髓鞘蛋白脂质蛋白多肽PLP(139-151) 蛋白质研究

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名称：髓鞘蛋白脂质蛋白多肽PLP(139-151) 蛋白质研究
品Pai：百奥莱博
英文名：Myelin Proteolipid Protein (PLP) 139-151
规格：1mg
编号：SY0450
Proteolipid Protein (PLP)是一种高度疏水的膜蛋白，是神经系统(central nervous system, CNS)中含量最多的髓磷脂。与IAS MHCII结合时，PLP139–151和PLP178–191具有相同的高亲和力，但是，免疫系统对PLP139–151表位产生的免疫反应是主要的。对于PLP诱导的EAE模型，SJL (H-2s)小鼠具有很高的致敏性。一般选择9-10周左右的雌性SJL小鼠，皮下注射，每只小鼠100μg PLP139-151。

多发性硬化症(multiple sclerosis, MS)是一种原发于神经系统的炎症性脱髓鞘疾病。MS确切的发病机制虽尚不清楚， 但普遍认为是在易感基因的基础上，受环境因素触发，由CD4+ T细胞介导的神经系统(central nervous system, CNS)自身免疫性疾病。实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE)是一种以特异性致敏的CD4+ T细胞介导为主，对实验动物进行髓鞘蛋白免疫构建的疾病模型。复发-缓解型（Relapsing- Remitting）MS是人类多发性硬化（MS）最常见的一种，这类型的疾病与PLP139-151/CFA诱导的SJL小鼠EAE症状最为相似，因此，这是一种常用于研究药物对复发型EAE作用的模型。而且，该模型也表现出较高的EAE同步发病率。

英文别名：Proteolipid Protein (PLP) (139-151)
CAS：122018-58-0
多肽序列：H-His-Cys-Leu-Gly-Lys-Trp-Leu-Gly-His-Pro-Asp-Lys-Phe–OH
(HSLGKWLGHPDKF)
分子式：C72H104N20O17
分子量：1521.47
外观：白色粉末
纯度：≥ 95%（HPLC）
溶解性：溶于水（2 mg/ml）
储存条件：-20℃

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·TOP10化学感受态细胞
编号：SY0011
英文名称：TOP10 Chemically Competent Cell
规格：100μl×10管
本品是采用大肠杆菌TOP10菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。本品使用pUC19质粒检测，转化效率可达108 cfu/μg，广泛适用于GX的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。

TOP10感受态细胞基因型：F-mcrA △(mrr-hsd RMS-mcr BC) 80lacZ△M15 △lac X74 recA1 ara△139 △(ara-leu) 7697 galU galK rpsL (Strr) endA1 nupG

储存条件：-80℃
组份：
TOP10感受态细胞 100μl×10
pUC19(0.1 ng/μl) 5μl

注意事项
1）感受态细胞应保存在-80℃，不可反复冻融和放置时间过长，以免降低感受态细胞的转化效率。
2）整个转化操作，严格根据相应温度及无菌条件要求进行。
3）为确保ZG转化效率，整个操作过程应尽量轻柔，并保持低温。
4）为防止转化不成功，可以保留部分连接反应液，以重新转化，ZD化实验可能遇到的风险。

使用方法
1）取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。
【注】：一次转化感受态细胞的建议用量为50-100 μl，可以根据实际情况分装使用，应注意所用的DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。
2）向100 μl感受态细胞悬液中加入目的DNA，轻轻旋转离心管以混匀内容物，在冰浴中静置30min。
3）将离心管置于42℃水浴中放置60-90 s，然后快速将管转移到冰浴中，使细胞冷却2-3min，该过程不要摇动离心管。
4）向离心管中加入900μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床振荡培养45 min（150 rpm）， 目的是促使菌体复苏，抗性基因表达。
5）将离心管内容物混匀，吸取100μl已转化的感受态细胞加到含相应抗生素的SOB或LB固体琼脂培养基上，用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min，待液体被吸收后，倒置平板，37℃培养12-16 h。
【注】：涂布菌液多少可根据转化DNA量来调整。如果预计的克隆较少，可通过离心后吸除部分培养液，重新悬浮菌体后将其涂布在一个平板上。剩余菌液可置于4℃保存，一周之内可重新涂板。

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