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百奥莱博专业生产供应Southern专用DNA Marker(DIG标记)优惠价,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:Southern专用DNA Marker(DIG标记)优惠价
品Pai:百奥莱博
规格:20次
英文名:Southern DNA Marker(Labeled by DIG)
产地:国产|进口
编号:BTN120654B
本产品是用DIG标记的lambda/Hind Ⅲ DNA Marker,可以用做Southern杂交的Marker,便于准确确定杂交片段的大小。
产品特点:
1. 即开即用,非常方便。
2. 每个DNA片段显色强度均匀。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 按常规方法制备琼脂糖胶和酶切基因组DNA。
2.上样。在胶的两侧的加样孔中各加入10μL本产品。
3. 按常规方法电泳。
4. EB或其他染料染色后UV 观察结果。
5.转膜。
6. 按常规的方法杂交和检测DIG的方法检测。
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关于Southern专用DNA Marker(DIG标记)优惠价的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
PY08-024 牛津琼脂(OXA)平板 9CM 10皿/盒,用于李斯特氏菌的选择性分离培养
L-肌肽 DL-2-Aminobutyric acid 305-84-0
反玉米素核苷 L-Histidine 6025-53-2
ARB13924 猪层连蛋白/板层素(LN)elisa检测 Porcine laminin,ln ELISA KIT
甘油三酯(TG)检测试剂盒(GPO-PAP双试剂微板法) 100T
BTN80910 X-Gal溶液 X -Gal Solution
BL1405 RNAsaver(RNA长效保存液)
ARB12343 大鼠补体因子H(CFH)elisa测定使用说明书 Rat complement factor h,cfh ELISA KIT
ARB11550 人凋亡诱导因子(AIF)含量检测 Human apoptosis inducing factor,aif ELISA KIT
DP437 plus植物总RNA提取试剂盒
SDS溶液(10%,pH7.2) 100ml
3,3"5,5"-四甲基联*(代"*")*(代"胺")丙磺酸* 2-Chlorotrityl chloride resin 102062-36-2
高香草酸 DL3000 306-08-1
*基磺酸镍 Adenine 124594-15-6
SJ0191 Dextran T-70 葡聚糖 T-70
BL1098 RPMI Medium 1640
Scott蓝化液 500ml
1609-47-8 焦碳酸二乙酯 DEPC
BL0333 聚蔗糖400 Ficoll 400
阿利新蓝染色液(pH1.0) 3×50ml|3×100ml
PY02-450 葡萄糖琼脂 250克
L-谷*酸二乙酯盐*(代"酸")盐 4-Nitrobenzoic acid 1118-89-4
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·柱式动物DNA提取试剂盒
编号:BTN71206
英文名称:Animal DNA column extraction kit
规格:50次
本试剂盒是在我司动物DNA提取试剂盒的基础上改良而得的柱式升级产品,主要用于快速提取新鲜或冷冻的动物组织中的基因组DNA。
产品特点:
1. DNA更加纯净,大多数DNA样品的OD260/280值在1.8-1.9之间。
2. DNA产率一般在200μg/g左右(跟组织种类密切相关)。
3.可直接用于PCR、酶切、杂交等后续反应。
4. 操作更加简单,离心吸附操作代替离心沉淀,整个过程室温操作约10分钟,适合大规模样品处理。
5. 安全无毒,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。
6. 性价比高,质量和国外同类产品相当,但价格更便宜。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 40ml |
| 溶液B | 20ml |
| 溶液C | 50ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| DNA洗脱液2.0 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存、有效期一年。
使用方法:注意:溶液A容易产生沉淀,溶液B十分粘稠,用前均需要在65℃水浴中加热使沉淀溶解或粘稠度降低,用前充分摇匀。
1. 根据使用材料的不同进行下列操作:
a)对贴壁细胞:吸尽培养液,在每10平方厘米细胞中加入0.8mL预热的溶液A,用枪充分吹打以确保细胞全部裂解,然后把裂解液转移到1.5mL塑料离心管中。
b)对悬浮细胞:离心收集细胞,吸尽液体,在每1-5×106悬浮细胞中加入0.8mL预热的溶液A,用枪充分吹打以确保细胞全部裂解。然后把裂解液转移到1.5mL塑料离心管中。如果是fibroblasts或carcinoma细胞,0.8mL溶液A的细胞使用量不要超过1×106个细胞。
