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北京现货PLP固定液(Nakane-McLean固定液)优惠

产品信息
  • 特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货PLP固定液(Nakane-McLean固定液)优惠,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。


    名称:北京现货PLP固定液(Nakane-McLean固定液)优惠
    英文名:Periodate-Lysine-Paraformaldehyde Fixative Solution
    规格:250mL
    品Pai:百奥莱博
    编号:BTN131289
    产地:国产|进口
    PLP固定液即过碘酸*-赖*酸-多聚甲醛固定液,又可称为Nakane-McLean固定液。该固定液的作用机制是借助于过碘酸氧化组织中的糖类形成醛基,通过赖*酸的双价*基与醛基结合,从而与糖形成交联。由于组织抗原绝大多数都是由蛋白质和糖两部分构成,抗原决定簇位于蛋白部分,故该固定液有选择性地使糖类固定,这样既稳定了抗原,又不影响其在组织中的位置关系。

    产品特点:
    1.较适于富含糖类的组织,对超微结构及许多抗原的抗原性保存较好。
    2.即开即用,用户不需单独购买各种试剂来配制。
    3.固定时间一般需要12-24小时。

    产品组成:

     
    成分 规格
    溶液A 240ml
    溶液B 80ml
    成分C 1g
    说明书 1份


    储存条件:常温运输,4℃避光保存,保存期限半年。

    使用方法:

    一、配制PLP 固定液(以配制50mL 固定液工作液为例,如果用户需要配制其他体积,请按比例增加或减少各成分的用量)
    1.取 30mL溶液A加入到50mL的聚乙*(代"烯")离心管中。
    2.继续向离心管中加入10mL的溶液B,混合均匀。
    3.称取 0.085g成分C的干粉,加入到上步混合液中,搅拌直至干粉溶解,即得到PLP固定液工作液。
    注:此固定液临用前配制,否则时间长了会产生一些沉淀,亦会发生氧化反应,从而影响后续组织固定实验。

    二、固定液的使用(以皮肤活组织切片为例)
    4.取皮肤活组织,切成小长方块。
    5.置入PLP 固定液工作液中,固定12-24小时(根据样品材料、大小不同,固定时间或固定温度可能会有较大差异)。
    6.用 0.1 M自备的PBS溶液漂洗固定后的组织样品。
    7.将样品置于自备的20%甘油或0.1 M PBS溶液中,4℃下保存过夜。
    8.将上述样品转移至-20℃下保存备用(20%甘油或0.1 M PBS溶液应淹没组织样品,以防组织样品暴露在液面外被冻伤),或用冷冻的滑动式切片机将固定后的组织样品切成薄片,光镜或电镜下观察组织。

    注意事项:
    1.本产品对人体有一定的损害,请在通风好的环境下小心操作,避免吸入。
    2.组织取材的厚度不同,固定时间也不同,对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。
    3.固定液的容量应足够,一般固定液与组织块的体积比率应大于10:1。温度对固定的影响很明显,提高温度可以加速固定作用,但温度不宜过高。
    4.固定后的组织样品在转移到-20℃下保存之前,4℃下最长可保存1周。
    5.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

    北京现货PLP固定液(Nakane-McLean固定液)优惠极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:

    ·大肠杆菌JM109感受态细胞
    编号:BTN90207
    英文名称:E.coli JM109 Chemical Competent Cell
    规格:0.1mL*10
     本产品是采用大肠杆菌JM109菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。

    产品特点:
    1. 使用pUC19质粒检测,转化效率可达108,-80℃保存几个月转化效率不发生改变。
    2. recA1和endA1突变阻止对克隆DNA的修饰或对宿主菌染色DNA的重组,提高纯化质粒的产量和质量。
    3. JM109菌株基因型:endA1 recA1 gyrA96 thi hsdR17(rk-mk+)relA1 supE44 D(lac-proAB)[F’traD36 proAB laqlqZ Δ M15 ]
    4. 本产品质量稳定,使用方便,质优价廉。

