CCK-8 Plus (Cell Counting Kit-8 Plus) 试剂盒是一种适用于细胞增殖和细胞毒性的快速、高灵敏度检测试剂盒。广泛应用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。
产品特点
- 细胞毒性低
- 试剂稳定性好
- 检测成本低
- 检测时间短
- GX批量检测
与其他细胞增殖/毒性检测方法的优势比较
| 检测方法 |
MTT法 |
XTT法 |
WST-1法 |
CCK-8法 |
| 甲臜产物的水溶性 |
差 |
较好 |
好 |
很好 |
| 产品性状 |
粉末 |
2瓶溶液 |
1瓶溶液 |
1瓶溶液 |
| 使用方法 |
配成溶液后使用 |
现配现用 |
即开即用 |
即开即用 |
| 检测灵敏度 |
一般 |
高 |
高 |
高 |
| 检测所需时间 |
较长 |
较短 |
较短 |
非常短 |
| 检测波长 |
560-600 nm |
420-480 nm |
420-480 nm |
430-490 nm |
| 细胞毒性 |
高 |
比较低 |
比较低 |
很低 |
| 试剂稳定性 |
一般 |
较差 |
一般 |
很好 |
| 批量样品检测 |
可以 |
比较适合 |
非常适合 |
非常适合 |
| 便捷程度 |
一般 |
便捷 |
便捷 |
非常便捷 |
注意事项：
1. 每孔应该接种多少细胞？
贴壁细胞每孔至少需要接种1,000个细胞 (100 μl的培养基)，检测白细胞时由于它的灵敏度较低，每孔至少需要接种2,500 个细胞 (100 μl的培养基)，建议先做几个孔摸索接种细胞的数量。如果要使用24孔板或是6孔板实验，请先计算每孔相应 的接种量，并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK- 8溶液。
2. 如何设定空白对照？
在不含细胞的培养基中加入CCK- 8，测定450 nm的吸光度即为空白对照。在做加药实验 (细胞毒性实验) 时，还应考虑药 物的吸收，可在不含细胞，加入药物的培养基中加入CCK- 8，测定450 nm的吸光度作为空白对照。
3. 哪些物质会影响CCK- 8的测定？
当有还原性物质存在时会影响CCK- 8的测定，增加O.D值；在有氧化性物质存在时会YZ测定反应的发生，减小O.D值； 在有酚红存在的情况下，会增加空白吸收，但不影响测定，扣除空白吸收即可。
4. 在做加药实验时，药物对测定是否有影响？如何解决？
有时会有影响。如果药物具有还原性，就会和CCK- 8试剂发生显色反应，增加吸光度。解决办法：首先要确认药物是否 有吸收，在含有药物的培养基中加入CCK- 8，测定450 nm的吸光度，如果它的吸光度比不含药物的培养基 (只加CCK-8) 的吸光度高，则证明药物有影响，可在加CCK- 8之前更换培养基，去掉药物的影响。
5. CCK- 8对细胞的毒性大小如何？
CCK- 8对细胞的毒性相当低，同样的细胞在CCK- 8法检测后还可用于其他细胞增殖的检测实验，如结晶紫检测法，中性 红检测法或DNA荧光检测法等。
6. CCK- 8的保质期有多久？
CCK- 8在避光0-5℃的条件下可以存放1年，在常温下可以保存3周左右，颜色应该为浅红色，如果颜色发生改变，则可能会增加空白吸光度。
7. 我没有450 nm的滤光片，还可以使用哪些其他的滤光片？
您可以使用吸光度在430-490 nm之间的滤光片，但是450 nm滤光片的检测灵敏度。
8. CCK- 8能否对活细胞进行染色?
不能。因为CCK- 8的主要成分是一种水溶性的四唑盐 (WST®- 8)，并通过电子载体1- Methoxy PMS将活细胞中的电子交 换到培养基中的WST®- 8上，因为WST®- 8及其生成的甲臜染料是高度水溶性的，不会进入细胞内，所以CCK- 8不能对 活细胞进行染色。
9. 必须设定参比波长吗？设定的目的是什么？
不一定要设定，CCK- 8试剂在参比波长处没有吸光度。设定参比波长的目的是为了去除由于样品浑浊所带来的吸收。
10. 如果O.D值太低，可以采取什么办法？ 可以采取2个办法：
① 适当增加细胞数量。
② 延长加入CCK- 8试剂后的染色时间。
广州博徕斯生物科技股份有限公司（GUANGZHOU BIO-LIEESCI CO.,LTD）汇聚多位留学归国人员，以世界的技术支撑阵容，注重学科交叉研究，运用的技术手段研究开发各种生物产品用于细胞凋亡和增值方面的研究，并提供一系列相关的技术服务。博徕斯依靠自己灵活的研发策略、整合国内外的研发力量进行研究开发工作，在国内研发高技术、高质量和有价格竞争力的产品，面向世界，服务更多的科研工作者。
目前公司生产的主要试剂有：一步法快速克隆试剂盒、细胞组分分离试剂盒、基因编辑蛋白（CRISPR/Cas9、CRISPR/Cas12a、CRISPR/Cas13a）、CCK8细胞活力检测试剂盒、链霉亲和素修饰磁珠（2.8 μm）等。我们非常期待与您的合作，希望能为您提供高性价比的实验试剂和优质贴心的服务。
