AP2凝胶迁移突变探针(1.75μM) 凝胶迁移EMSA

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名称：AP2凝胶迁移突变探针(1.75μM) 凝胶迁移EMSA
品Pai：百奥莱博
英文名：AP2 Mutation Probe For EMSA(1.75μM)
编号：YT201
规格：60μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的AP2 consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针－AP2的阴性对照，用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。一个包装的突变探针，如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应，可以进行30-60个突变探针的冷竞争反应。

EMSA突变探针－AP2的序列如下：
5"-GAT CGA ACT GAC CGC TTG CGG CCC GT-3"
3"-CTA GCT TGA CTG GCG AAC GCC GGG CA-5"

EMSA突变探针－AP2中AP2的公认的结合位点发生了突变，从而使AP2无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中，正常的标记探针和AP2的结合的条带会被YZ；而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中，正常的标记探针和AP2的结合的条带不会被YZ。参考下图。


图1. 一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1,阴性对照反应(标记探针)；
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针)；
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记探针)；
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记突变探针)；
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋目的转录因子的特异抗体)。

注意事项：避免加热到40℃以上，温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。

储存条件：-20℃，有效期一年。

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AP2凝胶迁移突变探针(1.75μM) 凝胶迁移EMSA关键词：YT201,AP2凝胶迁移突变探针(1.75μM),AP2 Mutation Probe For EMSA(1.75μM)


·EDTA抗原修复液(50X)
编号：YT081
英文名称：EDTA Antigen Retrieval Solution
规格：100ml
本品是一种常用的抗原修复液，可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。

细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后，会导致蛋白之间的交联(cross-link)，从而遮蔽样品的抗原位点，导致免疫染色时染色信号减弱，甚至出现一些假阳性染色结果。

本抗原修复液采用了广泛使用的EDTA，可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联，充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位，从而大大改善免疫染色效果。

通常石蜡切片都需进行抗原修复处理，而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果，但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时，可以考虑尝试进行抗原修复。从原理上来看，无论冰冻切片还是细胞爬片等，只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品，进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联，充分暴露抗原表位，从而大大改善免疫染色效果。

本产品特别适合用于石蜡切片，也可以用于冰冻切片等其它样品。

一个包装的本产品可以配制成5000毫升抗原修复液(1X)。按照每个片子需要10毫升抗原修复液(1X)计算，一个包装的本产品可以用于500个样品。

注意事项：抗原修复过程可以使用百奥莱博的染色缸和染色架或邮寄夹进行操作。塑料染色缸、染色架和邮寄夹可以很好地耐受沸水浴，而玻璃染色缸需避免骤冷骤热导致的玻璃破碎。

储存条件：4℃，有效期一年。

·C端BFP标签融合蛋白质粒(蓝色荧光蛋白)
编号：YT463
英文名称：C-BFP plasmid（with CMV promoter）
规格：1μg
本质粒是哺乳动物细胞表达质粒，用于表达C端含BFP(蓝色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子，可以GX启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的后面有一个BFP的完整编码序列，因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达C端含有BFP标签的融合蛋白。利用BFP的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位，也可以利用BFP抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。BFP与GFP高度相似，可以尝SYGFP抗体检测BFP。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。


本质粒的主要信息如下：

 

Feature Nucleotide	Position
CMV promoter	1-602
T3 promoter and T3 primer binding site	620-639
Multiple cloning site	651-740
BFP	741-1460
T7 promoter and T7 primer binding site	1510-1531
SV40 polyA signal	1543-1926
f1 origin of ss-DNA replication	2064-2370
bla promoter	2395-2519
SV40 promoter	2539-2877
Neomycin/kanamycin resistance ORF	2912-3703
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal	3704-4162
pUC origin	4291-4958

本质粒(5010bp)的图谱如下：


使用说明：
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因，构建的质粒可以用常规方法转染细胞。

储存条件：-20℃。


AP2凝胶迁移突变探针(1.75μM) 凝胶迁移EMSA关键词：YT201,AP2凝胶迁移突变探针(1.75μM),AP2 Mutation Probe For EMSA(1.75μM)

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明胶 SB3-8 9000-70-8
乙酸*溶液(2mol/L,pH4.0,无菌)   500ml
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N-乙酰-D-色*酸 Collagenase 2280-01-5
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精胺 Oleanolic acid 71-44-3
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