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裂谷热病毒荧光PCR检测试剂盒现货价格

产品信息
  • 特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

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    名称:裂谷热病毒荧光PCR检测试剂盒现货价格
    品Pai:百奥莱博
    等级:科研试剂
    编号:SYA233

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    PY02-141  TTC营养琼脂  250克  
    ARB12512 大鼠载脂蛋白B100(Apo-B100)酶标法分析 Rat apoprotein b100,apo-b100 ELISA KIT
    3326-32-7 异硫*酸荧光素 FITC
    2′-*脱氧尿苷 Poly C 784-71-4
    Acr-Bis(30%:0.8%)   500ml
    BTN60905 MMLV逆转录酶 MMLV Reverse Transcriptase
    ARB13649 兔子催乳素(PRL)含量测试 Rabbit prolactin,prl ELISA KIT
    37348-90-4 两性电解质4-6
    548-62-9 Crystal violet 结晶紫
    PY01-003  酪蛋白胨  250克  
    6014-58-1 亮蓝 Brilltant Blue
    ARB11670 人维生素D3(VD3)尿液中含量检测 Human vitamin d3,vd3 ELISA KIT
    BFD073 H9亚型禽流感抗原快速检测卡
    巴比*(代"妥")*缓冲液(pH7.4)   100ml
    嵌段式聚醚F-68 1-Nitroso-2-naphthol 9003-11-6
    001012 狗血清
    BOC-L-天门冬*酸β-苄酯 Phenol red sodiu*(代"m") salt 7536-58-5
    ARB13722 兔载脂蛋白A1(Apo-A1)elisa检测 Rabbit apoprotein a1,apo-a1 ELISA KIT
    植物基因组DNA提取试剂盒(柱式吸附) 
    固红TR Gibberellin A3 51503-28-7
    BL0863 羊抗人IgA免疫血清 0.5ml
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    ·嗜肺军团菌单重荧光PCR检测试剂盒
    编号:SYA045
    等级:科研实验专用
    规格:48次/盒

    ·乙脑病毒单重荧光PCR检测试剂盒
    编号:SYA221
    等级:科研实验专用
    规格:48次/盒

    ·洋葱伯克霍尔德菌单重荧光PCR检测试剂盒
    编号:SYA049
    等级:科研实验专用
    规格:48次/盒

    ·猪附红细胞体病ELISA检测试剂盒
    编号:SYA642
    等级:科研实验专用
    规格:96次/盒

    ·玉米转基因MON810单重凝胶PCR检测试剂盒
    编号:SYA281
    等级:科研实验专用
    规格:48次/盒

    ·炭疽杆菌(BA)单重荧光PCR检测试剂盒
    编号:SYA499
    等级:科研实验专用
    规格:48次/盒
    一、简介
    本试剂盒用一对炭疽杆菌特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对炭疽杆菌核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

    二、用途
    该试剂盒适用于检测发病部位新鲜脓液、渗出物,吸入性炭疽的咯痰、呕吐物、肠炭疽的粪便及脑脊液、外周血等样本中炭疽杆菌(BA)DNA,用于炭疽病等疾病的辅助诊断,其检测结果仅供临床参考。

    三、试剂盒组成(50T/Kit)
    组份 数量 规格
    BA反应液(BA-qPCR MIX) 1管 1mL/管
    核酸提取液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
    酶混合液(Enzymes MIX) 1管 50μL/管
    阴性对照(NTC) 1管 250μL/管
    BA阳性对照(BA-PTC) 1管 50μL/管

