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双通道PAM-100测量系统

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Dual-PAM-100: 一套KQ强大的测量系统
Schreiber教授因发明PAM系列调制叶绿素荧光仪而获得首届国际光合作用协会(ISPR)创新奖


1985年开始商品化的全世界DY台调制荧光仪PAM-100被几代科学家所广泛采用。Dual-PAM-100相当于两台PAM-100的功能。一方面,它继承了PAM-100的所有优点,可以进行复杂的叶绿素荧光分析(PS II活性);另一方面,它还可以通过测量P700的吸收变化来检测PS I的活性。特别需要强调的是,Dual-PAM-100可以在完全同步的情况下测量叶绿素荧光和P700吸收变化。此外,通过特殊的激发-检测单元还可以测量叶绿体或微藻的许多重要光合参数,如跨膜质子梯度delta pH(通过9-AA荧光或吖啶黄荧光)、类囊体膜的电势(通过类胡萝卜素的差示吸收,“P515”)和NADP的氧还状态(通过NADPH荧光)等。如果需要极高的灵敏度可以通过连接光电倍增管检测器实现。

 

特点
1)声誉卓著的PAM-101/102/103的升级版
2)专业的Dual-PAM操作软件
3)自动测量模式下操作极其简单
4)创新的光-电配件使得仪器非常便携
5)整合式光源(红光、蓝光、远红光、单脉冲饱和闪光、多脉冲饱和闪光)
6)多版本可选,用于测量高等植物和微藻
7)利用饱和脉冲法测量PS I活性
8)同步测量PS I和PS II的量子产量
9)可以分析蓝藻的光合作用
10)可选配用于测量pH、NADPH和P515等的附件
功能
1)PS I和PS II的光化学量子产量
2)叶绿素荧光淬灭参数
3)系统间电子传递动力学
4)系统间电子载体库的大小(特殊的ST/MT方法)
5)围绕PS I的环式电子传递动力学
6)PS I和PS II能量传递的光响应曲线
7)荧光快速上升相(线性时间和对数时间)
8)测量PQ库的还原态
9)测量光系统II的吸收截面积

 

与PAM-100相比,Dual-PAM-100的主要特点:
1)Dual-PAM-100完全由电脑控制,通过专业的Windows操作软件DualPAM进行。
2)软件DualPAM除了基本的系统操作外,还提供许多特定的测量程序。
3)所有必需的光源(激发叶绿素荧光的红光和蓝光、测量P700的近红外光、红色和蓝色的光化光、单脉冲与多脉冲饱和闪光、远红光)均整合在基础系统中,不再需要复杂的电缆连接。
4)采用了专为Dual-PAM-100设计的许多新光-电配件,使得激发-检测单元和整合式光源非常便携、非常便于安装和拆卸。
5)所有的光源都可通过软件在2.5 μs的时间分辨率下控制。
6)测量光的频率范围非常大(1 Hz~400 KHz),因此同一个测量光源既可以用于测量Fo,也可以用于诱发快速动力学(如荧光快速上升相或闪光弛豫动力学)。
7)用户可将针对特殊实验/样品的仪器设置存储起来,此后可在完全相同的设置下重复实验。
8)叶绿素荧光和P700的信号变化完全同步,并且是用同一个检测器检测,且不会互相干扰。
9)测量蓝藻时注意:用红光激发PS II的荧光,用蓝光或远红光激发PS I。
   


   

Dual-PAM-100的这些特点开启了基础光合作用研究和应用光合作用研究的新途径。过去,同步测量PS I和PS II的量子产量需要很强的专业背景和熟练的操作技巧,只有光合作用领域的少数专家会这项技术。现在,即使是初学者,也可迅速掌握同步测量PS I和PS II活性的技术,不再需要复杂的操作技巧。

同步测量叶绿素荧光(PS II)和P700(PS I)的诱导曲线

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同步测量叶绿素荧光(PS II)和P700(PS I)的光响应曲线


