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北京高保真快速PCR MasterMix(含红色示踪染料)哪里卖

产品信息
  • 特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

    北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖北京高保真快速PCR MasterMix(含红色示踪染料)哪里卖在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。


    名称:北京高保真快速PCR MasterMix(含红色示踪染料)哪里卖
    规格:1ml|5ml
    编号:ALH609
    英文名:Fast&HiFi PCR MasterMix
    品Pai:百奥莱博
    产地:国产|进口
    本品包含快速高保真DNA Polymerase、dNTPs和优化的反应缓冲液,浓度为2×。使用时只需加入模板、引物,并补足水至Mix终浓度为1×即可。所含聚合酶来自于基因工程改造的pfu,大大提高了扩增速度、保真性和产量。本产品是非长片段超保真快速扩增的产品。本制品含红色示踪染料,不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳;也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。

    产品特点:
    1. 扩增速度快:延伸速度可以达到2~4kb/min,是pfu的4~8倍。
    2. 扩增产量高:一般PCR产物量比传统pfu产量高50%-100%
    3. 优异保真性:保真度是taq的54倍以上。一般随机挑一个菌测序便是正确无突变落。
    4. 扩增长度指标和pfu一致,可以完全替代pfu进行快速高保真扩增,但不建议用于pfu无法扩增的长片段。以复杂基因组DNA为模板适合扩增不超过3kb左右的产物,以简单基因组、质粒和噬菌体DNA为模板适合扩增不超过6kb左右的产物。

    注意事项
    1.本系统扩增速度快,质粒和简单基因组等简单模版可采用15~20秒/kb,复杂模版如人类基因组可以采用30~45秒/kb。
    2.对于GC含量很高的模版,预变性和变性温度可以提高到98℃,本品聚合酶耐热性强,98℃对聚合酶活性无影响。
    3.如果扩增模板GC含量高或者模板复杂扩增效果不佳时,可在反应混合物中加入DMSO到终浓度1%~8%,按照1%梯度增加摸索ZJ浓度。或者加入甜菜碱至终浓度1~1.7 M。并采用降落PCR(Touchdown PCR)。

    储存条件:-20℃,有效期24个月。

    本品别名:高保真快速PCR MasterMix(含红色示踪染料)|2×PCR MasterMix

    更多有关北京高保真快速PCR MasterMix(含红色示踪染料)哪里卖的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:

    ·唾液DNA收集提取试剂盒
    编号:ALH178
    英文名称:Saliva DNA collection, preservation,transport and extraction Kit
    规格:10次|50次
    本试剂盒针对唾液样本中的DNA 进行收集、保存、运输、纯化。可提供无疼痛、非侵入性的方法,患者不用忍受抽血的疼痛和感染的风险就能获得高质量、高数量的样品,受测者排斥性低,婴儿和老人都能方便取得DNA样本。收集过程十分简单,受测者将唾液吐至保存液内混匀就完成收集过程。混匀后常温下可运输保存长达一年不会变质。能够节省运送、保存冷藏设备和电力费用。收集的唾液通过几个简单步骤便可提取DNA。抽取的DNA产量高达110μg/2mL唾液。

    试剂盒组份(50次):
    保存液———————————2ml×50
    细胞裂解液—————————50ml
    杂质沉淀液—————————85ml
    DNA溶解液——————————20ml
    5ml采集管——————————50个

    产品特点:
    1.非侵入性采检方式免除了抽血的疼痛和降低了污染风险,并增加了取检的便利性,可由受检者自行取样。
    2.仅需2ml的唾液样本,即可取得约110μg的DNA(不同个体产量差异很大)。
    3.采样后的检体可稳定地储存于室温环境一年以上。

    唾液样品收集步骤:
    1. 用清水漱口1~2 次,然后吐掉。
    2. 漱口后等候至少5 分钟方可采集唾液,期间不要进食、饮用各种饮料。
    3. 将唾液(不是喉咙中痰液)吐到5ml 采集管中,直至2ml 刻度位置。(不可将痰液吐到收集管中,若唾液不足,可做口舌运动,促进分泌。浮在唾液上层的少量泡沫不包括计算在2ml 唾液采集量内,采集过程必须在30 分钟内完成)
    4. 将等体积2ml 保存液全部倒在5ml 唾液采集管中,充分颠倒混匀后旋紧盖子。

