北京细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒厂家价格
- 品牌:百奥莱博
- 型号:-20℃
- 产地:北京
- 供应商:北京百奥莱博科技有限公司
- 供应商报价:¥150 - 1970
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北京细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒厂家价格由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于生化科学研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒等细胞组织染色产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:北京细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒厂家价格
规格:>100次
英文名:Senescence β-Galactosidase Staining Kit
产地:国产|进口
编号:YT169
本试剂盒是一种基于衰老时SA-β-Gal(senescence-associated β-galactosidase)活性水平上调而对衰老细胞或组织进行染色检测的试剂盒。在普通的光学显微镜下就可以观测到细胞或组织的衰老情况。本试剂盒可以用于培养细胞的衰老检测,也可以用于组织切片的衰老检测。
试剂盒组份:
β-半乳糖苷酶染色固定液—————100ml
X-Gal溶液————————————5ml
β-半乳糖苷酶染色液A——————1ml
β-半乳糖苷酶染色液B——————1ml
β-半乳糖苷酶染色液C——————100ml
绝大多数正常细胞被认为仅有有限的分裂能力,在不能分裂后就进入衰老(senescence)状态。此时细胞仍然是存活的,但细胞的基因和蛋白的表达谱发生了很大改变。衰老(senescence)的细胞不能在一些常规的刺激下再诱导细胞分裂,并且衰老细胞的细胞周期分布也比较特殊,不同于一些损伤诱导的细胞休眠,也不同于细胞生长接触YZ的情况。衰老细胞细胞通常体积变大,表达pH 6.0时有高酶活性的β-半乳糖苷酶。细胞衰老也被认为是生物体YZ肿瘤的一种方式,同时也是生物体老化(aging)的一种潜在原因。
本细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒,以X-Gal为底物,在衰老特异性的β-半乳糖苷酶催化下会生成深蓝色产物。从而在光学显微镜下很容易观察到变成蓝色的表达β-半乳糖苷酶的细胞或组织。
图1. 正常细胞和衰老细胞用细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒染色后的示例图片。
本试剂盒仅染色衰老细胞,不会染色衰老前的细胞(presenescent cells)、静止期细胞(quiescent cells)、永生细胞(immortal cells)或肿瘤细胞。
如果使用6孔板检测,足够测定100个样品;使用24孔板测定,足够测定400个样品;使用96孔板测定,足够测定1000个样品。对于组织切片或组织块,可以检测的样品数量视样品的大小而定。对于普通的切片也至少足够检测100个样品。
注意事项:
1. β-半乳糖苷酶染色固定液有一定的腐蚀性和毒性,操作时请注意防护。
2. 细胞衰老β-半乳糖苷酶染色反应依赖于特定的pH条件,不能在二氧化碳培养箱中进行染色反应。用于细胞培养的二氧化碳培养箱中较高浓度的二氧化碳会影响染色工作液的pH值,而导致染色失败。
3. 试剂解冻后或使用前如果有沉淀,必须在使用前确保沉淀全部溶解。β-半乳糖苷酶染色液B刚从试剂盒中取出时,管底可能存在少量沉淀,属正常现象,充分混匀或Vortex后,沉淀会全部溶解,并须确保在全部溶解后使用。配制染色工作液时,也可能有少量絮状沉淀出现,震荡混匀后就会完全溶解,且须确保全部溶解后才能使用。
4. 配制染色工作液时需使用聚丙*(代"烯")(polypropylene)容器或玻璃容器,不宜使用聚*乙*(代"烯")(polystyrene)容器。但染色时可以在聚*乙*(代"烯")(polystyrene)容器中进行,例如普通的6孔板就可以用作染色的容器。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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·TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(显色法)