专为Dual-PAM-100设计的Windows操作软件DualPAM功能强大,允许独立记录叶绿素荧光或P700,或同步记录叶绿素荧光和P700,记录每次打开饱和脉冲时的动力学变化,以线性时间多对数时间记录快速荧光上升动力学(分辨率2.5 us),分析各种荧光参数的变化等等。

P700的测量

以线性时间记录的荧光快速上升动力学

以对数时间记录的荧光快速上升动力学(相当于O-J-I-P相)


Kramer的新荧光参数资料,这是一篇2004年发表在Photosynthesis Research 上的文章,见如下描述:

Kramer提出的新参数:
qL,用于代替qP
Y(II)=Y=(Fm’-F)/Fm’
Y(NPQ) 表征PS II处过量光能耗散为热,与光保护有关
Y(NO) 表征PS II处过量光能引起的光损伤
Y(II)+Y(NPQ)+Y(NO)=1

Schreiber教授和其学生Klughammer博士新设计的Dual-PAM-100中,借鉴测量叶绿素荧光的方法,新增了几个参数:
Y(I) PS I的量子产量或PS I的光合效率
Y(ND) 表征PS I处过量光能耗散为热,与光保护有关
Y(NA) 表征PS I处过量光能引起的光损伤
Y(I)+Y(ND)+Y(NA)=1

色素分子处于氧化态和还原态时,或增加/减少亚基后,其吸收峰会有变化。基于此原理,P700吸收变化、P515吸收变化(类胡萝卜素能态)、P505吸收变化(叶黄素循环)等均可通过Dual-PAM-100测量。主机共用,只是更换激发-检测单元即可。此外,Dual-PAM-100还可用于测量NADPH荧光、9AA荧光(跨膜质子梯度)等。

部分利用DUAL-PAM-100发表的P700文献
 

1.Wood, W. H., et al. (2018). "Dynamic thylakoid stacking regulates the balance between linear and cyclic photosynthetic electron transfer." Nature Plants: 1.

2.Huang, J.-Y., et al. (2018). "Regulating photoprotection improves photosynthetic growth and biomass production in Q C-site mutant cells of the cyanobacterium Synechocystis sp. PCC 6803." Photosynthetica: 1-8.

3.Huang, W., et al. (2018). "Photoinhibition of photosystem I in Nephrolepis falciformis depends on reactive oxygen species generated in the chloroplast stroma." Photosynthesis Research: 1-12.

4.Larosa, V., et al. (2018). "Mitochondria affects photosynthetic electron transport and photo-sensitivity in a green alga." Plant Physiology: pp. 01249.02017.

5.Li, X., et al. (2018). "The interactive effects of diclofop-methyl and silver nanoparticles on Arabidopsis thaliana: Growth, photosynthesis and antioxidant system." Environmental Pollution 232: 212-219.

6.Mhatre, A., et al. (2018). "Pilot scale flat panel photobioreactor system for mass production of Ulva lactuca (Chlorophyta)." Bioresource Technology 249: 582-591.

7.Pfündel, E. E., et al. (2018). "Linking chloroplast relocation to different responses of photosynthesis to blue and red radiation in low and high light-acclimated leaves of Arabidopsis thaliana (L.)." Photosynthesis Research.

8.Robles, P., et al. (2018). "Arabidopsis mTERF6 is required for leaf patterning." Plant Science 266(Supplement C): 117-129.

9.Yamatani, H., et al. (2018). "Impairment of Lhca4, a subunit of LHCI, causes high accumulation of chlorophyll and the stay-green phenotype in rice." Journal of Experimental Botany.

10.Yan, D., et al. (2018). "Variation in cell size of the diatom Coscinodiscus granii influences photosynthetic performance and growth." Photosynthesis Research: 1-12.

11.Yi, X.-P., et al. (2018). "Changes in activities of both photosystems and the regulatory effect of cyclic electron flow in field-grown cotton (Gossypium hirsutum L) under water deficit." Journal of Plant Physiology 220: 74-82.

 

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