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AccB7I内切酶

产品信息

特别提示:包括AccB7I内切酶在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床YL及其他非科研用途!


产品名称:AccB7I内切酶
英文名称:AccB7I
产品货号:GS2144
产品规格:200U

储存条件:冷冻(-20℃)

使用说明

High enzyme concentration may result in star activity.

技术规格
 
Unit definition One unit of the enzyme is the amount required to hydrolyze 1μgof Lambda DNA(dcm-)in 1hourat 37℃ in a total reaction volume of 50μl.
Recognition sites CCANNNN↑NTGG
来源 Acinetobacter calcoaceticus B7
Assayed on Lambda DNA(dcm-)
Optimal buffer G(10mMTris-HCl(pH 7.6 at 25℃);10mMMgCl2;50 mM NaCl;1 mM DTT.)
Optimal temperature 37℃
Storage conditions 10mMTris-HCl(pH 7.5);50 mM KCl;0.1 mM EDTA;7 mM 2-mercaptoethanol;200 μg/ml BSA;50%glycerol;Store at -20℃.
Ligations After 5-fold overdigestion with enzyme 95%of the DNA fragments can be ligated and recut.
Non-specific hydrolisis No nonspecific activity was detected after incubation of 1μgof Lambda DNA with 5 u.a.of enzyme for 16hoursat 37℃.
Methlation effect Blocked by overlapping Dcm methylation(CmCWGG):CCANNNCCTGG or CCAGGNNNTGG.
Thermal inactivation enzyme is inactivated by incubation at 65℃ for 20 mins.
Campatible Ends BasI,PflBI,PflMI,Van91I


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名称:Taq DNA聚合酶
货号:BTN51206
规格:500U
本产品是Thermus aquaticus(水生栖热菌)的DNA聚合酶基因在E. coli中表达而得,具有以双链DNA为模板的5′→3′聚合酶活性和5′→3′外切酶活性。Taq DNA聚合酶长为832个氨基酸,分子量为94 Kd。该酶可以广泛用于PCR,RT-PCR,加尾反应等。

产品特点:
1.耐热DNA聚合活性,该酶在90℃以上几乎无DNA合成,在75~80℃时延伸率约150个核苷酸,70℃时为60个核苷酸/秒,55℃时为24个核苷酸/秒。在65~68℃并有Mn2+存在时还具有逆转录活性。
2.热稳定,在PCR混合物中95℃保温40分钟仍可保持50%的活性。
3.Mg2+离子依赖性,MgCl2浓度在2.0mM时该酶催化活性。
4.本酶无3′→5′外切活性,不具3′→5′校对功能,碱基错配机率为2.1×10-4

产品组成:
成分 规格
Taq DNA聚合酶(5U/μL) 20μl
10×PCR Buffer(含Mg2+) 1ml
MgCl2,25mM 1ml
说明书 1份


储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

使用方法:(以λDNA为模板进行PCR扩增反应为例)

1.按下列组份配制PCR反应液。
Taq DNA聚合酶(5U/μl) 0.25μl
10×PCR Buffer(含Mg2+) 5μl
MgCl2(25mM) 根据需要补加
自备dNTP(各2.5mM) 4μl
模板DNA 见下
引物1(20μM) 1μl
引物2(20μM) 1μl
灭菌蒸馏水 Up to 50μl

注:10×PCR Buffer含15mM MgCl2(在PCR体系中的终浓度为1.5mM),是否需要补加MgCl2根据实验决定。但一般不需要补加。
推荐50μL PCR反应体系中模板DNA推荐使用量
哺乳动物基因组DNA 0.5-1μg
酵母基因组DNA 5-500ng
细菌基因组DNA 0.5-50ng
质粒DNA 5-500pg
PCR回收片段 1-100pg



2.PCR反应条件
以λDNA为模板,扩增1kbp的DNA片段的PCR反应条件如下:
\\"以λDNA为模板,扩增1
注:PCR反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况,设定的反应条件(温度、时间等)。

注意事项:
PCR的反应液请在冰中配制,然后置于PCR反应仪上进行PCR反应。这种冷启动法可增强PCR扩增的特异性,减少PCR过程中的非特异性反应,能得到良好的PCR结果。

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货号 名称 规格
SV0125 BfuAI限制性内切酶 1250U|250U
SV0203 Bsp1286I限制性内切酶 2500U|500U|250U
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SV0619 PstI-HF限制性内切酶 50KU|50KU|10KU|10KU|5KU
SV0630 PvuII限制性内切酶 25KU|25KU|5KU|5KU|2500U

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