液相内毒素清除剂 DNA纯化

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产供应液相内毒素清除剂 DNA纯化，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：液相内毒素清除剂 DNA纯化
规格：100次
英文名：Liquid endotoxin scavenger
品Pai：百奥莱博
编号：BTN60607
去除液体生物样品(包括质粒DNA样品)中污染的内毒素(endotoxin)具有重要的临床意义，因为内毒素对原代细胞、传代细胞和整体动物均具有显著的毒性作用。由于内毒素(化学本质为脂多糖，即lipopolysaccharides)是包括E.coli在内的革兰氏阴性细菌细胞壁的主要组成成分，并且带电性跟DNA 类似，所以从E.coli细胞中提取的质粒DNA和重组蛋白质药物中常常含有大量的内毒素污染，并且很难用用常规方法(包括硅胶膜吸附，离子交换吸附、凝胶排阻过滤、*化铯超速离心)去除。本产品就是专门用于GX去除生物样品中的内毒素污染。

产品特点：
1. 简单快速，一次处理只需要20分钟左右，不需要复杂仪器设备。
2.GX，一次处理可以去除90%以上的内毒素，经过三次重复抽提可将内毒素的水平降低到0.2 EU(endotoxin unit，约0.1 ng LPS)/mL以下。
3.适用范围广，可用于DNA、RNA、蛋白质或其他生物样品。
4. 不影响DNA和绝大部分蛋白质的活性，处理过的质粒DNA可用于转染实验。
5. 既可小规模使用(在1.5mL离心管内)，也可放量使用。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
如果使用前本产品有分层，冰浴后振荡混匀。

一：用于体积小于500μl的DNA/RNA样品
1.在一干净的离心管中加入500μl的样品。如果不足500μl,可以用水或TE补足。
2. 加入50μl的3 M 醋酸*(pH5.2)，混匀后冰浴5分钟。
3. 加入50μl预冷的本产品，充分混匀后冰浴10分钟。
4. 65℃水浴直到溶液变浊或出现分层为止(一般需要1-5分钟)
5.室温12000～15000×g离心2分钟(不能低温离心)，离心后上层为无色透明，下层为淡蓝色。
6. 将上清转移到新的离心管中。
7. 如果需要，可以重复步骤3～6。
8. 加1倍体积的异丙醇或两倍体积的乙醇，混匀，12000～15000×g离心30分钟。
9. 弃上清后用70%酒精洗2次。
10. 空气干燥沉淀后加入100μl 无内毒素的水或TE缓冲液溶解沉淀。
11. 测定DNA和内毒素的含量，与未纯化的样品比较。
二：用于体积大于500μl的DNA/RNA样品
整个操作同上，只是在15或50mL塑料离心管中进行，离心速度不能超过离心管的承受力。
三：整合到碱变性法质粒DNA 制备过程中
整个操作同上，只是：
1.样品必须是加溶液III离心后得到的上清液或得到的质粒溶液。
2. 如果处理的是加溶液III离心后得到的上清液，可以略去第2 步操作。
3.处理后的溶液需要用试剂盒提供的或自备的上柱液调整盐离子浓度，然后上柱，以后的操作按试剂盒提供的操作手册进行。
4. 洗脱DNA 所用水或溶液必须无内毒素污染。
四：对蛋白质和其它生物样品
整个操作同上，只是：
1． 略去第2 步操作，加3 M 醋酸*(pH5.2)只为沉淀核酸。
2． 第4 步改为37℃保温以免蛋白质变性，溶液呈混浊状或分相一般需要20-30分钟。
3． 略去第8 步和以后操作。

疑难解答：
Q:为何用常规的方法很难去除生物样品中的内毒素?
A:因为内毒素带电性跟DNA和部分蛋白质相同，所以基于带电性的分离方法(如硅胶膜吸附，离子交换吸附)不能将它们分开;同时内毒素又是双性分子(类似于细胞膜的磷脂分子)，能够形成大小不等的聚合物，跟质粒DNA和蛋白质大小接近，所以基于分子量大小的分离方法(如凝胶排阻过滤和*化铯超速离心)也不能将其有效分离。

更多有关液相内毒素清除剂 DNA纯化的价格及使用说明等，请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：
乙酰基乙酰**(代"胺") 2-Aminoisobutyric Acid 102-01-2
ARB12080 大鼠内毒素(ET)Elisa分析 Rat endotoxin,et ELISA KIT
马铃薯淀粉 Sodium bromide 9005-25-8
BTN90317 一站式DNA尿素-PAGE电泳套装 One-Stop DNA Urea-PAGE Pack
F030427 胶体金标记兔抗鸭IgY IgG抗体 Rabbit Anti-Duck IgY*GOLD
维生素B5 Anthraquinone 137-08-6
间*基*甲*(代"酸") Trifluralin 99-05-8
-乙酸*固定液(10%)   500ml
PY02-174  营养液  100克  
B0501 马血清(辐照灭菌) 100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
BL0611 琼脂糖凝胶CL-4B Sepharose CL-4B
植物基因组DNA提取试剂盒(柱式吸附) 
液相内毒素清除剂 DNA纯化关键词：Liquid endotoxin scavenger,BTN60607,液相内毒素清除剂

