpm室温离心1分钟，DNA将吸附在离心吸附柱的膜上，倒弃收集管中的穿透液。
9. 将0.5mL通用洗柱液加入离心柱中，12000rpm室温离心1分钟，弃穿透液。
10. 重复上步操作一次。
11. 空甩半分钟去除残留液体,将离心吸附柱转移到新的1.5mL离心管中。
12. 加50-100μL通用洗脱液，室温放置3～5分钟。
13. 12000rpm室温离心1分钟即得DNA溶液。
14. 由于本产品使用的离心吸附柱吸附DNA的能力较强，可以重复上步操作一次以便得到更多的DNA。
15. 直接取5-10μL电泳检测DNA，其余放冰箱备用。
二: 对革氏阳性细菌样品，需用B型(含溶菌酶)
1. 将0.1-1.5mL过夜培养的革氏阳性细菌12000rpm室温离心1分钟后，重悬于0.6mL溶菌液中(溶菌液配制:30mL无菌水+600mg溶菌酶，配制后Z好分装成小管并放-20℃长期保存，每次只用一小管)，颠倒混匀5-10次后放37℃保温至少30分钟(有的革氏阳性菌种可能需更长时间，自己摸索)。
2. 12000rpm室温离心10分钟，小心弃上清。
3.后续处理接上面的革氏阴性细菌提取步骤中的第2步。
三:其他注意事项
1.可以直接使用细菌菌落提取DNA，操作时直接将细菌菌落挑入到溶液A中，后续操作同上。
2.从单个菌落中提取到的DNA较少，所以只用30μL通用洗脱液洗脱。

使用效果：

图注:用本产品提取1.0mL过夜培养的E.coli Tg1细菌，DNA溶于100μL TE中，取20μL上样。M表示全长的λDNA,其余均为提取的样品DNA。

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