    四、荧光PCR仪器适用范围
    ABI系列、MJ系列、Roche系列,博日系列及其他荧光定量PCR检测仪。

    五、储存条件及有效期:
    本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为12个月。

    六、样品采集、前处理与DNA提取
    6.1 样品采集
    6.1.1 适用标本类型:新鲜脓液、渗出物、吸入性炭疽的咯痰、呕吐物、肠炭疽的粪便及脑脊液、牛外周血。
    6.1.2 标本采集
    6.1.2.1 组织:取发病组织约1g,置入1.5mL洁净EP管,立即送检;
    6.1.2.2 血液:无菌注射器抽取外周血1-2mL注入EDTA2Na(或柠檬酸*)抗凝管;
    6.1.2.3 体液等液体标本:取0.5-1mL左右,置入1.5mL洁净EP管,立即送检;
    6.2 样本前处理:
    6.2.1 组织:取50mg左右组织用玻璃匀浆器匀浆,匀浆后置于洁净的1.5mL离心管中;
    6.2.2 血液样本:直接取200uL抗凝血,转至一洁净的1.5mL离心管中,加入1mL双蒸水,剧烈震荡30s,8000rpm离心5min,弃上清(若沉淀颜色呈红色,请再重复洗涤一次);
    6.2.3 粪便等固体标本:挑取米粒大小粪便,放置于0.5mL生理盐水的离心管中,震荡混匀,13000rpm离心2min,弃上清;
    6.2.4 液体标本:取适量标本13000rpm离心2min,弃上清。
    6.3 DNA提取
    6.3.1 对上述处理好的样本加入40uL核酸提取液,100℃恒温处理10min,13000rpm离心5min,取上清液转移至新的1.5mL EP管,-20℃保存;
    6.3.2 DNA的提取也可以采用商业化DNA提取试剂盒。
     注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取4µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议ZH在样品制备区域加入阳性对照。

    七、检测步骤:
    7.1 试剂的准备
    从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BA-qPCR MIX)、酶混合液(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
    设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
    试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
    荧光PCR反应液 20µL N×20µL
    酶混合液 1µL N×1µL
    总量 21µL N×21µL
    计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入21μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(BA-PTC)4μL,10000rpm瞬时离心10秒。
    7.2 qPCR反应条件
    将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
    推荐循环条件:
    预变性 1循环 94℃ for 2 min
    PCR扩增 40循环 94℃ for 15 sec
    55℃ for 30 sec
    在55℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。

    八、结果分析
    8.1 结果分析条件设定
    直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的ZG点为准。
    8.2 试验成立判定
    (1) 阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
    (2) 阳性对照(BA-PTC):均产生扩增曲线。
    (3) 以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
    8.3 结果判定
    (1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明炭疽杆菌核酸阳性。
    (2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明炭疽杆菌核酸阴性。
    (3) 如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
    (4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行炭疽杆菌qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明炭疽杆菌核酸阳性;否则判为样本阴性。

    九、注意事项:
    (1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
    (2) 所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
    (3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
    (4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
    (5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。



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    ·猪细小病毒抗体ELISA检测试剂盒
    编号:SYA637
    等级:科研实验专用
    规格:192次/盒

    ·轮状病毒(ROV)单重荧光PCR检测试剂盒
    编号:SYA465
    等级:科研实验专用
    规格:48次/盒

    ·冠状病毒(HKU)单重荧光PCR检测试剂盒
    编号:SYA180
    等级:科研实验专用
    规格:48次/盒

    ·猪囊尾蚴病(CYT)ELISA检测试剂盒
    编号:SYA643
    等级:科研实验专用
    规格:96次/盒

    ·禽白血病(ALV)单重凝胶PCR检测试剂盒
    编号:SYA537
    等级:科研实验专用
    规格:48次/盒

    ·委内瑞拉马炎病毒单重荧光PCR检测试剂盒
    编号:SYA236
    等级:科研实验专用
    规格:48次/盒

    ·冠状(Hcov)/副流感(PIV)/腺(ADV)病毒三重荧光PCR检测试剂盒
    编号:SYA194
    等级:科研实验专用
    规格:48次/盒

    ·EB病毒单重荧光PCR检测试剂盒
    编号:SYA144
    等级:科研实验专用
    规格:48次/盒

    ·猪细小病病毒(PPV)单重荧光PCR检测试剂盒
    编号:SYA423
    等级:科研实验专用
    规格:48次/盒|96次/盒

    ·勃氏考克氏体单重荧光PCR检测试剂盒
    编号:SYA134
    等级:科研实验专用
    规格:48次/盒

    ·立氏立克次体/莫氏立克次体双重荧光PCR检测试剂盒
    编号:SYA139
    等级:科研实验专用
    规格:48次/盒

    ·口蹄疫(FMDV)通用型单重荧光PCR检测试剂盒
    编号:SYA500
    等级:科研实验专用
    规格:48次/盒

    ·霍乱弧菌O139/O1双重荧光PCR检测试剂盒
    编号:SYA103
    等级:科研实验专用
    规格:48次/盒

    ·三日疟原虫单重荧光PCR检测试剂盒
    编号:SYA125
    等级:科研实验专用
    规格:48次/盒
    一、简介:
    本试剂盒用一对三日疟原虫特异性引物,结合一条特异性荧光探针,用荧光PCR 探针技术进行三日疟原虫的检测。