    唾液DNA提取步骤(2ml唾液量举例,可按比例放大缩小每次提取的唾液量):
    1. 将保存液/唾液混合物放置于50℃ 水浴中至少1 小时或50℃ 空气孵箱至少2 小时。
    2. 转移4ml 混合物(2 ml 唾液加2 ml 保存液)到一个15 ml 或者50 ml 的离心管。
    3. 加入1ml 裂解液和10 μl RNase A 溶液(10mg/ml). 高速涡旋振荡10 秒后室温放置10分钟。
    4. 加入1. 7 ml 杂质沉淀液到上述裂解混合物中。
    5. 高速涡旋振荡25 秒,充分混匀杂质沉淀液和裂解混合物。
    6. 2500g离心5分钟。沉淀的杂质和蛋白会在管底形成一个致密的沉淀团。如果蛋白沉淀不太致密,可以冰上放置5分钟,然后重复步骤6。
    7. 仔细转移上清(含有DNA)到一个新的15 ml 或者50 ml 的离心管。注意不要触动管底沉淀。加入5ml 异丙醇。(唾液DNA 含量较低时,加入40μl Glycogen 20mg/ml可能提高一些产量)
    8. 轻柔颠倒混匀50 次。
    9. 2000g 离心3 分钟, 此时一般可在管底看到白色的DNA 沉淀。
    10. 倒弃上清, 倒置后在吸水纸上轻敲几下以尽可能吸干。加入5ml 70%乙醇,颠倒几次漂洗DNA 沉淀。
    11. 2000g 离心1 分钟, 仔细倒去上清(沉淀很松,注意不要把DNA 沉淀倒掉了)。
    12. 倒置后在吸水纸上轻敲几下以控干残留乙醇,还可以用枪头小心吸掉管底沉淀周围和管壁的残留乙醇,空气晾干沉淀几分钟(不要干过头,也不要残留乙醇)。
    13. 加入250μl -400μl DNA 溶解液重新水化溶解DNA 沉淀,轻弹管壁混匀。
    14. 可以放置在65℃温育30-60 分钟(不要超过一小时),然后在室温或者4℃放置过夜来重新水化DNA,中间不时的轻弹管壁帮助重新水化DNA。
    15. DNA 可以存放在2-8℃,如果要长时间存放,可以放置在-20℃ 或者-80℃。


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    ·组织细胞DNA/RNA分离提取试剂盒
    编号:ALH023
    英文名称:Tissue cell DNA/RNA Extraction Kit
    规格:50次
    本试剂盒设计用于快速从同一个动物细胞或者组织样品中同时提取分离基因组DNA和总RNA。独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA/DNA酶,然后裂解混合物DNA/RNA同时通过一个基因组DNA吸附柱,基因组DNA被吸附而RNA穿透滤过。DNA吸附柱上基因组DNA经过一系列漂洗-离心后洗脱得到纯净基因组DNA。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于RNA吸附柱上, 再通过一系列快速的漂洗-离心洗脱得到纯净的RNA。无*酚、*仿DNA/RNA快速提取技术基础上配合独特的分离技术同时得到的RNA/基因组DNA纯度高,互不干扰。得到的RNA不需要DNase消化,可直接用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。基因组DNA也可以直接用于下游的Southern、酶切、PCR等各种试验。

    试剂盒特点:
    1.完全不使用有毒的*酚,*仿等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
    2.快速,简捷,单个样品RNA/基因组DNA分离提取操作一般可在40分钟内完成。
    3.试剂盒的独特吸附柱和配方确保有效清除基因组DNA残留,一般情况下得到的RNA不需要DNase消化,可直接用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。
    4. 多次柱漂洗确保RNA/基因组DNA高纯度,可直接用于下游各种实验。

    试剂盒组份(50次):
    裂解液RLT Plus———————————50ml
    去蛋白液RW1—————————————40ml
    漂洗液RW——————————————10ml
    RNase-free H2O———————————10ml
    70%乙醇———————————————9ml RNase-free H2O(DY次使用前按说明加指定量乙醇)
    YZ物去除液IR———————————25ml
    漂洗液WB——————————————15ml
    洗脱缓冲液EB————————————10ml
    基因组DNA吸附柱和收集管———————50套
    RNA吸附柱和收集管——————————50套

