乙酸钠(pH5.2) 分子生物学试剂

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")乙酸*(pH5.2) 分子生物学试剂，我公司是生物试剂、化学试剂专业供应商，立足北京，服务全国的高校、研究所、医院、企业科研部门，欢迎各位老师来电垂询订购。

名称：乙酸*(pH5.2) 分子生物学试剂
规格：500ml
编号：QN0930
产地：国产|进口
英文名：3M Sodium acetate, pH 5.2
本品为3M的乙酸*溶液，pH为5.2。乙酸*可用于测定铅、铜、镍和铁等，也是一种常用的缓冲剂。在核酸提取中，加入乙酸*缓冲液，可调节盐离子的浓度，中和核酸分子的负电荷，便于加入乙醇后使DNA沉淀下来。

别名：醋酸*
分子量：136.08
储存条件：室温，有效期一年。

配制方法：
3 M 乙酸*(pH=5.2)的配制：在800ml水中溶解408.1g三水乙酸*，用冰醋酸调节pH值至5.2，加水定容至1L，分装后高压。

欲了解更多乙酸*(pH5.2) 分子生物学试剂的品Pai、产地、价格及说明书等产品信息，请致电北京百奥莱博科技有限公司，我们将竭诚为您服务，另外，以下产品正在火爆促销:

·核黄素腺嘌呤二核苷酸二*
编号：QN0451
英文名称：Flavin Adenine Dinucleotide Disodiu*(代"m") Salt Hydrate
规格：20mg
别名：半硬化牛脂脂肪酸
CAS号：84366-81-4
分子量：829.52
纯度：94%
储存条件：2～8℃

·维生素B2(核黄素)
编号：QN0110
英文名称：Ribofavin;Vitamin B2
规格：25g
CAS号：83-88-5
分子式：C17H20N4O6
分子量：376.4
储存条件：RT
纯度：≥98%
性状：黄色到橙黄色结晶性粉末

·嘌呤霉素
编号：QN0078
英文名称：Puromycin
规格：25mg|100mg
本品是蛋白质合成YZ剂。YZ细菌、藻类原生物和哺乳动物细胞生长。

CAS：58-58-2
分子式：C22H29N7O5·2HCl
分子量：544.43
储存条件：-20℃
纯度：≥98%(TLC)
性状：白色或白中带有黄色的粉末
别名：二盐*(代"酸")嘌呤霉素;嘌呤霉素盐*(代"酸")盐
溶解性：溶于水，参考浓度50mg/ml。

嘌呤霉素(Puromycin)是由白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)发酵代谢产生的一种*基糖苷类抗生素，通过YZ蛋白质合成而杀死革兰氏阳性菌，各种动物和昆虫细胞。某种特殊情况下有效作用大肠杆菌。作用机制在于嘌呤霉素是*酰-tRNA分子3’末端的类似物，能够与核糖体的A位点结合并掺入到延伸的肽链中。嘌呤霉素同A位点结合后，不会参与随后的任何反应，从而导致蛋白质合成的提前终止并释放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟多肽。

嘌呤霉素产生菌Streptomyces alboniger内发现的pac基因编码嘌呤霉素N-乙酰转移酶(PAC)，赋予机体对嘌呤霉素产生抗性。这一特性如今普遍应用于筛选特定携带pac基因质粒的哺乳动物稳定转染细胞株。

嘌呤霉素在细胞稳转株筛选中的普遍应用与慢病毒载体的特性有关，现在商业化的慢病毒载体多数都携带pac基因。在某些特定情况下，嘌呤霉素亦可以用来筛选转化携带pac基因质粒的大肠杆菌菌株。

使用方法：

1.建议使用浓度
哺乳动物细胞：1-10 μg/mL，ZJ浓度需要杀灭曲线来确定;
大肠杆菌：LB琼脂培养基筛选稳定转化pac基因的大肠杆菌，使用浓度为125μg/mL。注：使用嘌呤霉素筛选大肠杆菌稳转株需要精确的pH值调节，而且受宿主细胞本身的影响。

2.溶解方法
用蒸馏水溶解嘌呤霉素配制成50 mg/ml的母液，经0.22 μm滤膜过滤CJ后分装于-20℃冻存;也可溶于甲醇，配制成10 mg/ml的储存液。

3. 嘌呤霉素杀灭曲线的确定(以shRNA转染或者慢病毒转导为例)
嘌呤霉素有效筛选浓度跟细胞类型、生长状态、细胞密度、细胞代谢情况及细胞所处细胞周期位置等有关。为了筛选到稳定表达的shRNA细胞株，确定杀死未转染/转导细胞的ZD浓度嘌呤霉素至关重要。建议初次做实验的客户一定要建立适合自身实验体系的杀死曲线(kill curve)。
1)Day 1：24孔板内以5~8 x 104 cells/孔的密度铺板，铺足够量的孔以进行后续的梯度实验。37℃细胞孵育过夜;
2)Day 2：
a)准备筛选培养基：含不同浓度嘌呤霉素的新鲜培养基(如0-15μg/mL，至少5个梯度);
b)往孵育过夜后的细胞内更换新鲜配制的筛选培养基;之后37℃孵育细胞;
3)Day 4：更换新鲜的筛选培养基，并观察细胞存活率。
4)根据细胞的生长状态，约2-3天更换新鲜的筛选培养基;
5)每日监测细胞，观察存活细胞率，从而确定抗生素筛选开始4-6天内有效杀死非转染或者所有非转导细胞的药物ZD浓度。

