48T/96T盒 小鼠丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶检测试剂盒

做小鼠丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶检测试剂盒时。空白值总是比较高，在0.3－0.4之间。如何降低空白OD值.（已经摸过二抗稀释度了）,我是用pbs＋0.1％tween－20洗8次，然后pbs洗3次，还是不行.
1,不知道你具体是怎样操作的。你可以试一下，在加完A、B液后，将板子盖住，有可能是B液见光分解了一部分，使读数偏高了。
2,我认为是非特异性吸附造成的，可以加表面活性剂在洗液中，或加入干酪素在反应液中，效果很好。
3,影响因素多着呢。小鼠丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶检测试剂盒有可能是你包被物质或封闭液跟二抗有非特异性反应。把你的试验说详细点儿，比如包被什么？怎么封闭？
不知道你所做的ELISA是不是间接法的?你所说说的空白是什么空白?
我这里经常做的几种空白,仅供参考。
阴性对照孔:所检测项目为阴性的标准样品,实验后检测数值即为阴性对照数值.一般属于全面考察本底的对照。
小鼠丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶检测试剂盒酶空白孔:不加样品,仅在加酶结合物步骤加入规定量酶,以后步骤同其它样品操作.实验后检测数值即为酶空白数值.一般考察的是板和酶工作浓度是否合适,洗涤液是否可用或者板包被物和二抗是否有交叉反应。
底物空白孔:无加样品和加酶步骤,仅在加底物显色操作时在该孔内加入规定量显色剂,读数后即为底物空白数值,就是考察A和B的稳定性。
纯空白:孔内仅加终止液.一般是反应板读数调零用的
小鼠丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶检测试剂盒首先应该找到本底产生原因.把这几个空白一起做一下.出来什么结果再讨论.
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