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血清血浆尿液游离RNA提取试剂 RNA纯化

产品信息

  • 特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

    北京百奥莱博专业生产销*(代"售")血清血浆尿液游离RNA提取试剂 RNA纯化，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。


    名称：血清血浆尿液游离RNA提取试剂 RNA纯化
    编号：WE0201
    品Pai：百奥莱博
    英文名：RNAtiqu Circulating RNA Extraction Reagent
      本品特别适用于从血清、血浆中分离纯化包括microRNA和其他小RNA(<200nt)在内的总RNA。本品灵活处理不同起始量的样品，在有效裂解样本的同时，可有效保存RNA的完整性，提取的总RNA完整性好，无蛋白和DNA污染，提取的RNA可用于RT-PCR、Northern Blot和分子克隆等下游实验。

    自备试剂：*仿、异丙醇、75%乙醇、无RNase的水(新开封或提取RNA专用)。

    实验前准备及重要注意事项/strong>：
    1、预防RNase污染，应注意以下几方面：
    ① 使用无RNase的塑料制品和枪头，避免交叉污染。
    ② 玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时，塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡10分钟，用水彻底冲洗后高压灭菌。
    ③ 配制溶液应使用无RNase的水。
    ④ 操作人员戴一次性口罩和手套，实验过程中要勤换手套。
    2、提取的样品避免反复冻融，否则影响RNA提取得率和质量。
    3、本品中含有*酚，具有毒性和腐蚀性。如果吸入体内、接触皮肤、吞食等会导致中毒、灼伤以及其他身体伤害。使用本制品时应穿戴防护物品，如防护服装、手套、眼罩、面罩等。如果不小心接触到眼睛，应立即用大量的水冲洗并前往医院ZL。
    4、样品用游离RNA(血清血浆尿液)提取试剂匀浆后，如不即刻加入*仿，置于-70℃可放置一个月以上。
    5、保存在75%乙醇中的RNA沉淀，2～8℃可以保存一周，-20℃条件下可以保存1年。RNA半衰期比较短，容易降解，建议提取后尽快进行后续实验，如反转录成cDNA，Northern Blot等。
    6、若下游实验对DNA非常敏感，建议用不含RNase的DNase I(货号：WE0213)对RNA进行处理。

    操作步骤：
    1、取200μl新鲜或者冻存的血清或血浆，加入3倍体积的游离RNA(血清血浆尿液)提取试剂。振荡30秒，充分混匀。
    注意：样本加入游离RNA(血清血浆尿液)提取试剂后，可能会出现沉淀，经过振荡混匀后，沉淀基本消失。若仍有少量沉淀，不影响下游实验，可继续操作。
    2、将处理后的样品在室温放置5分钟，使蛋白核酸复合物完全分离。
    3、向以上溶液中加入*仿，每使用1ml血清/血浆样本专用总RNA提取试剂加入0.2ml*仿，盖好管盖，剧烈振荡15秒，室温放置2-3分钟。
    注意：如不能涡旋混匀，可手动快速颠倒混匀2分钟。
    4、4℃ 12000rpm离心20分钟，此时样品分成三层：红色有机相，中间层和上层无色水相，RNA 主要在水相中，把水相转移到一个新的无RNase的离心管(自备)中。
    5、在得到的水相溶液中加入等体积异丙醇，颠倒混匀，室温放置30分钟。或-20℃沉淀过夜，效果更佳。
    6、4℃ 12000rpm 离心20分钟，弃上清。
    注意：离心前RNA沉淀经常是看不见的，离心后在管侧和管底形成胶状沉淀。
    7、加入75%乙醇(用无RNase的水配制)洗涤沉淀。每使用1ml游离RNA(血清血浆尿液)提取试剂加入1ml 75%乙醇对沉淀进行洗涤。
    8、4℃ 12000rpm离心3分钟，小心吸弃上清，注意不要吸弃RNA沉淀。
    注意：剩余的少量液体可短暂离心，然后用枪头吸出，注意不要吸弃沉淀。
    9、室温放置2-3分钟，晾干。加入30-100μl无RNase的水，充分溶解RNA，得到的RNA保存在-70℃，防止降解。
    注意：沉淀不要过分干燥，以免难于溶解。