    储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。

    自备试剂:无菌超纯水,SOB和SOC液体培养基,相关KJ素。

    使用方法:
    1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl,可以根据实际情况分装使用。
    以下实验以50μL感受态细胞为例。
    2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
    3. 42℃热击90秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
    4. 每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。
    5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。

    注意事项:
    1、涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA 总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm ,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
    2、新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。



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    *霉素 Imidazole 56-75-7
    RN2201 病毒基因组DNA/RNA快速提取试剂盒
    369-07-3 邻硝基*(代"*")-β-D吡喃半乳糖苷 ONPG
    PY08-037  乳糖发酵管(带导管) 3ml  10支/盒,用于大肠菌群的确证试验
    001004 山羊血清
    79-06-1 丙*(代"烯")酰胺 Acrylamide
    BTN100101 镍柱介质 Ni-Agarose Resin
    亮绿SF染色液(1%)   100ml
    85-61-0 辅酶A Coenzyme A hydrate(COA)
    腺嘌呤 PAR 73-24-5
    ARB11310 人促肾上皮质激素释放激素(CRH)elisa检测说明书 Human corticotropin releasing hormone,crh ELISA KIT
    F020209 兔抗小鼠IgG抗体 Rabbit Anti-Mouse IgG
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    ·软骨RNA柱式提取试剂盒
    编号:BTN101121
    英文名称:Cartilage RNA column Extraction Kit
    规格:50次
    本试剂盒专门从各种软骨组织样品中快速提取总RNA的试剂盒,它能有效克服传统TRIzol方法提取软骨组织RNA时,十分容易产生糖蛋白和酸性多糖污染这一缺点。

    试剂盒特点:
    1. 能有效去除糖蛋白、粘蛋白污染,OD260/280一般均在1.9以上。
    2. RNA产率一般为5-15μg/100mg。
    3. 操作简单,整个提取过程一般只需要10 多分钟。
    4. 得到的RNA可以直接用于RT-PCR、Northern杂交、mRNA 纯化、Primer Extension、RNA Protection、in vitro translation等研究。

    试剂盒组成:
    成分 规格
    溶液A 50ml
    溶液B 15ml
    溶液C 50ml
    离心吸附柱 50套
    通用洗柱液 50ml
    RNA 洗脱液 10ml
    说明书 1份


    储存条件:常温运输和保存,有效期一年。溶液B需4℃保存。

    使用方法:
    1. 先将50-200mg 新鲜或冷冻的软骨组织液氮研磨成粉,加入1mL溶液A溶解(溶液A使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并摇晃混匀),然后将研磨物转移到新的1.5mL离心管中,振荡混合30秒。也可以将软骨组织剪碎后与溶液A一起用Polytron 匀浆机(内切式匀浆机)匀浆5-20秒,再转移到1.5mL离心管中。匀浆时会产生泡沫,但不影响提取效果。
    2.在离心管中加入0.3mL的溶液B和0.2mL自备*仿,在振荡器上振荡30秒混匀,此时溶液呈均匀的乳浊状。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
    3.室温12000~15000g离心3~5分钟,两相间将有约5-10 毫米厚的细胞破碎物。
    4. 将上清液(约0.6mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中,下层有机相和中间层含有DNA、蛋白质和其他杂质,避免触及或吸取。留下100μl上清液不取。
    5. 加入等体积的溶液C,充分颠倒混匀。
    6. 将一半的溶液转移到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
    7. 将剩下的一半溶液转移到同一离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
    8. 加0.7mL 通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。
    9. 加0.3mL 通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。此步可以省略。
    10.室温离心半分钟。此步十分重要,否则残留的乙醇会影响RNA的使用。
    11. 将离心吸附柱转移到自备的RNase-free离心管中,加入50-100μl RNA洗脱液,室温放置1-2分钟。
    12. 12000~15000g室温离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
    13. RNA 完整性的电泳检测:如果需要做Northern杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。
    14. RNA产量产率测定:将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度X 体积)和产率(RNA产量/组织用量)。注意:测定OD时不要稀释过度,否则浓度会在仪器能测的范围之外。本方法提取的RNA 测OD时一般最多只能稀释10-20倍。
    15. RNA 纯度测定:无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响RT-PCR等反应。



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