    注意事项:
    1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
    2. 样品处理量JD不要超过基因组吸附柱和和RNA吸附柱处理能力,否则造成DNA残留或者产量降低。不同组织细胞种类RNA/DNA相差极大,例如胸腺DNA含量丰富,超过5mg就会超过柱子处理能力。COS细胞RNA含量丰富,超过3×10^6细胞就会超过柱子吸附能力。所以开始摸索实验条件时,如果不清楚样品DNA/RNA含量时宁可使用较少的样品处理量,如细胞不超过3~4×10^6,组织不超过10mg。将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
    3. 裂解液RLT Plus、YZ物去除液IR、去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
    4. 预防RNase污染,应注意以下几方面:
    1) 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌,可能导致RNase 污染。
    2) 使用无RNase 的塑料制品和枪头避免交叉污染。
    3) RNA在裂解液RLT Plus中时不会被RNase降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4小时,塑料器皿可在0.5M NaOH中浸泡10分钟,然后用水彻底清洗,再灭菌,即可去除RNase。
    4) 配制溶液应使用无RNase的水。(将水加入到干净的玻璃瓶中,加入DEPC至终浓度0.1%( v/v),37℃放置过夜,高压灭菌。)
    5. 关于DNA的微量残留:
    一般说来任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留(DNase 消化也无法做到100%无残留),本公司的组织/细胞RNA/DNA分提试剂盒,由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA分离清除技术,绝大多数DNA已经被清除,不需要DNase 消化,可直接用于反转录PCR 和荧光定量PCR。个别特殊情况如DNA含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA表达量分析荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:
    1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA中的连接区,这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。
    2) 选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。
    3) 将RNA提取物用RNase-free 的DNase I 处理以提GX果。本试剂盒还可以用于DNase I 处理后的RNA清洁(cleanup),请联*(代"系")我们索取具体操作说明书。
    4) 在步骤去蛋白液RW1 漂洗前,直接在吸附柱 上进行DNase I 处理。请联*(代"系")我们索取具体操作说明书。
    6. RNA纯度及浓度检测:
    完整性: RNA可用普通琼脂糖凝胶电泳(电泳条件:胶浓度1.2%;0.5×TBE 电泳缓冲液;150v,15分钟)检测完整性。由于细胞中70%-80%的RNA为rRNA,电泳后UV 下应能看到非常明显的rRNA条带。动物rRNA大小分别约为5 kb 和2kb,分别相当于28S和18SrRNA。动物RNA样品中ZDrRNA亮度应为次大rRNA亮度的1.5-2.0 倍,否则表示RNA样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。
    纯度:OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的参考指标。高质量的RNA,OD260/OD280 读数(10mMTris, pH7.5)在1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的pH 值影响。同一个RNA样品,假定在10mM Tris,pH7.5 溶液中测出的OD260/OD280 读数1.8-2.1 之间,在水溶液中所测读数则可能在1.5-1.9之间,但这并不表示RNA不纯。
    浓度:取一定量的RNA提取物,用RNase-free水稀释n倍,用RNase-free水将分光光度计调零,取稀释液进行OD260, OD280 测定,按照以下公式进行RNA浓度的计算:终浓度(ng/μl)= (OD260)×(稀释倍数n)×40。

    储存条件:室温,有效期12个月。


    北京高保真快速PCR MasterMix(含红色示踪染料)哪里卖关键词:2×PCR MasterMix,高保真快速PCR MasterMix,高保真快速PCR MasterMix(含红色示踪染料)

    ARB13584 兔子孕激素/孕酮(PROG)定量分析 Rabbit progesterone,prog ELISA KIT
    HC0039 酶标板(可拆)25块/包
    双缩脲蛋白定量试剂盒   500T|1000T
    维生素B5 Anthraquinone 137-08-6
    间*基*甲*(代"酸") Trifluralin 99-05-8
    ARB11750 人嗜酸性白血球相关之RNA水解酵素家族成员3(EAR3)Elisa定量检测 Human eosinophIL-associated ribonuclease a family member 3,ear3 ELISA KIT
    B0501 马血清(辐照灭菌) 100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
    BL0611 琼脂糖凝胶CL-4B Sepharose CL-4B
    拉米呋啶 Ampicillin sodiu*(代"m") salt 134678-17-4
    ARB11675 人绿脓杆菌外毒素A(PEA)elisa检测操作说明书 Human pseudomonas exotoxin a,pea ELISA KIT
    复达欣 PABA sodiu*(代"m") salt 72558-82-8
    F040308 小鼠IgG2a抗原 Mouse IgG2a
    92-32-0 吡啰红G派洛宁G(Y) PyroninG(Y)
    ARB12518 大鼠热休克蛋白40(HSP-40)ELISA代测服务 Rat heat shock protein 40,hsp-40 ELISA KIT
    CYB168013 豚鼠血清 10ml/瓶
    (不需DNA酶消化)"
    羟胺溶液(1.5mol/L,pH8.0)   100ml
    PY04-085  50%卵黄乳液  5ml/支×10支  4支添加于250ml胰月示—亚硫*(代"酸")盐—环丝*酸琼脂培养基基础中,用于产气荚膜梭菌的计数
    KT201 Taq PCR Mastermix
    ARB13800 豚鼠免疫球蛋白G2(IgG2)Elisa定量检测 Guinea pig immunoglobulin g2,igg2 ELISA KIT
    BL1201 番红染色液(沙黄)

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    温馨提示:不可用于临床ZL。
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