c)对新鲜或冷冻的组织:先将剪切成小块的新鲜组织或冷冻保存的组织放入10mL或15mL塑料离心管中,每50-100mg组织加0.8mL预热的溶液A,用剪切式匀浆器匀浆30秒左右,然后把裂解液转移到1.5mL塑料离心管中。对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA),建议组织的使用量不要超过50mg。
d)对DNAhold保存组织:先用纸吸去DNAhold液体后再剪切成小块,其余操作同新鲜或冷冻组织的处理。
2. 加入0.4mL预热的溶液B到裂解液中。由于溶液B十分粘稠,可将1mL枪头剪掉一截再用,也可以用称量方法加0.4 g。加入溶液B后需要颠倒数次充分混匀。
3. 65℃水浴5-10分钟。如果室温放置,DNA产量将降低10-20%。
4. 加入0.2mL自备*仿,振荡器上充分振荡混均30秒,此时溶液将呈乳白色。一定要确保离心管底的液体被震荡起来。
5. 12000~15000g室温离心2分钟。上清透明,中间层为白膜(蛋白层)。
6.小心将上清液平均转移到两个新的离心管中,避免触及中间的白膜。
7. 每个管中加入1.5倍体积的溶液C,充分颠倒混匀。
8. 分两次上柱(即先转移一半的混合液到离心吸附柱中,室温放置2分钟,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液,然后再将剩下的混合液到离心吸附柱中,室温放置2分钟,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液)。
9. 加0.7mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
10. 加0.3mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
11. 12000~15000g室温再离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会污染DNA。
12.室温放置半分钟使残留乙醇挥发。
13. 将离心吸附柱转移到一新的1.5mL塑料离心管中,加入50-100μL DNA洗脱液2.0,室温放置离心吸附柱1-2分钟。
14. 12000~15000g室温离心半分钟,离心管中溶液即为DNA样品,可以立即使用或存放于冰箱待用。
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·NP-40裂解液
编号:BTN131009
英文名称:NP-40 Lysis Buffer
规格:100mL
NP-40裂解液是一种比较温和的细胞组织裂解液。NP-40裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP和co-IP等。
产品特点:1. 本产品裂解能力强度温和,对膜蛋白的处理能力一般;对核蛋白的提取能力较好;对胞浆蛋白、胞浆磷酸化蛋白和各种转录因子处理效果很好。
2. 本产品含有各种蛋白酶和磷酸蛋白酶YZ剂,能有效防止各种蛋白酶对目的蛋白的降解。
3. 本产品的主要成分为50mM Tris(pH7.4),150mM NaCl,1% NP-40以及sodiu*(代"m") pyrophosphate,β-glycerophosphate,sodiu*(代"m") orthovanadate,sodiu*(代"m") fluoride,EDTA,leupeptin等多种YZ剂,可以有效YZ蛋白降解。
4. 用NP-40裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA法蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:对于培养细胞样品: 1. 融解NP-40 裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的ZZ浓度为1mM。
2. 对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g离心3~5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
裂解液用量说明 :通常6孔板每孔细胞加入150 微升裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200 微升或250 微升。
对于组织样品:1. 把组织剪切成细小的碎片。
2. 融解NP-40 裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的ZZ浓度为1mM。
3. 按照每20 毫克组织加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
4. 用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g离心3~5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6. 如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
备注:
1. 为取得ZJ的使用效果,尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
2. 裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
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温馨提示:不可用于临床ZL。