cNDA文库构建技术服务

（1）普通cDNA文库（质粒文库、噬菌体文库）构建

以总RNA为模板，用SMART方法在体外反转录成cDNA，与适当的常用质粒载体连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织或细胞的cDNA文库。cDNA文库中获得的是已经经过剪接，去除了内含子的cDNA。

材料要求：

客户可提供组织（100～200ug）、细胞（10⁶）或总RNA (>1ug )，请务必保持样品新鲜，RNA 无任何降解，植物材料应避免过老的组织，尽量用柔嫩部位，以确保文库质量。同时请尽量提供物种基因组背景资料信息，如：基因组大小，基因平均长度，预计表达的基因数量等等。

文库特点：
a.只需要少至25ng的mRNA或者50ng的Total RNA
b.采用Clontech SMART专利技术，全长比率高。

交货内容：

A. 产物电泳图谱；

B. 初始库，保存在-20℃；

C. 文库评价数据，包括库容量，插入片段平均长度，重组效率 , cDNA 完整性评价等。

D. 包含实验流程，材料，方法等在内的完整的实验报告。

服务周期：得到合格的总RNA后，25个工作日。

作为国内cDNA文库构建的主流服务供应商，在长期稳定的实验服务过程中积累了丰富的经验，我们已经成功构建的cDNA文库涉及如下材料：

动物：

人、大鼠、小鼠、猪、牛、蟹、鲫鱼、多宝鱼、壁虎、昆虫、线虫、原生动物等。涉及组织部位包括肾脏、脑、腮、脾、肠、心脏、肝脏等以及各种培养的细胞。

植物：

拟南芥、水稻、棉花、小麦、油菜、地瓜、银杏、茶、槟榔、椰子、木薯、百合、土豆、紫菜。涉及组织部位包括整株小苗，不同发育时期的种子、胚、胚乳，不同发育时期的花、雄蕊、雌蕊，不同发育时期的顶端分生组织，叶、根尖、穗等。

多种细菌、动物病毒等。

（2）均一化cDNA文库

均一化cDNA文库是克服基因转录水平上巨大差异给文库筛选和分析带来障碍的有效措施，有利于研究基因的表达和序列分析。我们基于双链特异性核酸酶(Duplex-Specific Nuclease, DSN)的先进cDNA文库均一化技术构建均一化cDNA文库，能减低高丰度表达基因100倍以上，有效富集低丰度表达基因。

文库特点：

1.无需反复杂交过程，均一化程度高。

2.均一化后平均插入片断大小无明显变化。

（3）全长文库构建

公司利用自己的专有技术和专门试剂盒，进行全长文库构建服务。尤其适合希望获得高比例全长基因的客户。

文库特点：

 不经过PCR过程，容易获得低丰度基因。

 全长比例高（全长比例至少大于80%）

 但样品用量大，需要25ug的mRNA，因此，不适合样品量少的材料。