非蛋白型Western 封堵液
- 品牌:中国/TIANDZ
- 型号:250 mL
- 产地:国产
- 供应商:上海信裕生物工程有限公司
- 供应商报价:590
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非蛋白型Western 封堵液产品及特点
本产品为即用型免疫印迹膜非蛋白型封堵缓冲液,其不包含任何蛋白质,不会产生使用蛋白类封闭剂时出现的诸如交叉反应和非特异性结合等问题, 在保证有效的封闭效果的同时, 还只具有极低的背景。本产品具有下列特点:
1. 高信噪比,得到的灵敏度。
2. 本产品包括A 型(Tris 缓冲盐溶液,pH7.4,含Kathon 杀菌剂)和B 型( 磷酸盐缓冲液,pH7.4, 含Kathon 杀菌剂)。
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
非蛋白型Western 封堵液细菌的培养和收集:
将含有质粒pBS的DH5α菌种接种在LB固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12小时至对数生长后期。
非蛋白型Western 封堵液质粒DNA少量快速提取:
质粒DNA小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
非蛋白型Western 封堵液(一)、煮沸法
1、将1.5ml培养液倒入eppendorf管中,4℃下12000g离心30秒。
2、弃上清,将管倒置于卫生纸上几分钟,使液体流尽。
3、将菌体沉淀悬浮于120ml STET溶液中, 涡旋混匀。
4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 涡旋振荡3秒钟。
5、将eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。
6、用微量离心机4℃下12000g离心10分钟。
7、用无菌牙签从eppendorf管中去除细菌碎片。
8、取20ml进行电泳检查。
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