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北京百奥莱博专业生产供应平末端载体连接试剂盒(不含多克隆位点)(T4连接酶技术)供应，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称：平末端载体连接试剂盒(不含多克隆位点)(T4连接酶技术)供应
产地：国产|进口
英文名：Zero background flat end fast connection kit(without mcs)
品Pai：百奥莱博
编号：ALH341
本试剂盒是一种先进的自杀基因阳性选择克隆系统，可以GX克隆平末端 PCR 产物和任何具有平末端的DNA 片段。该试剂盒对磷酸化或非磷酸化的 DNA 片段都有效。 阳性选择载体和插入片段连接仅需 5 分钟即可获得超过 90%的阳性重组克隆。由具有校正活性的聚合酶（如：Pfu polymerase）扩增的平末端 PCR 产物可直接连入克隆载体。连接产物可直接转化常用的大肠杆菌菌株。
本试剂盒提供一个新颖的自杀基因阳性选择克隆载体。该载体含有致死的自杀基因，当载体与片段连接成功，自杀基因无法正确表达，包含重组子的细胞可以正常生长；当载体与片段连接不成功，载体自连后自杀基因正确表达，包含自连空载体的细胞无法存活，即“零ZERO”背景。这种阳性筛选策略无需蓝白斑筛选，极大地加速了克隆筛选进程。
本试剂盒载体消除了插入位点附近的多克隆酶切位点，需要在PCR扩增引物上导入合适的酶切位点。此时如果使用PCR扩增引物导入的酶切位点进行DNA酶切时，酶切反应将不会受到T载体上其它多克隆酶切位点上的限制酶影响，可以大大提高酶切效率，增加亚克隆成功率。
试剂盒组份(20次)：
平末端Simple Vector(40ng/μl)——————————20μl
1000bp Control（40ng/μl）-———————————5μl
2×Quick Ligation Buffer-————————————100μl
T4 DNA ligase（5U/μl）—————————————20μl
Forward Sequencing Primer (10μM)————————100μl
Reverse Sequencing Primer (10μM)————————100μl
注：
forward sequencing primer, 23-mer 5’-CGACTCACTATAGGGAGAGCGTC- 3’
reverse sequencing primer, 24-mer 5’-AAGAACATCGCTTTTCGATGGCAG- 3’
储存条件：-20℃，有效期6个月。
本品别名：平末端载体连接试剂盒（不含多克隆位点）(T4连接酶技术)|平末端克隆试剂盒.jpg)
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·PCR产物DNA纯化回收试剂盒
编号：ALH099
英文名称：PCR product purification recovery Kit
规格：50次|100次|200次
本试剂盒适用于PCR反应产物、酶切产物DNA片段、探针标记纯化回收，DNA样品浓缩等。在高离序盐存在的情况下，DNA片断选择性的吸附于离心柱内的硅基质膜上，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，去蛋白液和漂洗液将引物、核苷酸、蛋白、酶等杂质去除，ZH低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净DNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒组份(100次)：
平衡液——————————10ml
结合液BB—————————60ml
漂洗液WB—————————25ml
洗脱缓冲液EB———————15ml
吸附柱和收集管(2ml)-———100套
试剂盒特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.使用了优质结合液，不含传统结合液的碘化*和高*酸盐，不YZ回收后酶切、连接克隆等下游反应。
3.结合液调制成为了黄颜色，便于监测pH值变化从而达到ZJ结合效果，大大提高回收效率。
4.快速、方便，不需要使用有毒的*酚、*仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。
注意事项
1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 结合液中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要立即用大量清水或者生理盐水冲洗。
3. 回收纯化的DNA片段一般在100bp到40kb之间，过长、过短片段的回收效率迅速降低。
4. 回收DNA的量和起始DNA的量，洗脱体积，DNA片断大小有关。一般1-15μg，100bp-5kb的DNA片段，回收率可高达95％。
5. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA， 不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱， 但应该确保pH大于7.5， pH过低影响洗脱效率。用水洗脱，DNA片段应该保存在－20℃。DNA片段如果需要长期保存，可以用TE缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH 8.0），但是EDTA可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。
储存条件：室温，有效期12个月。
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