    二、用途:
    本试剂盒可用于三日疟原虫检测鉴定及突发公共卫生事件的处置,还可用于三日疟原虫的环境监测、卫生检疫及感染的辅助诊断,其检测结果仅供临床参考。

    三、试剂盒组成:(48T/ Kit)
    组份 数量 规格
    三日疟原虫荧光PCR 反应液(qPCR MIX) 1管 672μL/管
    DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
    酶混合物(DNA Polymerase MIX) 1管 48μL/管
    阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
    三日疟原虫阳性对照(PTC) 1管 50μL/管

    四、荧光PCR 仪器适用范围
    ABI系列,Bio-Rad系列,Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。

    五、储存条件及有效期:
    本试剂盒于-20℃保存,避免反复冻融,有效期为6个月。

    六、实验操作步骤
    6.1 标本采集
    血液:用一次性无菌5ml注射器抽取疑似人或动物血3-5ml,置于枸橼酸*或EDTA2Na抗凝管中,摇匀送检。
    肺脏等组织:取上述组织1g左右,置于1.5ml洁净EP管中送检。
    乳液、体液等标本:取相应标本3-5ml,转至1.5ml洁净EP管中送检。
    6.2 DNA提取
    可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液,按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的(DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
    血液样本:直接取200μl 抗凝血,转至一洁净的1.5ml 离心管中,加入1ml 双蒸水,剧烈震荡30s,8000rpm 离心5min,弃上清,至无明显红色沉淀。(若沉淀明显,请再重复上述步骤一次)。加入1ml生理盐水,剧烈震荡15s,13000rpm 离心5min,弃上清。沉淀加入50μl 核酸提取液(使用前请室温溶解并充分混匀)并与沉淀混匀,100℃恒温10min,13000rpm 离心3min,取上清4μl 进行PCR 反应。
    肺、淋巴结等固体组织:剪取约0.1g 组织,用生理盐水洗去血污,剪碎加入0.5mL TE 转移到匀浆器中匀浆。将匀浆液50μl 转移到1.5mL 离心管中,加入50μl 核酸提取液(使用前请室温溶解并充分混匀)并与沉淀混匀,100℃恒温10min,13000rpm 离心3min,取上清4μl 进行PCR 反应。
    乳液等液体标本:取标本2-3mL,13000rpm 离心3min,弃上清,沉淀加入50μl 核酸提取液(使用前请室温溶解并充分混匀)并与沉淀混匀,100℃恒温10min,13000rpm 离心3min,取上清4μl进行PCR反应。
     注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5μL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议ZH在样品制备区域加入阳性对照。

    七、检测步骤:
    7.1 PCR 扩增
    从试剂盒中取出荧光PCR反应液(三日疟原虫-qPCR MIX)、酶混合物(DNA Polymerase MIX),室温融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
    设所需要的PCR 反应管管数为N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
    试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
    荧光PCR反应液 14µL N×14µL
    酶混合液 1µL N×1µL
    总量 15µL N×15µL
    计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR 反应管中分别加入15μL,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
    7.2 qPCR反应条件
    将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
    推荐循环条件:
    1循环 50℃ for 2 min
    预变性 1循环 95℃ for 10 min
    PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
    60℃ for 60 sec
    在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。

    八、结果分析:
    8.1 结果分析条件设定
    直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的ZG点为准。
    8.2 试验成立判定
    阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
    阳性对照(PTC):均产生扩增曲线。
    以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
    8.3 结果判定
    在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明三日疟原虫核酸阳性。
    Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明三日疟原虫核酸阴性。
    如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
    对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行三日疟原虫real time PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明三日疟原虫核酸阳性;否则判为样本阴性。

    九、注意事项:
    (1)初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
    (2)所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
    (3)PCR 操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR 扩增区等),防止实验室污染。
    (4)样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
    (5)试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。




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