    储存条件：2～8℃。

    更多有关血清血浆尿液游离RNA提取试剂 RNA纯化的价格及使用说明等，请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：
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    137-08-6 (Vitamin B5)  D-Pantothenic acid D-泛酸*
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    BL1293 考马斯亮蓝快速染色液
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    血清血浆尿液游离RNA提取试剂 RNA纯化关键词：WE0201,血清血浆尿液游离RNA提取试剂,RNAtiqu Circulating RNA Extraction Reagent


    ·超纯dNTP混合液(10 mM)
    编号：WE0160
    英文名称：UltraPure dNTP Mix(10 mM each)
    规格：1ml|5ml
      本产品是dATP、dGTP、dCTP、dTTP的等摩尔数混合物(各10mM)，可与所有的耐热聚合酶配套使用。UltraPure dNTP纯度均达到99%以上。

    使用方法：
    UltraPure dNTP(10 mM each)可直接使用，或用调节至中性(PH7.5 左右)的无菌超纯水稀释至适当浓度使用。可用于要求较高的PCR反应(如Real-time PCR)、DNA序列测定、分子标记、cDNA合成等。

    储存条件：-20℃。

    ·T4 DNA连接酶
    编号：WE0239
    英文名称：T4 DNA Ligase
    规格：100U|500U
      T4 DNA Ligase 是从表达T4 DNA Ligase 基因的大肠杆菌经诱导表达后分离纯化而来的，催化相邻DNA链的5’磷酸基团和3’羟基基团以磷酸二酯键结合反应。该酶可催化平末端或粘性末端DNA之间的连接，还可修复双链DNA、RNA、DNA/RNA杂交双链中的单链切口。本品可应用于DNA插入片段和载体DNA的粘性末端和平末端的连接，以及线性DNA的自身环化。

    产品组成：

     
    组份 100U 500U
    T4 DNA Ligase，5 U/μl 20μl 100μl
    10×Ligation Buffer 150μl 750μl
    50%PEG Solution 150μl 750μl


    实验前准备及重要注意事项
    1、T4 DNA Ligase的ZZ用量不要超过推荐的用量，否则影响连接效率。
    2、PEG可以极大提高平末端的连接效率，我们推荐加入终浓度为5% PEG Solution以提高平末端的连接效率。
    3、为了提高转化效率，建议所加入连接产物的量不要超过感受态细胞体积的10%。
    4、由于T4 DNA Ligase中含有甘油，比较粘稠容易挂壁，建议使用之前短暂离心将液体收集到管底，取样时枪头尽量不要深入液面太深以免粘在枪头上造成损失。

    使用方法：

    一、粘性末端的连接：

    1、按以下体系配制反应液：
    组份 20μl体系 终浓度
    线性载体DNA Xμl 20-100ng
    插入DNA片段 Yμl 插入片段：载体1:1-5:1
    10×Ligation Buffer 2μl  
    T4 DNA Ligase，5 U/μl 0.2μl 1 U
    ddH2O 补充至20μl  


    2、涡旋震荡，瞬间离心，将管壁上的溶液收集到管底。
    3、反应条件：22℃孵育10分钟。
    4、瞬间离心，将管壁上的溶液收集到管底，65℃孵育10分钟或70℃孵育5分钟以灭活T4 DNA Ligase。
    5、可取5μl连接产物热击转化50μl感受态细胞或取1-2μl连接产物电击转化50μl感受态细胞。
    注意：如需电击转化，推荐用乙醇沉淀法去除T4 DNA Ligase后进行电击转化。

    二、平末端的连接：

    1．反应体系：
    组分 20μl体系 终浓度
    线性载体DNA Xμl 20-100ng
    插入DNA片段 Yμl 插入片段：载体1:1-5:1
    10×Ligation Buffer 2μl  
    T4 DNA Ligase，5 U/μl 1μl 5 U
    50%PEG Solution 2μl 5%
    ddH2O 补充至20μl 20μl


