特别提示：包括7-AAD染色剂试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床YL及其他非科研用途！
产品名称：7-AAD染色剂试剂盒
英文名称：7-AAD Staining Kit
产品货号：GS0264
产品规格：100次|200次
储存条件：冷藏（2-8℃）
概述
7-AAD（7-amino-actinomycin D）是一种核酸染料，它不能通过正常质膜，随着细胞凋亡、细胞死亡过程，质膜对7-AAD的通透性逐渐增加，结合细胞凋亡中DNA的有控降解，在合适波长激发光的激发下可发出明亮的红色荧光，通过7-AAD标记DNA的强弱，将细胞分为三群：7-AAD强为死亡细胞，7-AAD弱是凋亡细胞，7-AAD-为正常活力细胞。7-AAD同PI有着相似的荧光特性，但其发射波谱较PI窄，对其他检测通道的干扰更小，在多色荧光分析中是PI的替代品，可与Annexin V-EGFP/FITC/PE联合使用。
应用
本试剂盒适用于培养的细胞染色，可应用于荧光显微镜、激光共聚焦计或流式细胞仪检测。
组份
7-AAD Stock Solution;1×Assay Buffer
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规格：可染20-30张片
细胞中碱性磷酸酶（cAKP）在碱性的缓冲液中，催化底物水解，生成物进而与一种稳定的重氮盐偶联，生成不溶性的偶氮染料，沉着于有cAKP 活性的部位。适用于血涂片、涂片、细胞涂片或爬片、冰冻切片以及石蜡切片脱蜡梯度入水后。
SNM374可染 20～30 张涂片，组分如下：
试剂一：固定液 10ml×1 瓶。
试剂二：底物液
① 甲液，溶剂5ml×2 瓶；
② 乙粉，粉剂×2 支；
③ 丙粉，粉剂×2 支。
试剂三：复染液
① 苏木素染液，5ml×1 瓶；
② 甲基绿染液，5ml×1 瓶。
附赠疏水膜 1 张。
本试剂盒应置室温密封保存，有效期6个月。
试剂配制：
底物应用液的配制：临用时将1 支乙粉剂倒入1 支甲溶剂中，用微量移液器取少许液体打入小离心管中，反复颠倒离心管，再用微量移液器将离心管中的液体转移到瓶中，如此反复2～3 次，使二者充分混合，完全溶解后才可加入1 支丙粉剂，再充分摇动使其完全溶解，配成底物应用液待用。底物应用液要新鲜配制，用多少配多少。
操作步骤：
① 固定：新鲜血涂片、涂片、细胞涂片或爬片、冰冻切片以及石蜡切片用固定液固定3 min 左右。（石蜡切片脱蜡梯度入水后不需固定）
② 加底物应用液：固定后的样本，滴加新鲜配制的底物应用液盖满样本部分，加盖疏水膜，放置湿盒中，避光37℃孵育15min，水洗。（此时覆盖在样本上的疏水膜会遇水掉下）
③ 复染：趁湿用复染液(苏木素或者甲基绿，两者取其一)染3min 左右。水洗，镜检。
染色结果：
血涂片及涂片的观察：选涂片中厚薄均匀的部位滴加香柏油用油镜检查，灯光适中。细胞核呈紫色，cAKP 阳性者胞浆中出现红至红棕色颗粒，有些为棕褐色或咖啡色颗粒，其强度可按Kaplow 记分法表示。
0 胞浆内无红色或无咖啡色；
1 弥散的红色并偶见红色或咖啡色颗粒；
2 弥散的红色，有中等量的红棕色颗粒；
3 显著的红色，有较多的红棕色或咖啡色颗粒；
4 显著的红色并有粗大的红棕色或咖啡色、深咖啡色颗粒充满胞浆。