编号:YT137
英文名称:Colorimetric TUNEL Apoptosis Assay Kit
规格:20次|50次
本试剂盒提供了一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。对于待检测的细胞或组织样品,经过生物素标记和后续的DAB显色等步骤,即可在普通光学显微镜下观察到凋亡细胞。本试剂盒足够检测20个样品。
试剂盒组分:
TdT酶———————————40μl
Biotin-dUTP————————960μl
TdT酶稀释液(选用)—————500μl
Streptavidin-HRP——————22μl
Streptavidin-HRP稀释液———1ml
DAB显色液A————————6ml
DAB显色液B————————6ml
标记反应终止液——————6ml
细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时,暴露的3"-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)的催化下加上生物素(Biotin)标记的dUTP(Biotin-dUTP),随后和辣根过氧化物酶(HRP)标记的Streptavidin (Streptavidin-HRP)结合,ZH在HRP的催化下通过DAB显色来显示凋亡细胞,从而可以通过普通光学显微镜检测到凋亡的细胞,这就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理。
本试剂盒有如下优点:
(1)高灵敏度:背景染色极低,阳性染色强,可以在单细胞水平检测到细胞凋亡,同时由于凋亡早期就有 DNA断裂,可以检测到早期的细胞凋亡。
(2)特异性好:TUNEL检测时通常更容易标记凋亡细胞,而不容易标记坏死细胞。
(3)快速:仅需约2-3个小时即可完成。
(4)应用范围广:可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况,也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。
TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的DNA断裂,但不会检测出射线等诱导的DNA断裂(和细胞凋亡时的断裂方式不同)。这样一方面可以把凋亡和坏死区分开,另一方面也不会把射线等诱导发生DNA断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。
极少数细胞凋亡时没有DNA断裂,此时不适用TUNEL法检测。在个别类型的坏死细胞中也发现TUNEL检测呈阳性。在需要严格判断细胞凋亡的情况下,同时检测多个凋亡指标。
注意事项:
1. 需自备用于洗涤细胞的PBS或HBSS,用于封片的抗荧光淬灭封片液(YT097)等适当的封片液,用于固定的4%多聚甲醛或向百奥莱博订购免疫染色固定液(YT086),同时需自备含0.1% Triton X-100的PBS或向百奥莱博订购免疫染色洗涤液(YT089)。 需自备过氧化*,除石蜡切片外需自备甲醇。
2. 如果用于石蜡切片的检测,需自备蛋白酶K,二甲*。
储存条件:-20℃。
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·细胞内*离子荧光探针(Fluo-4 AM)
编号:YT948
英文名称:Intracellular calcium fluorescence probe
规格:25微升
本品是最常用的检测细胞内*离子浓度的荧光探针之一.用于细胞内*离子检测时,Fluo-4 AM的常用浓度为0.5-5μM。通常用含有0.5-5μM的Fluo-4 AM的适当溶液和细胞一起在20-37℃孵育10-60分钟进行荧光探针装载,随后适当洗涤,洗涤后可以考虑适当再孵育20-30分钟以确保Fluo-4 AM在细胞内充分转变成Fluo-4。本Fluo-4 AM(*离子荧光探针) 是配制于无水DMSO (anhydrous DMSO)中的储存母液,浓度为2mM。
分子式:C51H50F2N2O23
分子量:1096.95
Fluo-4 AM在Fluo-3 AM的基础上改进而成,其特点是加载更快并且在相同条件下荧光更加明亮。Fluo-4 AM将Fluo-3 AM结构中的*原子替换成了*原子,导致它的ZD激发波长会向短波长处偏离12nm左右。这个波长更接近于氩激光器的波长488nm,所以用氩激光器激发时,Fluo-4的荧光强度会比Fluo-3强一倍。由于Fluo-4与*离子的亲和力和Fluo-3相近,所以使用上和Fluo-3也基本相同,可以使用激光共聚焦显微镜、荧光酶标仪等荧光检测仪器来测定细胞内*离子浓度的变化。Fluo-4 AM和Fluo-3 AM的结构式参考下图。