4. 哺乳动物稳定转染细胞株的筛选
等转染含有pac基因的质粒后，细胞在含有嘌呤霉素的培养基中增殖，以筛选出稳定转染子。
1)细胞转染48h后，将细胞(原样或稀释)置于含有适当浓度嘌呤霉素的新鲜培养基中培养。
注意：当细胞处于分裂活跃期时，抗生素作用最明显。细胞过于密集，抗生素产生的效力会明显下降。进行细胞分盘使其密度不超过25%。
2)每隔2-3天，移除和更换含有嘌呤霉素的培养基。
3)筛选7天后评估细胞形成的病灶。病灶可能需要额外的一周或者更多时间，这依赖于宿主细胞系和转染筛选效率。注意：每日进行细胞生长状态的观察。嘌呤霉素的筛选至少需要48h，有效浓度嘌呤霉素的筛选周期一般在3-10天。
4)转移和放置5-10个抗性克隆到一个35mm的培养皿中，用选择培养基继续培养7天。此次富集培养是为日后的细胞毒性实验做准备。

注意事项：
1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 嘌呤霉素为有毒化合物，操作时请小心拿放。


乙酸*(pH5.2) 分子生物学试剂关键词：乙酸*,pH5.2,醋酸*


·SABC免疫组化试剂盒(小鼠/兔IgG)(FITC)
编号：QN1221
英文名称：SABC(Mouse/Rabbit IgG)-FITC Kit
规格：100T-200T
本试剂盒适合于一抗为小鼠或者兔IgG来源的免疫组化实验，FITC荧光检测。

SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的，用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质，同亲和素一样，对生物素有极高的亲和力，亲和素是一个碱性蛋白质(IP=10)，经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性，对组织和细胞的非特异吸附很低，基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex，SABC大约可形成一百个左右的FITC和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的FITC将保证SABC具有很高的敏感性。

试剂盒组分：
封闭液(5% BSA)———————————10ml
Bio-羊抗小鼠/兔IgG浓缩液——————100ul
SABC-FITC浓缩液-——————————100ul
稀释液———————————————30ml
抗荧光衰减封片剂——————————10ml

操作步骤：以石蜡切片热修复为例
1. 切片常规脱蜡至水。
2. 可选步聚：
a、热修复抗原，将切片浸入0.01M 柠檬酸*缓冲液(PH6.0),电炉或微波炉加热至沸腾后断电，间隔5-10分钟后，反复1-2次。冷却后PBS(pH7.2-7.4)洗涤1-2次。
b、酶消化，滴加消化液，37℃10分钟，PBS(pH7.2-7.4)洗涤2-3次。
c、跳过此步，直接进入下一步。
3. 滴加5% BSA封闭液,室温20分钟。甩去多余液体, 免洗。
4. 用稀释液将一抗按一定比例稀释(稀释后的一抗4℃可保存一周)，也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗，37℃ 孵育1小时左右或20℃ 2小时左右，也可4℃过夜。PBS(pH7.2-7.4)洗涤3次，每次2分钟(一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说，阳性染色强度不够时，可提高一抗浓度和延长孵育时间;背景过高时，可降低一抗浓度和缩短孵育时间)。
5. 根据使用量,用稀释液将Bio-羊抗小鼠/兔IgG浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul Bio-羊抗小鼠/兔IgG浓缩液,混匀即成工作液，此工作液4℃可保存一周)。滴加Bio-羊抗小鼠/兔IgG工作液，20-37℃孵育30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗涤3次，每次2分钟。
6. 根据使用量,用稀释液将SABC-FITC浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-FITC浓缩液，混匀即成SABC-FITC工作液，此工作液4℃可保存一周)。滴加SABC-FITC工作液，20-37℃孵育30分钟(避光)。PBS(pH7.2-7.4)洗涤4次，每次5分钟。
7. 滴加抗荧光衰减封片剂封片。荧光显微镜观察。

对于细胞爬片，固定后，PBS漂洗两次，再用0.5% Trxiton X-100室温孵育20分钟， PBS漂洗两次，接上述第3步。
对于冰冻切片，固定后，PBS漂洗两次，再接上述第2步。

注意事项：
如果背景过高，在SABC反应之后，用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次，PBS洗2次，然后封片观察。


乙酸*(pH5.2) 分子生物学试剂关键词：乙酸*,pH5.2,醋酸*

ARB10795 人抗心肌抗体(AMA)检测服务 Human anti-myocardial antibody,ama ELISA KIT
BTN131233 零背景T载体 Zero Background T Vector
ARB10106 人HCV-Ag elisa检测 
EGTA溶液(0.2mol/L,pH7.0)   100ml
BTN130910 Long-Taq DNA聚合酶 Long-Taq DNA Polymerase
BTN131144 山羊抗小鼠IgG(H+L),碱性磷酸酶标记 Goat Anti-Mouse IgG(H+L),AP Conjugate
ARB13378 牛流行热病毒抗体(EFV-Ab)Elisa定量检测 
CYB167065 兔抗狗IgG
ARB11733 人富亮*酸α2糖蛋白1(LRG1)酶标法分析 Human leucine-rich alpha-2 glycoprotein 1,lrg1 ELISA KIT
三*甲基*树脂 β-Amylase
F040103 牛血清白蛋白偶联三聚*胺 BSA-MEL
-EDTA脱*液   500ml

我公司正在打折促销分子生物学试剂全系列产品，恭候您的咨询选购乙酸*(pH5.2) 分子生物学试剂。