Easy cloning T-vector (pEC-T) 克隆及鉴定试剂盒
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· T载体 pSC-T说明
novoprotein pSC-T（Simple Cloning T-Vector）是一种PCR产物GXTA克隆的专用T载体，它由pUC18载体改造而成。在PCR克隆构建过程中，为了进一步的克隆步骤，常会在PCR产物的两端引入专门的酶切位点，如T载体上已带有相同的酶切位点，会对下一步的酶切连接带来不利的影响。为消除多克隆酶切位点带来的负作用，SinoBio Simple Cloning T-Vector去除了PCR产物插入区域两侧所有的酶切位点。PCR产物克隆后如果使用其两端的酶切位点进行酶切时，T载体上不会有相同的酶切位点影响酶切反应，可以大大提高酶切效率，增加亚克隆成功率。多克隆位点的消除并不影响β-半乳糖苷酶的正常表达，PCR产物克隆后仍可以利用α-互补性进行蓝白斑筛选，挑选阳性克隆。由于本pSC-T载体上消除了多克隆酶切位点，克隆后的PCR产物将无法使用载体上的限制酶切下，需要在PCR扩增引物上导入合适的酶切位点。
· 产品组成
pSC-T vector（25 ng/μl） 40μl
T4 DNA Ligase 30μl
2×Quick Ligation Buffer 500μl
10×Ligation Buffer 500μl
Control Insert（50 ng/μl） 10μl
2×Fast Taq Master Mix (Quick Load型) 2×1ml
DL2,000 Plus DNA Marker 100μl
· 质量保证
Control Insert克隆后的白色菌落中，有90%以上含有Insert DNA片段。
Control Insert经克隆后，经测序确认“T” 突出的存在。
· 15分钟快速连接
随酶提供独特配方的2×快速及10×普通T4 DNA Ligation Buffer;
使用2X 快速buffer在室温(25°C)下，仅需15分钟即可完成连接反应;
自带超快PCR鉴定2×Fast Taq Master Mix及DNA Marker
2×Fast Taq Master Mix (Quick Load型)已含有PCR反应所需的快速型PCR聚合酶、dNTP混合物、MgCl2、上样染料以及反应缓冲液预先，使用时只需再加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应。其扩增速度为普通Taq酶的数倍，因此可大幅度缩短PCR鉴定过程所需要的时间， 试剂盒自带预混1×Loading Buffer的DL2,000 Plus DNA Marker，能满足绝大部分PCR产物电泳的需要。
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