产品库
登录
首页 找仪器 社区 百科 新品 供应商 品牌 应用 资料 仪企号 展会 标准 求购 招中标

非洲猪瘟PCR试剂盒-非洲猪瘟检测卡

产品信息
【产品名称】
通用名称：非洲猪瘟PCR试剂盒-非洲猪瘟检测卡
商品名称：无
汉语拼音：Feizhouzhuwenbingdu Yingguang PCR Kuaisu Jiance Shijihe
英文名称：Real-time PCR for Rapid Detection of African Swine Fever Virus
【主要成分与含量】
序号 成分 含量
1 PCR反应液 1管（1ml/管）
2 Solution A 1管（5.5ml/管）
3 Solution B 1管（5.5ml/管）
4 阴性对照 1管（0.5ml/管）
5 阳性对照 1管（0.25ml/管）
6 说明书 1份
 
【作用与用途】本试剂盒适用于猪血液、猪肉组织、淋巴结、等样本中非洲猪瘟病毒核酸的检测。
【用法与判定】
1用法
1.1样品处理及模板准备
1.1.1样品处理
·组织样品处理：分别从猪肉组织、淋巴结、不同位置取样，用手术剪剪碎混匀后取0.1g于研磨器中研磨，加入1.5ml生理盐水继续研磨，待匀浆后转至1.5ml无菌离心管，12000 r/min离心2分钟，取上清200μl备用。
·血液样品无需处理，取200μl备用。
1.1.2模板准备
·根据不同的样本类型，按照下表准备相应的样本用量。
·将样本加入到1.5 ml离心管中，加入下表推荐体积的Solution A，涡旋震荡20 s，并按照下表推荐的处理方法，室温静置3-5 min，或95℃金属浴振荡孵育3-5 min。
·样本充分裂解后（95℃金属浴振荡孵育的样本需恢复室温），加入下表推荐体积的Solution B，并涡旋震荡30 s，12000rpm离心2min，上清即为模板DNA。
·处理后的样本如在2小时内进行下一步试验，请于4℃保存，如不能立即进行下一步试验，请于-20℃保存。
样本类型 样本用量 Solution A 处理温度及时间 Solution B
全血 10μl 100μl 室温静置3-5min 100μl
唾液 100ul 100ul 室温静置3-5min 100μl
口腔拭子 1个 400μl 95℃，3-5min 400μl
组织匀浆 10μl 100μl 室温静置3-5min 100μl
备注：组织样本加入10倍体积的生理盐水制成组织匀浆液后，可按照血液样本的处理方法进行处理。
1.1.3可利用商品化试剂盒提取核酸进行反应，效果更佳
1.2荧光PCR扩增
1.2.1试剂准备
实验前20分钟将试剂从冰箱取出并恢复至室温，使其完全融化，充分混匀后瞬时离心去除管壁吸附液体。
1.2.2配制反应体系
按下表1体系，在配套PCR管中配制反应体系，盖紧管盖后瞬时离心10秒，转移至扩增区。
表1 PCR反应体系
成分 体积
PCR反应液 18μl
预准备的模板（样本/对照） 2μl
总体积 20μl
 
1.2.3 PCR扩增
快速模式
表2仪器PCR扩增参数
阶段 温度 时间 循环数
1 95℃ 30s 1
2 95℃ 10 s 40
60℃ 20 s（采集荧光信号）
FAM通道采集荧光信号，需要内参的话请同时打开HEX/VIC荧光通道
 
2判定
2.1合理调整阈值线，不同仪器可根据仪器噪音情况进行调整。
2.2试剂盒有效性判定
·阴性对照：无Ct值，线形为直线或微斜，无明显指数增长。
·阳性对照：Ct值≤30，有明显指数增长，呈典型的S型曲线。
2.3样本结果判定
·样本检测结果Ct值≤38，有明显指数增长，判定为阳性，表明样本中检测出非洲猪瘟病毒。
·样本检测结果38＜Ct≤40，判定为可疑。应对样本进行复测，若复测结果Ct值仍在38~40之间，有明显指数增长，则判定为阳性，否则为阴性。
·样本检测结果无Ct值，判定为阴性，表明样本中未检测出非洲猪瘟病毒。
 
信息声明：本产品供应信息由仪器网为您整合，供应商为（山东风铃物联网科技有限公司），内容包括 （非洲猪瘟PCR试剂盒-非洲猪瘟检测卡）的品牌、型号、技术参数、详细介绍等；如果您想了解更多关于 （非洲猪瘟PCR试剂盒-非洲猪瘟检测卡）的信息，请直接联系供应商，给供应商留言！
供应商产品推荐
    您可能感兴趣的产品