Fluo-4 AM是Fluo-4的乙酰甲酯衍生物,是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。Fluo-4 AM的荧光非常弱,其荧光不会随*离子浓度升高而增强。Fluo-4 AM进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成Fluo-4,从而被滞留在细胞内。Fluo-4可以和*离子结合,结合*离子后可以产生较强的荧光,ZD激发波长为494nm,ZD发射波长为516nm。实际检测时推荐使用的激发波长为488nm左右,发射波长为512-520nm。Fluo-4的激发光谱和发射光谱参考下图。
注意事项:
1. Fluo-4 AM遇水极易分解,建议DY次使用时,母液分装并密封保存,同时注意保持干燥。
2. Fluo-4 AM在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
3. 探针的工作浓度、细胞量、孵育温度和时间等需要根据不同实验预先摸索。
4. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
储存条件:-20℃,有效期6个月。
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·多聚L-赖*酸溶液
编号:YT163
英文名称:Poly-L-lysine Solution
规格:5mg
本产品为已经配制好的Poly-L-lysine溶液,并经过滤CJ处理,可以直接稀释后用于细胞或组织培养方面的实验。分子量大于70,000的多聚赖*酸可以用于促进细胞贴壁生长,本产品可以用于促进细胞的贴壁生长。
CAS:25988-63-0
分子式:L-Lys-(L-Lys)n-L-Lys·xHBr
分子量:150,000~300,000
注意事项:
Poly-L-lysine和Poly-D-lysine都可以用于促进细胞的贴壁生长。Poly-L-lysine可以被某些细胞所消化并吸收,摄入过多的Poly-L-lysine会产生一定的细胞毒性。如果遇到Poly-L-lysine有细胞毒性的情况,可以考虑选购Poly-D-lysine。
储存条件:-20℃。
·细胞色素C抗体(Cytochrome C抗体)
编号:YT154
英文名称:anti-Cytochrome C antibody
规格:>20次
本抗体是用变性的重组人Cytochrome C作为抗原制备而成的抗Cytochrome C小鼠单克隆抗体。克隆号为7H8。
本Cytochrome C抗体识别的是总Cytochrome C (total Cytochrome C),可以检测内源性的Cytochrome C,未发现和其它激酶有交叉反应。
本抗体可以用于通过Western或免疫荧光检测线粒体内的Cytochrome C的释放情况,以确定Cytochrome C释放和凋亡的相关性,或直接用Cytochrome C释放来判断细胞凋亡的状况。正常细胞Cytochrome C的染色集中在线粒体,而凋亡细胞的
Cytochrome C则呈弥散分布。
Cytochrome C,即细胞色素C,是线粒体电子呼吸链中的一个重要蛋白。Cytochrome C在进化上高度保守。当细胞发生凋亡时,细胞色素C会从线粒体中释放到细胞浆中,并且作为细胞凋亡的关键调控步骤。在细胞色素C和dATP存在的情况下,Caspase-9和Apaf-1可以相互结合,并促使Caspase-9激活。细胞色素C的释放和Caspase-9的激活对于激活其它的Caspase包括Caspase-3,以及导致后续的DNA片段化(DNA fragmentation)至关重要。细胞凋亡的YZ蛋白,Bcl-2或Bcl-XL都可以YZ细胞色素C从线粒体的释放;而细胞凋亡的促进蛋白Bax,可以诱导细胞色素C从线粒体的释放。Cytochrome C从线粒体释放到细胞浆中常被作为细胞凋亡的一个重要指标。
组份:
Cytochrome C抗体————100μl
Western一抗稀释液————20ml
免疫原种属:人
免疫原:重组人Cytochrome C
克隆性:单克隆抗体
宿主:小鼠
用途:WB,IP,IF,F
交叉反应性:人,小鼠,大鼠
同种型:IgG2b
Cytochrome C分子量:~15kD
推荐稀释比例:WB(1:200),IP(1:20),IF(1:50),F(1:50)
注意事项:
1. 在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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