Tris饱和酚-氯仿-异戊醇混合液(DNA提取用) RNA纯化

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")Tris饱和酚-*仿-异戊醇混合液(DNA提取用) RNA纯化，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：Tris饱和酚-*仿-异戊醇混合液(DNA提取用) RNA纯化
编号：BTN100805B
英文名：Phenol-Chloroform-Isoamylol
品Pai：百奥莱博
本产品是Tris饱和酚和*仿和异戊醇的25:24:1的预混液，可以替代Tris饱和酚，用于抽提核酸，去除其中的蛋白质和脂溶性物质。跟Tris饱和酚相比，它不再需要*仿抽提。同时使用本产品不容易产生倒相现象(就是*酚相在上层，水相在下层)。A型pH＜5.0，为RNA提取专用；B型pH＞7.8，为DNA提取专用。

储存条件：常温运输和保存、避光。有效期一年。

相关知识：
Q：*酚提取法的局限在哪里？
A：酚提取法的局限是不能去除核酸以外的其他水溶性的多糖和糖蛋白(Howe曾经用酚提取法来提取糖蛋白，文献见Meth. Enzymol. 28，236，1972)，所以在用酚提取+醇沉淀法从富含多糖的样品(如植物)和富含糖蛋白的样品(如血液、软骨)中提取DNA或RNA时，很容易产生多糖污染。

Q：离心后为何*酚相消失？
A：酚跟水互溶，互溶比例跟温度、离子强度、去污剂浓度相关有时(如65℃时)可以达到彻底互溶。酚相消失可能就是上述原因造成，由于液体成本一般不能随意改动，所以解决办法一是用冷冻离心机、二是增加酚的用量、三是直接使用酚-*仿-异戊醇混合液，将酚抽提和*仿抽提合二为一。

Q：饱和酚为何呈淡黄色或棕色？
A：*酚本身是无色，但为了防止其氧化，一般加入了一定比例的抗氧化剂8-羟基喹*(代"啉")，后者是淡黄色或棕色(取决于浓度)，所以酚也呈淡黄色或棕色。

Tris饱和酚-*仿-异戊醇混合液(DNA提取用) RNA纯化正在火爆，除此之外，为您推荐下别产品：

·柱式软体动物DNA提取试剂盒
编号：BTN101111
英文名称：Mollusc DNA column extraction kit
规格：50次
本试剂盒是专门用于从各种软体动物组织中提取基因组DNA的试剂盒。其原理是基于阳离子去垢剂CTAB在适当的离子强度条件下，特异地跟基因组DNA 结合形成沉淀，然后在用硅胶膜技术进行进一步纯化。

产品特点：
1.适用于用常规方法难以提取的、各种富含多糖的软体动物动物，包括螺类、贝类、乌贼、章鱼和蜗牛等。
2. 提取到的基因组DNA 完整性，其中最长可以到达长度一般在20-50kb。
3. DNA 纯净，OD260/280一般都在1.9左右、DNA片段大小在30-50 Kb左右，可直接用于PCR、酶切、杂交等。
4. 操作简单，整个过程约30分钟。
5. 安全无毒，本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。
6. 价廉物美，与国外同类产品相比质量相当，但价格便宜。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	50ml
溶液C	100ml
RNase A(10mg/mL)	150μl
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
DNA洗脱液2.0	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用方法：
1. 匀浆方法一：称取0.1-0.3g软体动物组织，转移到塑料研钵中，液氮研磨成粉后转移到一个干净的1.5mL塑料离心管中。注意：避免使用含二氧化硅的玻璃研钵，因为DNA 会吸附在表面，影响得率。在离心管中加入1mL 65℃预热的溶液A并用移液枪头充分吹打混匀(如果溶液A有沉淀，需先在65℃加热溶解后摇匀再使用)。进入第三步。
2. 匀浆方法二：将0.1-0.3g软体动物组织剪成小块，转移到10-15mL塑料管中(培养细菌那种离心管即可)，加入1mL 65℃预热的溶液A，用Polytron 式匀浆机(剪切式匀浆机)匀浆1分钟左右。
3. 65℃保温5-30分钟，其间吹打混匀2-3次。
4.转移到新的1.5mL离心管中，12000～15000g室温离心3分钟。
5. 将不超过0.75mL的上清转移到新离心管中。有时候上清液中还会有少量细小悬浮物，但对后续操作没有影响，不必进行特殊处理。
6.在上清液中加入等体积的溶液B，上下颠倒30秒充分混匀，溶液将呈白色混浊状。
7. 将其置于冰浴中放置5-10分钟。
8. 12000～15000g室温离心3分钟，转移上清到新的1.5mL塑料离心管中。
9. 加入0.2mL的*仿(自备)，震荡器上充分振荡30秒混匀。
10. 12000～15000g室温离心3分钟，两相交界面将有白色膜状物，小心转移上清到新1.5-5mL塑料离心管中。注意：由于下一步要加1.5倍体积的溶液C，所以新的离心管的体积要足够大。
11. 加入1.5倍体积的溶液C，上下颠倒30秒混匀，然后分多次的将混合液转移到离心吸附柱中。
12. 每次转移0.7-0.8mL 混合液后，室温放置5-10分钟。
13. 12000～15000g室温1分钟，弃穿透液。
14. 对需要多次上柱的样品，可以在此将剩余的样品加到离心吸附柱式中，重复第12-14 步的操作。
15. 将0.7mL 通用洗柱液加入离心柱，室温离心1分钟，弃穿透液。
16.在离心吸附柱中加入0.3mL的通用洗柱液，12000～15000g离心半分钟(此步为第二次洗涤)。
17. 空甩1分钟去除残留液体。
18. 将离心柱放置在一新的1.5mL塑料离心管中，加入30-100μL DNA 洗脱液2.0。
19.室温放置5分钟后离心1分钟，管底即为软体动物DNA溶液，可立即使用，也可长期保存在－20℃。
20.可以重复上步一次，以洗脱更多的DNA(第二次洗脱的DNA一般有DY次的30%左右)。


