联系电话:15527510518 18163548455 13296670271 13296673586QQ:1546342329 3176445674 试剂盒检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被样本抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成ZZ的黄色。颜色的深浅和样品中的样本呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
1.酶标仪(450nm)
2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
操作注意事项
1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,ZZ结果乘以5才是样本实际浓度。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成 名称 | 96孔配置 | 48孔配置 | 备注 |
微孔酶标板 | 12孔×8条 | 12孔×4条 | 无 |
标准品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 无 |
样本稀释液 | 6mL | 3mL | 无 |
检测抗体-HRP | 10mL | 5mL | 无 |
20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL | 按说明书进行稀释 |
底物A | 6mL | 3mL | 无 |
底物B | 6mL | 3mL | 无 |
终止液 | 6mL | 3mL | 无 |
封板膜 | 2张 | 2张 | 无 |
说明书 | 1份 | 1份 | 无 |
自封袋 | 1个 | 1个 | 无 |
注:标准品浓度都不相同,麻烦联系客服索取相应说明书
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
操作步骤
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
结果判断
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。

试剂盒性能
1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2. 灵敏度:ZD检测浓度小于(参考说明书)
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6个月
武汉纯度生物科技有限公司,主要销售常用抗原抗体、试剂、Elisa试剂盒、生化试剂盒、免疫检测试剂盒、金标试剂盒、金标检测卡、动物血清、血浆、全血、抗血清、毒素类标准品、生物试剂、培养基、实验室仪器耗材、化学试剂、生物制品、标准品、对照品、生化免疫制品、免疫亲和柱、菌株、质粒、室内质控品、细胞、培养基、PEG、病理染色液、免疫学试剂、蛋白组学试剂、细胞生物学试剂、分子生物学试剂、YZ剂、细胞因子等。武汉纯度生物时刻谨记产品质量,正如公司名一样,达到“专业规格,纯度保证”的质量生命线。公司秉承“客户为天,质量为根,诚信为本,创新为魂”的信念,将以优质的产品,完善的服务,为每一位客户的实验保驾护航。
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Recombinant Mouse Epidermal Growth Factor, His 重组小鼠表皮生长因子
Rat Epidermal Growth Factor 大鼠表皮生长因子
Recombinant Rat Epidermal Growth Factor 重组大鼠表皮生长因子
Recombinant Human Endothelial-Monocyte Activating Polypeptide II 重组人血管内皮单核细胞活化多肽Ⅱ
Recombinant Human Aminoacyl tRNA Synthetase Complex-Interacting Multifunctional Protein 1 重组人氨酰tRNA合成酶复合多功能相互作用蛋白1
Recombinant Human Endoglin, Sf9 重组人内皮抑素、昆虫
Recombinant Human Endoglin 重组人生长
Recombinant Mouse Endoglin 重组小鼠endoglin
Recombinant Human Epigen 纯化重组人
Recombinant Human Epiregulin 重组人表皮调节素
Recombinant Human Erythropoietin-alpha 重组人促红细胞生成素
Recombinant Human Erythropoietin-alpha Fc/Chimera 重组人促红细胞生成素αFC /嵌合
Recombinant Human Erythropoietin-alpha, HEK 重组人促红细胞生成素α,HE
Recombinant Human sFas Receptor 重组人可溶性受体
Recombinant Human FAS Ligand 人重组Fas配体
Recombinant Human FAS Ligand, HEK 人重组Fas配体,HEK
Recombinant Human Fibroblast Growth Factor-acidic 重组人成纤维细胞生长因子酸性
Recombinant Human Fibroblast Growth Factor-acidic, Sf9 重组人酸性成纤维细胞生长因子、昆虫
Recombinant Mouse Fibroblast Growth Factor-acidic 重组小鼠成纤维细胞生长因子-酸性
Recombinant Mouse Fibroblast Growth Factor-acidic, His Tag 重组小鼠成纤维细胞生长因子酸性,其标记
Recombinant Rat Fibroblast Growth Factor-acidic 重组大鼠成纤维细胞生长因子的酸性
Bovine Fibroblast Growth Factor-acidic 牛成纤维细胞生长因子-酸性
Recombinant Human Fibroblast Growth Factor-basic 重组人碱性成纤维细胞生长因子
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Recombinant Human Fibroblast Growth Factor-basic (147 a.a) 重组人碱性成纤维细胞生长因子(147 in)
Recombinant Human Fibroblast Growth Factor-basic, 293 Cells 重组人成纤维细胞生长因子碱性,293细胞
Recombinant Human Fibroblast Growth Factor-basic, Plant 重组人成纤维细胞生长因子碱性,植物
Recombinant Bovine Fibroblast Growth Factor-basic 重组牛碱性成纤维细胞生长因子
Bovine Fibroblast Growth Factor-basic 牛成纤维细胞生长因子
Recombinant Mouse Fibroblast Growth Factor-basic 重组小鼠成纤维细胞生长因子
Recombinant Rat Fibroblast Growth Factor-basic 重组大鼠成纤维细胞生长因子
Recombinant Human Fibroblast Growth Factor-4 重组人成纤维细胞生长因子-4
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Recombinant Human Fibroblast Growth Factor-8 重组人碱性成纤维细胞生长因子-8
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Recombinant Human Fibroblast Growth Factor-9 重组人碱性成纤维细胞生长因子
Recombinant Mouse Fibroblast Growth Factor-9 重组小鼠成纤维细胞生长因子
