特别提示:包括AccB1I内切酶在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床YL及其他非科研用途!
产品名称:AccB1I内切酶
英文名称:AccB1I
产品货号:GS2139
产品规格:500U
储存条件:冷冻(-20℃)
使用说明
High enzyme concentration may result in star activity.To obtain activity,BSA should be added to the 1x reaction mix to a final concentration of 100μg/ml.Do not use BSA for long incubation.
技术规格
Unit definition |
One unit of the enzyme is the amount required to hydrolyze 1 μg of Lambda DNA in 1hourat 37℃ in a total reaction volume of 50μl. |
Recognition sites |
G↑GYRCC |
来源 |
Acinetobacter calcoaceticus B1 |
Assayed on |
Lambda DNA |
Optimal buffer |
K(10mMTris-HCl(pH 7.6 at 25℃);10mMMgCl2;100 mM KCl;1 mM DTT.)+ BSA |
Optimal temperature |
37℃ |
Storage conditions |
10mMTris-HCl(pH 7.5);50 mM KCl;0.1 mM EDTA;7 mM 2-mercaptoethanol;200 μg/ml BSA;50%glycerol. |
Ligations |
After 10-fold overdigestion with enzyme more than 95%of the DNA fragments can be ligated and recut. |
Non-specific hydrolisis |
No nonspecific activity was detected after incubation of 1 μg of Lambda DNA with 10 u.a.of enzyme for 16hoursat 37℃. |
Methlation effect |
Methylation sensitivity not tested |
Thermal inactivation |
enzyme is inactivated by incubation at 65℃ for 20 mins. |
Campatible Ends |
BanI,BshNI,BspT107I,HgiCI |
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特点:M-MuLV反转录酶(RNase H-)可以合成长达13kb的cDNA,而普通的M-MuLV反转录酶(RNase H-)仅能合成长达9kb的cDNA;M-MuLV反转录酶(RNase H-)的Z适反应温度为42-45℃并且在55℃时仍然有很高活性,可以避免普通的M-MuLV反转录酶(RNase H-)在37℃反应时的一些不足。
用途:M-MuLV反转录酶(RNase H-)常用于在获得总RNA或mRNA后cDNA条链的合成。M-MuLV反转录酶(RNase H-)合成的cDNA条链后续可以用于PCR、real-time PCR、cDNA第二条链的合成等。M-MuLV反转录酶(RNase H-)也可以用于DNA探针的标记,通过引物延伸(primer extention)来分析RNA,以及用于基因芯片荧光探针的标记。
来源:本M-MuLV反转录酶(RNase H-)由大肠杆菌表达,表达的基因为经过突变优化的编码Moloney Murine Leukemia Virus reverse transcriptase的pol基因片段。
活性定义:One unit of the enzyme incorporates 1 nmol of dTMP into a polynucleotide fraction in 10 min at 37℃. Enzyme activity is assayed in 50 mM Tris-HCl(pH 8.3), 6 mM MgCl2, 10 mM DTT, 40 mM KCl, 0.5 mM dTTP, 0.4 MBq/ml [3H]-dTTP, 0.4 mM polyA·oligo(dT)12-18。
纯度:不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶和RNA酶,可以满足常规反转录合成cDNA条链等的需要。
酶储存溶液:50 mM Tris, pH 8.3, 100mM NaCl, 1 mM EDTA, 5 mM DTT, 0.1% Triton X-100 and 50% glycerol。
Reaction Buffer(5X):250 mM Tris, pH 8.3 at 25℃, 250 mM KCl, 20 mM MgCl2, 50 mM DTT。
失活或YZ:70℃孵育10分钟可以导致M-MuLV反转录酶(RNase H-)失活;EDTA、EGTA等螯合剂、无机磷酸盐或焦磷酸盐以及聚氨(polyamine)对M-MuLV反转录酶(RNase H-)有YZ作用。
本产品中M-MuLV反转录酶(RNase H-)的浓度为200U/μl,用于体积为20微升的反转录体系时足够进行10次反转录反应。
储存条件:-20℃。
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