复达欣 PABA sodiu*(代"m") salt 72558-82-8
50-02-2 Dexamethasone  地塞米松
92-32-0 吡啰红G派洛宁G(Y) PyroninG(Y)
ARB12518 大鼠热休克蛋白40(HSP-40)Elisa分析 Rat heat shock protein 40,hsp-40 ELISA KIT
CYB168013 豚鼠血清 10ml/瓶
(不需DNA酶消化)"
羟胺溶液(1.5mol/L,pH8.0)   100ml
分子筛3A型 DL-Alanine 308080-99-1
KT201 Taq PCR Mastermix
ARB13800 豚鼠免疫球蛋白G2(IgG2)Elisa定量检测 Guinea pig immunoglobulin g2,igg2 ELISA KIT
二甲*(代"酚")橙四* D-Tartaric acid 3618-43-7
ARB12148 大鼠白介素12(IL-12/P70)酶标法分析 Rat interleukin 12,IL-12/p70 ELISA KIT
BTN131077 组*酸标签蛋白染色试剂盒 Staining Kit for His-Tag
ARB10764 人抗IgE受体抗体检测服务 Human anti-ige receptor antibody ELISA KIT
BL1437 1M Tris-HCl(PH=9.0)
B1201 大牛血清(辐照灭菌) 100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
ARB10233 人γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA检测服务 Human interferon-inducible protein 16,ifi16/p16 ELISA KIT
噻孢霉素 MOPS sodiu*(代"m") salt 64485-93-4
CYB163049 羊抗猪IgG-FITC
ARB13359 牛过氧化脂质/乳过氧化物酶(LPO)Elisa定量检测 Bovine lipid peroxlde,lpo ELISA KIT
液相内毒素清除剂 DNA纯化关键词：Liquid endotoxin scavenger,BTN60607,液相内毒素清除剂


·动植物总蛋白微量提取试剂盒
编号：BTN90707
英文名称：Animal-Plant Total Protein Miniprep Kit
规格：50次
本产品用于快速提取动植物总蛋白，用于SDS-PAGE凝胶电泳和Western印迹分析以及蛋白活性测定等。

产品特点：
1. 提取过程十分简便，匀浆离心即可，整个过程只需要十几分钟。
2. 采用独特的温和裂解成分，蛋白保持天然活性。
3.适用于各种动植物组织材料，包括新鲜或冰冻的材料。
4. 得到的提取物可以直接用于SDS-PAGE、2D电泳、Western印迹分析以及蛋白活性测定等下游实验。
5.一次可以处理100mg左右的样品，足够进行几十次SDS-PAGE mini胶电泳检测。

试剂盒组成：

储存条件：常温运输，4℃保存，5×SDS-PAGE上样液短期4℃保存，长期可放-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
使用前，Z好请在溶液A中加入自备的1M DTT溶液50μL。

一：匀浆法
 注意：对致密的实体组织(如肌肉)，Z好用Polytron 式匀浆机匀浆处理。
1. 称取动物或植物组织样品100mg，剪刀剪成黄豆大小，转移到10-15mL的塑料离心管中。
2. 加入1ml溶液A，在冰上用Polytron 式匀浆机匀浆，直到没有肉眼可见的组织块。为了避免产热，可以分多次匀浆，其间放冰上让匀浆液冷却。
3. 将匀浆液全部转移到1.5mL的塑料离心管中。
4. 4℃ 12000 g离心10分钟，组织残渣碎片将形成沉淀。
5. 将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液，可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要测定蛋白浓度，请使用BCA方法，不要使用Bradford方法(如果要使用，也需要把样品稀释10倍后再测定，否则溶液A中的成分会影响浓度侧定)。如果要进行SDS-PAGE电泳，可取部分到离心管中，加入5×SDS-PAGE上样缓冲液(终浓度为1×)，在沸水中处理5分钟后立即上样电泳。

二：直接研磨法
 注意：可以使用玻璃和陶瓷的研钵，也可以使用与微量离心管式的研磨杵(BTN80603)
1. 称取动物或植物组织样品100mg，剪刀剪成黄豆大小，转移到预冷的研钵或离心管中。
2. 加入1ml溶液A，用研磨杵研磨，直到没有肉眼可见的组织块。
3. 将匀浆液全部转移到1.5mL的塑料离心管中。
4. 4℃ 12000g离心10分钟，组织残渣碎片将形成沉淀。
5. 将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液，可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要测定蛋白浓度，请使用BCA方法，不要使用Bradford方法(如果要使用，也需要把样品稀释10倍后再测定，否则溶液A中的成分会影响浓度侧定)。如果要进行SDS-PAGE电泳，可取部分到离心管中，加入5×SDS-PAGE上样缓冲液(终浓度为1×)，在沸水中处理5分钟后立即上样电泳。

三：液氮研磨法
 注意：Z好使用玻璃和陶瓷的研钵
1. 取大约100mg动物或植物组织样品，转移到预冷的研钵中。
2. 加入少量液氮，用研磨杵研磨成粉。
3. 加入1ml溶液A溶解，然后将溶液全部转移到1.5mL的塑料离心管中。
4. 4℃ 12000 g离心10分钟，组织残渣碎片将形成沉淀。
5. 将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液，可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要测定蛋白浓度，请使用BCA方法，不要使用Bradford方法(如果要使用，也需要把样品稀释10倍后再测定，否则溶液A中的成分会影响浓度侧定)。如果要进行SDS-PAGE电泳，可取部分到离心管中，加入5× SDS-PAGE上样缓冲液(终浓度为1×)，在沸水中处理5分钟后立即上样电泳。

注意事项：
1．如果4℃ 12000g离心10分钟后得到的上清液中还有可见的沉淀，可以将上清转移到一个新的离心管中后再4℃ 12000g离心10分钟，以去除可见的小碎片。
2．植物组织中存在有大量的多酚、多糖、色素、次生代谢产物，如果需要除去植物蛋白样品中残存的色素等杂质，可以在得到的上清液中加入5倍体积的冷丙*(代"酮")或冷甲醇，混匀后-20℃放置1小时或过夜，然后4℃,12000rpm离心10min，弃上清后室温风干，然后将样品溶于自备的后续实验缓冲液中即可。经过此纯化处理后，部分蛋白质可能会发生变性，不能再用于活性检测。

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