石蜡切片总胆固醇高氯酸萘醌直接染色试剂盒

石蜡切片总胆固醇高氯酸萘醌（PAN）直接染色试剂盒产品说明书（中文版）

主要用途

YIJI石蜡切片总胆固醇高氯酸萘醌（PAN）直接染色试剂是一种旨在通过特殊脱蜡处理和三氯化铁氧化预处理技术，进而使用高氯酸萘醌特异性与胆固醇反应，形成灰蓝色沉积，分析石蜡包埋组织切片中（程度保留的）总胆固醇的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良PAN方法、成功实验证明的。主要适用于各种人体和动物组织石蜡切片中总胆固醇的检测。广泛用于组织病理生理的研究。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，显色敏感。

技术背景

胆固醇（cholesterol）是一类称之为固醇类（sterols）或聚类异戊二烯（polyisoprenoid）或三萜皂甙元（triterpene）的多环化合物（polycyclic compound）。其分子式为cholest-5-en-3β-ol。胆固醇以游离（free form）和脂化结合（ester）两种形式广泛存在于所有动物组织中，主要以非脂化形式存在于细胞膜中。在膜功能和脂代谢以及激素合成中起着重要作用。高氯酸萘醌（perchloric acid-naphthoquinone；PAN）染色技术通过三氯化铁氧化预处理，然后使用高氯酸萘醌还原游离和结合胆固醇，呈现灰蓝素沉积。由于石蜡包埋的组织切片在去石蜡的过程中，有机溶剂诸如二甲苯等容易破坏和减少组织中的胆固醇成分，因此使用非二甲苯类脱蜡，以程度保护组织中的胆固醇成分是高氯酸萘醌染色的关键。

产品内容

YIJI脱蜡液（Reagent A）          毫升

YIJI净化液（Reagent B）   毫升

YIJI清理液（Reagent C）   毫升

YIJI预处理液（Reagent D）   毫升

YIJI染色液（Reagent E）   毫升

YIJI封片液（Reagent F）   毫升

产品说明书   1份

保存方式

保存在4℃冰箱里；YIJI预处理液（Reagent D）和YIJI染色液（Reagent E），避免光照；试剂具有腐蚀性，注意操作安全；有效保证6月

用户自备

毛笔：用于图刷样品表面染色

烘箱：用于烘干样品表面

光学显微镜：用于样品染色后观察分析

实验步骤

一、样品脱蜡处理

• 取出待测的6微米厚的石蜡包埋的组织切片
• 放进80℃烘箱，孵育30分钟
• 室温下静置15分钟
• 小心加上xx微升YIJI脱蜡液（Reagent A）在切片上，铺满整个切片样品表面
• 室温下孵育5分钟
• 小心移去切片上的YIJI脱蜡液（Reagent A）
• 重复实验步骤4至6一次
• 小心加上xx微升YIJI净化液（Reagent B）在切片上，铺满整个切片样品表面
• 室温下孵育5分钟
• 小心移去切片上的YIJI净化液（Reagent B）
• 小心加上xx微升YIJI清理液（Reagent C）在切片上，铺满整个切片样品表面
• 室温下孵育3分钟
• 小心移去切片上的YIJI清理液（Reagent C）

二、样本染色处理

• 小心加上xx微升YIJI预处理液（Reagent D），铺满整个切片样品表面
• 室温下孵育4小时，避免光照和干化
• 小心移去切片上的YIJI预处理液（Reagent D）
• 小心加上xx微升YIJI清理液（Reagent A），清洗样品表面
• 小心移去切片上的YIJI清理液（Reagent A）
• 重复实验步骤4至5二次
• 使用洁净的毛笔置于YIJI染色液（Reagent E）里蘸湿
• 轻轻涂抹切片样品表面两次
• 放进70℃烘箱里孵育2分钟，或直至呈现灰蓝色
• 室温下冷却5分钟
• 小心加上xx微升YIJI封片液（Reagent F）
• 即刻放上盖玻片
• 在一般光学显微镜下观察：胆固醇阳性呈现灰蓝色

注意事项

• 本产品为50次操作
• 试剂含有腐蚀性酸性物质，注意操作安全
• 石蜡包埋前避免二甲苯等透明处理
• 操作时，须戴手套
• 操作时，避免污染母液
• 试剂溶液在样品表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满样品表面
• 在烘箱孵育时，YIJI染色液（Reagent E）涂抹可以重复
• 样品染色完成后，即刻进行光学显微镜观察 
• 染色后数小时，甚至数十分钟，染色会褪色甚至消失
• 本公司提供系列组织细胞胆固醇染色试剂产品

质量标准

• 本产品经鉴定性能稳定

本产品经鉴定显色清晰