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Recombinant Human Fibroblast Growth Factor 12 重组人成纤维细胞生长因子12
Recombinant Human Fibroblast Growth Factor 13 重组人成纤维细胞生长因子13
Recombinant Human Fibroblast Growth Factor 14 重组人成纤维细胞生长因子14
Recombinant Mouse Fibroblast Growth Factor-15 重组小鼠成纤维细胞生长因子-15
Recombinant Human Fibroblast Growth Factor 17 重组人成纤维细胞生长因子17
Recombinant Human Fibroblast Growth Factor-18 重组人碱性成纤维细胞生长因子-18
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Recombinant Rat Fibroblast Growth Factor-18 重组大鼠成纤维细胞生长因子-18
Recombinant Human Fibroblast Growth Factor-19 重组人碱性成纤维细胞生长因子-19
Recombinant Human Fibroblast Growth Factor-19 His Tag 重组人碱性成纤维细胞生长因子-19他的标签
Recombinant Human Fibroblast Growth Factor-21 重组人成纤维细胞生长因子
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Recombinant Mouse Fibroblast Growth Factor-21 重组小鼠成纤维细胞生长因子
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Recombinant Rat Fibroblast Growth Factor-21 重组大鼠成纤维细胞生长因子
Recombinant Bovine Fibroblast Growth Factor-21 重组牛碱性成纤维细胞生长因子
Recombinant Human Fibroblast Growth Factor-22 重组人碱性成纤维细胞生长factor-22
Recombinant Human Fibroblast Growth Factor-23 重组人成纤维细胞生长因子
Recombinant Human Fibroblast Growth Factor-23 His Tag 重组人成纤维细胞生长因子他的标签
Recombinant Human Fibroblast Growth Factor-23 C-Terminal 重组人成纤维细胞生长因子C端
Recombinant Human FGF-1 Intracellular-Binding Protein 重组人FGF-1胞内结合蛋白
Recombinant Human Flt3-Ligand 重组人Flt3配体
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Recombinant Human Flt3-Ligand, Sf9 重组人Flt3配体,昆虫
Recombinant Mouse Flt3-Ligand 重组小鼠Flt3配体
Recombinant Rhesus Macaque Flt3-Ligand 重组猕猴Flt3配体
Recombinant Human Follistatin 重组人卵泡抑素
Recombinant Human Follistatin His Tag 重组人卵泡抑素他的标签
Recombinant Mouse Follistatin 重组小鼠卵泡抑素
Recombinant Human Proheparin-Binding EGF-like Growth Factor 重组人肝宁结合表皮生长因子样生长因子
Recombinant Mouse Proheparin-Binding EGF-like Growth Factor 重组小鼠水解肝素结合表皮生长因子样生长因子
Recombinant Rat Proheparin-Binding EGF-like Growth Factor 重组大鼠肝宁结合表皮生长因子样生长因子
Recombinant Human Proheparin-Binding EGF-like Growth Factor, His Tag 重组人肝宁结合表皮生长因子样生长因子,他的标签
Recombinant Human Galectin-1 重组人蛋白
Recombinant Mouse Galectin-1 重组小鼠半乳糖凝集素
Recombinant Human Galectin-2 重组人galectin-2
Recombinant Mouse Galectin-2 重组小鼠galectin-2
Recombinant Human Galectin-3 重组人蛋白
Recombinant Human Galectin-3 His Tag 重组人蛋白His标签
Recombinant Mouse Galectin-3 重组小鼠中
Recombinant Human Galectin-4 重组人凝集素
Recombinant Mouse Galectin-4 重组小鼠凝集素
Recombinant Human Galectin-7 人重组Galectin-7
Recombinant Human Galectin-7 His Tag 人重组Galectin-7他的标签
Recombinant Mouse Galectin-7 重组小鼠半乳
Recombinant Human Galectin-8 重组人galectin-8
Recombinant Human Galectin-8, His Tag 重组人galectin-8,他的标签
Recombinant Mouse Galectin-8 重组小鼠Galectin-8
Recombinant Human Galectin-9 重组人半乳
Recombinant Mouse Galectin-9 重组小鼠半乳
Recombinant Human Galectin-13 人重组为半乳糖凝集素-13
Recombinant Human Galectin-14 重组人galectin-14
Recombinant Human Galectin-Related Protein 重组人半乳凝素相关蛋白
Recombinant Human Glial-Derived Neurotrophic Factor 重组人胶质源性神经营养因子
Recombinant Human Growth and Differentiation factor 3 重组人生长和分化因子3
Recombinant Human Growth and Differentiation factor 5 重组人生长和分化因子5
Recombinant Human Growth and Differentiation factor 5 His Tag 重组人生长分化因子5
Recombinant Human Growth and Differentiation factor 10 重组人生长和分化因子10
Recombinant Human Growth and Differentiation factor 15, His Tag 重组人生长分化因子15,其标记
Recombinant Human Growth and Differentiation factor 15 D-Vairant 重组人生长分化因子15 d-vairant
Recombinant Human Growth and Differentiation factor 15 重组人生长和分化因子15
Recombinant Human Granulocyte-Colony Stimulating Factor 重组人粒细胞集落刺激因子
Recombinant Human Granulocyte-Colony Stimulating Factor, His Tag 重组人粒细胞集落刺激因子,其标记
Recombinant Human Granulocyte-Colony Stimulating Factor, CHO 重组人粒细胞集落刺激因子
Recombinant Human Pegylated Granulocyte-Colony Stimulating Factor 聚乙二醇化重组人粒细胞集落刺激因子