Nanofecter转染试剂

一、产品简介
 
Plasmidfecter 是具有较高阳离子电荷密度的纳米材料分子，能GX地包裹大分子 DNA、小分子
 
寡核苷酸、siRNA 形成小的带正电荷的纳米复合物微粒，这些微粒可以GX的结合到带负电荷的
 
细胞表面残基，并通过细胞内吞作用进入细胞。Plasmidfecter 含有的氨基在细胞内发生质子化，使
 
囊泡释放复合物微粒进入细胞质，复合物解体后，DNA 等核酸分子就能进一步进入到细胞核中，
 
参与核内转录和表达。
 
本产品通过多种细胞测试和长期实验验证，与传统的脂质体相比无论在转染效率还是在实验
 
操作上都具有明显的优势，主要表现为：
 

• 转染效率高，适用于大多数细胞，可用于 DNA 和 RNA 转染

 

• 稳定性高，实验重复性好，数据可靠，省时省力

 

• 细胞毒性低，细胞转染后保持高活性，对细胞状态影响小，实验结果更真实

 

• 经济实惠，转染效率高，用量少，价格低

 
二、操作步骤（以 24 孔板为例）
 

• 接种细胞：

 

• 贴壁细胞：转染前一天用无双抗的完全培养基将细胞接种于 24 孔板中，每孔接种

 
500μL 细胞悬液，约 0.5~2×10⁵ 个细胞，转染前细胞密度应达到 70~90%。若使用其他培养皿，可参照表 1、表 2 适当调整细胞接种量、各组分使用量等。
 

• 悬浮细胞：转染前一天用无双抗的完全培养基将细胞接种于 24 孔板中，每孔 500μL 细胞悬液，约 4~8×10⁵ 个细胞，根据试验要求和细胞生长特性适当调整接种量。

• Plasmidfecter/DNA 复合物的制备

 

• 取 2 个无菌 1.5mL 离心管，均加入 50μL Opti-MEM 或基础培养基。

 

• 将 1μg 质粒 DNA 和 2μL Plasmidfecter 分别加入 2 个离心管内，轻轻混匀，室温孵育

 
5min。
 

• 将 2  个离心管内液体混合，轻轻混匀，室温孵育 20min ，从而获得 100μL

 
Plasmidfecter/DNA 复合物。