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SDS-PAGE Gel Preparation Kit SDS-PAGE凝胶配制试剂盒

产品信息
  • 产品信息
    产品名称 产品编号 规格 储存 价格（元）
    SDS-PAGE Gel Preparation Kit SDS-PAGE凝胶配制试剂盒 20328ES50 1 kit (30~50 gels) 4℃~25℃ 177.00
    SDS-PAGE Gel Preparation Kit SDS-PAGE凝胶配制试剂盒 20328ES72 1 kit (150~250 gels) 4℃~25℃ 719.00
    产品描述
    蛋白电泳经常使用聚丙烯酰胺凝胶来实现蛋白分离，此类凝胶一般由浓缩胶和分离胶两部分组成，前者起到将蛋白样品进行浓缩的作用，后者则是根据凝胶所使用的丙烯酰胺单体和N,N-亚甲基双丙烯酰胺（甲叉丙烯酰胺）交联剂的浓度不同从而分离不同大小范围的蛋白质。
    本试剂盒提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂，用户只需自备制胶设备和蒸馏水即可配胶，大大简化了制胶过程，本试剂盒可配制30-50块常规大小的凝胶。
    产品组分
    编号 组分名称 产品编号/规格 保存方式
    20328ES50（30~50 gels） 20328ES72(150~250 gels)
    20328-A 30%丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺，29:1 100ml 500 ml 4℃避光
    20328-B 4×Tris-HCl-SDS分离胶缓冲液，pH8.8 70ml 350ml 4℃
    20328-C 4×Tris-HCl-SDS浓缩胶缓冲液，pH6.8 30ml 90ml 4℃
    20328-D APS 过硫酸铵 0.5g 2.5g 4℃~25℃
    20328-E TEMED 四甲基二乙胺 0.5ml 2.5ml 4℃~25℃避光
    运输与保存方法
    室温运输。4℃~25℃保存，有效期至少6个月。
    注意事项
    1）   丙烯酰胺溶液和TEMED有毒，请适当防护。
    2）   APS溶液不稳定，当配制成10%溶液后，分装成-20℃冻存。尽量减少室温存放时间，以防失效。若是发现凝胶聚合时间明显延长，需要更换使用其它-20℃冻存或者新鲜配置的10%APS。
    3）   TEMED易挥发，使用后请盖紧瓶盖。
    4）   凝胶凝聚的速度与温度、光照、以及TEMED、APS的用量关系密切。在其他组分用量不变的前提下，可通过适当调节TEMED以及APS的用量，控制现有室温条件下凝胶凝聚的速度。可参考附件的量进行相应的调整。
    5）   温度较低时，4×Tris-HCl-SDS分离胶缓冲液和4×Tris-HCl-SDS浓缩胶缓冲液中的SDS可能析出。此时需水浴温育，并在完全溶解和混匀后使用。
    6）   凝胶配制过程，特别是液体混匀步骤，需尽量避免气泡的产生。
    7）   在分离胶上层进行水压时需小心操作，加水速度不宜过快。
    8）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
    使用方法
    1.        根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度【参考附表1】；

    2.        按照附表2配制相应浓度的SDS-PAGE分离胶，制胶程序如下：
    2.1      将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、4×分离胶缓冲液和蒸馏水在试管或者小烧杯内混合；
    2.2      加入10%APS和TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免气泡产生；
    2.3      在装好的制胶模具中灌入适量分离胶溶液，对于mini胶，分离胶液加至约距前玻璃板顶端1.5cm或距梳齿约0.5cm即可。然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-5cm的水层，从而压平凝胶表面；
    2.4      静置30-60min，待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面，表面凝胶已聚合；
    3.        按照附表3配制SDS-PAGE浓缩胶，制胶程序如下：
    3.1      去除覆盖在分离胶上的水层。
    3.2      将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、4×浓缩胶缓冲液和蒸馏水在试管或者小烧杯内混合；
    3.3      加入10%APS和TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。
    3.4      将浓缩胶溶液加至分离胶的上面，直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
    3.5      将梳子插入凝胶内，避免产生气泡。
    3.6      静置10-20min，等待浓缩胶聚合。
    3.7      待凝胶聚合后，小心地拔出梳子，以免破坏加样孔。
    3.8      可用电泳缓冲液吹走孔内残留的一些胶液【可选】，然后进行上样和后续的常规电泳操作。
     
    附表1. 不同浓度SDS-PAGE分离胶的ZJ分离范围
    SDS-PAGE分离胶浓度 ZJ分离范围
    6%凝胶 50-150kD
    8%凝胶 30-90kD
    10%凝胶 20-80kD
    12%凝胶 12-60kD
    15%凝胶 10-40kD


    附表2. 不同浓度SDS-PAGE分离胶配制体系
    分离胶浓度 凝胶体积(ml) 所需各组分体积（单位：ml）
    蒸馏水 30%Acr-Bis（29:1） 4×Tris-HCl-SDS分离胶缓冲液，pH 8.8 10%APS TEMED
    6% 5 2.7 1.0 1.25 0.05 0.004
    10 5.4 2.0 2.5 0.1 0.008
    15 8.1 3.0 3.75 0.15 0.012
    20 10.8 4.0 5.0 0.2 0.016
    30 16.2 6.0 7.5 0.3 0.024
    50 27.0 10.0 12.5 0.5 0.040
    8% 5 2.37 1.33 1.25 0.05 0.003
    10 4.7 2.7 2.5 0.1 0.006
    15 7.1 4.0 3.75 0.15 0.009
    20 9.5 5.3 5.0 0.2 0.012
    30 14.2 8.0 7.5 0.3 0.018
    50 23.7 13.3 12.5 0.5 0.030
    10% 5 2.03 1.67 1.25 0.05 0.002
    10 4.07 3.33 2.5 0.1 0.004
    15 6.1 5.0 3.75 0.15 0.006
    20 8.1 6.7 5.0 0.2 0.008
    30 12.2 10.0 7.5 0.3 0.012
    50 20.3 16.7 12.5 0.5 0.020
    12% 5 1.7 2.0 1.25 0.05 0.002
    10 3.4 4.0 2.5 0.1 0.004
    15 5.1 6.0 3.75 0.15 0.006
    20 6.8 8.0 5.0 0.2 0.008
    30 10.2 12.0 7.5 0.3 0.012
    50 17.0 20.0 12.5 0.5 0.020
    15% 5 1.2 2.5 1.25 0.05 0.002
    10 2.4 5.0 2.5 0.1 0.004
    15 3.6 7.5 3.75 0.15 0.006
    20 4.8 10.0 5.0 0.2 0.008
    30 7.2 15.0 7.5 0.3 0.012
    50 12.0 25.0 12.5 0.5 0.020
    附表3. 5%SDS-PAGE浓缩胶配制体系
    凝胶体积（ml） 所需各组分体积（单位：ml）
    蒸馏水 30%Acr-Bis（29:1） 4×Tris-HCl-SDS浓缩胶缓冲液，pH 6.8 10%APS TEMED
    2 1.14 0.34 0.5 0.02 0.002
    4 2.28 0.68 1.0 0.04 0.004
    6 3.42 1.02 1.5 0.06 0.006
    8 4.56 1.36 2.0 0.08 0.008
    温馨提示：不可用于临床ZL。
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