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水溶性羧基量子点与氨基分子偶联方案

产品信息

水溶性羧基量子点与氨基分子偶联方案

 

标记所需仪器与试剂

 

2-20μl、20-200μl、100-1000μl 或相似量程的可调高精密及相应枪头,去离子水,磷酸缓冲

 

溶液,0.22μm 针头式滤器,pH 计或精密 pH 试纸(量程为 6-8),涡旋振荡器,磁力搅拌器,

 

待标记分子,手套,护目镜,口罩,实验服等防护用品。

 

操作步骤

 

 

  • 量子点浓度为 5μM

 

  • 待标记分子用磷酸缓冲液(0.01M,PH6.8)稀释至 5mg/ml

 

  • 取一定量的量子点加入到反应器中,开始搅拌,依次加入计算好用量的 EDC 水溶液(10mg/ml)、NHS 水溶液(10mg/ml,调节 PH 至 7.0 左右),搅拌 0.5h。

 

  • 按比例加入待标记分子,搅拌 4h。

 

  • 反应结束,用 0.22μm 针头式滤器将样品过滤,测浓度。于 4℃保存。

 

 

注意事项

 

 

  • 试剂检查:量子点样品在 365nm 紫外光照射下为发荧光的均质溶液。

 

  • EDC 溶液要现用现配。

 

  • 调节 pH 时,要迅速,选择较稀浓度 NaOH 调节(建议 1M 左右),防止溶液调节过碱。

 

  • 建议反应摩尔比为:QD-COOH:EDC:NHS:NH2-R=1:(2000-5000):(1000-2500):(5-50)。

 

 

参考比例:

 

QD-COOH(5uM)

EDC10mg/ml

NHS10mg/ml

NH2-R5mg/ml

实验比例

 

 

 

 

 

 

 

20μl

3.6μl

1.15μl

15μl

1:2000:1000:5

 

20μl

9.0μl

2.90μl

30μl

1:5000:2500:10

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

备注:本实验方案只供参考,具体实验需进一步确定实验条件,建议反应体系中量子点浓度

 

不得小于 1μM,客户可根据产品自行调整反应比例。

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