    2、涡旋震荡，瞬间离心，将管壁上的溶液收集到管底。
    3、反应条件：22℃孵育1小时。
    4、瞬间离心，将管壁上的溶液收集到管底，65℃孵育10分钟或70℃孵育5分钟以灭活T4 DNA Ligase。
    5、可取5μl连接产物热击转化50μl感受态细胞或取1-2μl连接产物电击转化50μl感受态细胞。
    注意：如需电击转化，推荐用乙醇沉淀法去除T4 DNA Ligase后进行电击转化。

    三、线性DNA的自身环化：

    1、反应体系：
    组分 50μl体系 终浓度
    线性载体DNA Xμl 5-50ng
    10×Ligation Buffer 5μl  
    T4 DNA Ligase，5 U/μl 1μl 5 U
    ddH2O 补充至50μl 50μl

    2、涡旋震荡，瞬间离心，将管壁上的溶液收集到管底。
    3、反应条件：粘性末端22℃孵育10分钟；平末端22℃孵育1小时。
    4、瞬间离心，将管壁上的溶液收集到管底，65℃孵育10分钟或70℃孵育5分钟以灭活T4 DNA Ligase。
    5、可取5μl连接产物热击转化50μl感受态细胞或取1-2μl连接产物电击转化50μl感受态细胞。
    注意：如需电击转化，推荐用乙醇沉淀法去除T4 DNA Ligase后进行电击转化。

    储存条件：-20℃。


    血清血浆尿液游离RNA提取试剂 RNA纯化关键词：WE0201,血清血浆尿液游离RNA提取试剂,RNAtiqu Circulating RNA Extraction Reagent

    20325-40-*(代"0") O-Dianisidine dihydrochloride 邻联茴香胺(固蓝B盐)
    3-叔丁基*(代"*")酚 L(-)-Pipecolinic acid 585-34-2
    3767-28-0 PNPG 对硝基*(代"*")基-α-D-吡喃半乳糖苷
    Ringer"s液(哺乳动物专用)   500ml
    BTN80921 96孔板病毒DNAOUT(离心法) 96 Microwell Plate Viral DNAOUT
    *丁酸 Carboxypeptidase B 1821-12-1
    ARB14062 鲑鱼降*素(SCT)免费代测 Salmon calcitonin,sct ELISA KIT
    1405-87-4 杆菌肽 Bacitracin
    PY02-123  *化*蔗糖琼脂  250克  
    ARB13702 兔转化生长因子β2(TGFβ2)elisa检测操作说明书 Rabbit transforming growth factorβ2,tgfβ2 ELISA KIT
    ARB11050 人表面活性蛋白D(SP-D)ELISA检测服务 Human surfactant protein d,sp-d ELISA KIT
    ARB12161 大鼠白介素23(IL-23)elisa检测说明书 Rat interleukin 23,IL-23 ELISA KIT
    孕酮 Isovanillic acid 57-83-0
    甲醛固定组织蛋白提取试剂盒   50T|100T
    BL0896 FITC标记羊抗人C3抗体
    ARB11467 人胰岛素受体β(ISR-β)酶标法分析 Human insulin receptor β,isr-β ELISA KIT
    木聚糖 Sodium pyruvate 9014-63-5
    ARB11060 人转化生长因子β(TGF-β)ELISA代测服务 Human transforming growth factor β1,tgf-β1 ELISA KIT
    F030501 FITC标记小鼠抗乙肝核心抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBcAg*FITC
    2′-脱氧尿苷 TMB?2HC1 951-78-0
    PY04-017  新鲜番茄汁  5ml×10支  每支添加于95ml改良番茄汁琼脂培养基基础中制成改良番茄汁琼脂培养基，用于乳酸菌菌落总数的测定
    汞色素脱色试剂盒   2×100ml

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