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ARB14209 大鼠还原型辅酶Ⅱ(NADPH)检测服务 
BL0905 FITC标记羊抗鸡IgG抗体
羟基乙酸* D-Glucose anhydrous 2836-32-0
J0316 山羊抗小鼠IgG(H+L)抗血清 1ml/10ml
ARB13445 鸡白介素2(IL-2)酶联免疫定量检测 Chicken interleukin 2,IL-2 ELISA KIT
ARB12802 小鼠β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA代测服务 Mouse amyloid beta Peptide 1-42,aβ1-42 ELISA KIT
ARB12800 小鼠β*酚(β-Nph)检测服务 Mouse beta-naphthol,β-nph ELISA KIT
ARB14113 大鼠游离三碘甲状腺原*酸(FT3)酶免分析 
ET108 High Affinity HotStart Taq
ARB11058 人松弛肽/松弛素(RLN)ELISA检测服务 Human relaxin,rln ELISA KIT
ARB10011 人17羟孕酮(17-OHP)代做ELISA实验 Human 17-hydroxyprogesterone,17-ohp ELISA KIT
ARB12923 小鼠主要组织相容性复合体I类(MHCI/H-2I)elisa检测操作说明书 Mouse major Histocomp*(代"a")tibility complexi,mhci/h-2i ELISA KIT
D-甘露糖 DNSCl 3458-28-4
ARB10132 人OJ抗体/抗异亮*酰tRNA合成酶抗体(OJ/IleRS)酶免分析 Human anti-oj-antibody，oj/ilers ELISA KIT
PY01-140  蚕蛹蛋白胨  250克  
ARB11070 人轮状病毒抗体(RV-Ab)ELISA检测服务 
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·非酶RNA清除剂1.0
编号：BTN51203
英文名称：Non-enzymatic RNA scavenger 1.0
规格：1.5mL
本品为非酶法质粒RNA和蛋白质污染的去除试剂，专用于从碱变性法纯化的质粒中去除其中的绝大部分RNA污染和大部分蛋白质污染。

产品特点：
1.GX，能去除质粒粗提物中80%左右的RNA污染和60%的蛋白污染。而常用的RNase或LiCl处理只能去除RNA，不能去除蛋白质污染。
2.快速，整个过程只需要十余分钟，不需要37℃保温。
3. 经过本产品处理过的样品，由于没有RNA和蛋白质的干扰，使用硅胶膜或其他吸附离心法吸附、回收质粒DNA的效率比没处理过的样品更高。
4. 价格不到RNase A的1/2，在质粒的大规模制备时成本优势更加明显。
5. 制备临床用(如基因ZL)的质粒DNA时，可以减少后期在临床报批、生产、质检和使用中的很多麻烦(使用生物来源的RNase A和蛋白酶时，容易带入对人体有害的内毒素、LPS等污染物)。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用方法：

一、从碱变性澄清液中去除RNA和蛋白质
1. 将约1/5体积的RNA Scavenger加入到碱变性澄清液中(加溶液III后离心得到的上清液一般是450μl，所以需要加入50μl)。
2. 混匀后室温放置10分钟。
3.室温8000g离心10分钟。
4.转移上清到一新的离心管中，后续处理跟经典的方法一样(即加入等体积的异丙醇或两倍体积的乙醇,混匀后室温离心10分钟,弃上清液后用1mL 75%乙醇洗一次,短暂离心，去掉残留液体,加入适量TE缓冲液溶解质粒待用)。

二、从质粒粗提液中去除RNA和蛋白质
1、将1/4体积的RNA Scavenger-1直接加入到已经溶解在TE或其他溶解液的质粒DNA中。
2、混匀后室温放置10分钟。
3、室温8000g离心10分钟。
4、转移上清到一新的离心管中，加入等体积的异丙醇或两倍体积的乙醇。
5、混匀后室温离心10分钟。
6、弃上清液后用1mL 75%乙醇洗一次。
7、短暂离心，去掉残留液体。
8、加入适量TE缓冲液溶解质粒待用。

使用效果：

图注：用经典的碱变性法从1.5mL E.coli过夜培养液中提取的pGEM-3质粒粗提物(加溶液ⅡI离心上清)经过RNA Scavenger处理后(LA+RNA Scavenger)与未经处理的样品(AL)电泳比较。上样量为1/5。

图注：用经典的碱变性法提取的pGEM-3质粒DNA溶于TE中后，经过RNA Scavenger处理的(+)与未经处理的(-)样品进行电泳比较。处理过的样品失去80%左右的RNA。

疑难解答：
Q：电泳检测质粒DNA时也需要将其RNA污染去掉吗?
A：是。否则RNA 将结合大部分的EB溶液,使质粒DNA的带型减弱。
Q：RNA Scavenger-1跟RNA Scavenger-2 有何区别？
A：
1. RNA Scavenger-2处理过的样品不再需要醇/盐沉淀处理，而RNAScavenger-1处理的样品还需要醇/盐沉淀去除RNA Scavenger-1；
2. RNA Scavenger-2与柱式硅胶膜纯化方法兼容，而RNA Scavenger-1 不兼容；
3. RNA Scavenger-2 不但可以用于去除质粒DNA的RNA污染，还可以用于去除基因DNA的RNA污染，而RNA Scavenger-1只能用于质粒DNA样品。

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