PE-BRDU细胞增殖检测试剂盒(ICF/FACS法) 细胞凋亡与增殖

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名称：PE-BRDU细胞增殖检测试剂盒(ICF/FACS法) 细胞凋亡与增殖
品Pai：百奥莱博
编号：KFS325
产地：国产|进口
规格：20T
英文名：BrdU cell proliferation Detection Kit
本试剂盒细胞增殖检测是一个基于荧光检测的实验，可以监测细胞健康和通过胸苷掺合来估量DNA 合成从而监测细胞分裂。

*脱氧尿苷(5-*代-2"-脱氧尿苷, BrdU) 是一种合成的核苷酸即胸苷的类似物。BrdU 通常被用于检测活组织中再生的细胞。

BrdU 可以掺合到复制细胞中新的合成DNA 中（在细胞周期S 期），在DNA 复制可代替胸苷。利用抗BrdU 的特异性抗体便可以用于检测这个插入的化学品，从而检测出细胞是否在复制其DNA。

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·细胞凋亡形态学检测试剂盒
编号：KFS285
英文名称：Apoptotic/Necrotic Cell Detection Kit
规格：100T
形态学检测是研究细胞凋亡的最基本方法。细胞凋亡的形态学变化是多阶段的，起初，细胞间连接和微绒毛消失，细胞体积缩小，胞浆凝缩，内质网变疏松并与胞膜融合，形成一个个空泡，核糖体与线粒体等细胞器聚集，结构尚无明显改变，细胞核内的染色质逐渐凝聚成新月状附在核膜周边，细胞核固缩呈均一的致密物，进而断裂成碎块，此时细胞膜仍保持完整：然后，胞膜及核膜不断出芽、脱落，一个细胞变成数个大小不等的有膜包裹的凋亡小体：ZH凋亡小体被周围具有吞噬能力的细胞吞噬、消化。上述这些形态学的变化，可以通过本试剂盒中的染色及光学显微镜观察。

试剂盒组分：
Dye Reagent 1×10mL
Dye Reagent 2×1mL
Buffer A×10mL

注意事项：利用血球计数板进行该项操作时，不要用血计板配套的质地较硬的盖玻片，而用普通的盖玻片反而更利于结果的观察。

操作方法
1. 用适当的方法诱导细胞凋亡，消化收集细胞；
2. 用PBS 洗涤细胞二次，并调成浓度为1×106cells/ml 细胞悬液；
3. 吸取50~100μL 的细胞悬液均匀涂布于载玻片（A 片）上或用离心涂片机制片，室温晾干，甲醇固定5min；
4. 在A 片上滴加数滴100μL 的Dyes Reagent 1 室温染色1 min，用水轻轻洗去染液；
5. 在含体积分数为1%盐*(代"酸")的80%乙醇中分化10 s，流水冲洗1 min，晾干，显微镜下观察细胞的形态。
6. 在另一张涂有细胞并已于无水乙醇固定2min 的载玻片（B 片）上滴加100μL 染色液2（Dyes Reagent2 ：Buffer A=1:9 的混合液），室温染色5～20min，用水轻轻洗去染液，室温晾干；
7. 二甲*浸泡3 min，以去除杂质，使载玻片透明，ZH树脂封片，显微镜下观察细胞形态；
8. 观察200-500 个细胞，计数凋亡细胞所占的比例。

结果分析A 片：凋亡细胞皱缩，胞膜完整。染色质凝聚，嗜碱性增强，染成深蓝色，呈环状或新月状附在核膜周围，或细胞核固缩碎裂成数个圆形颗粒，核膜消失。而坏死细胞体积增大，染色质变稀疏成网状，嗜碱性减低，染成淡蓝色，胞核破碎，细胞膜不完整。

B 片：凋亡细胞皱缩，胞膜完整。胞浆稀少或缺乏，染成淡红色，染色质凝聚，染成深紫色，细胞核固缩碎裂成数个圆形颗粒。

计算细胞凋亡率和死亡率：
细胞凋亡率=凋亡细胞/细胞总数×100%
细胞死亡率=坏死细胞/细胞总数×100%

储存：RT,避光，有效期12个月。


PE-BRDU细胞增殖检测试剂盒(ICF/FACS法) 细胞凋亡与增殖关键词：PE-BRDU细胞增殖检测试剂盒(ICF/FACS法),KFS325,BrdU cell proliferation Detection Kit


·HRP标记链霉亲和素
编号：KFS244
英文名称：Peroxidase-conjugated Streptavidin
等级：1mg/ml
规格：10μl

浓度：1.0mg/ml
建议工作浓度：0.01-0.1μg/ml(WB with ECL),1-2μg/ml(elisa,IHC,WB)
Buffer：0.01M 磷酸*，0.25M NaCl，pH 7.6

稳定剂：15 mg/ml BSA (lgG-Free，蛋白酶-Free)
储存：-20℃，有效期6个月。

·Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡检测试剂盒
编号：KFS186
英文名称：Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit
等级：1mg/ml
规格：10T|20T|50T|100T
在正常细胞中，磷脂酰丝*酸（PS）只分布在细胞膜脂质双层的内侧，而在细胞凋亡早期，细胞膜中的磷脂酰丝*酸（PS）由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V 是一种分子量为35~36kD 的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝*酸有高度亲和力，故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝*酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将Annexin V 进行荧光素FITC 标记，以标记了的Annexin V 作为荧光探针，利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。

碘化丙啶（Propidium Iodide, PI）是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞膜，但对凋亡中晚期的细胞和死细胞，PI 能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将Annexin V 与PI 匹配使用，就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。

本试剂盒可应用于培养细胞凋亡检测（不推荐用于检测组织样本）。

注意事项
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-FITC，Propidium Iodide （PI）避光保存及使用。对于Annexin V-FITC 这个组份，建议您在收到产品之后，分装为小份避光保存于-20℃，即用即取。
3. Propidium Iodide（PI）有毒，操作时要戴手套。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，需用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。


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鲁米诺单*盐 Cholesterol esterase from pseudomonas sp 20666-12-0
ARB11673 人维生素E(VE)elisa测定使用说明书 Human vitamin e,ve eELISA KIT
ARB13191 小鼠胰高血糖素样肽1(GLP-1)定量分析 Mouse ghcagons-like pepfide 1,glp-1 ELISA KIT
56-41-7 L-Alanine L-丙*酸
PY02-140  TTC琼脂基础  250克  
葡聚糖凝胶LH-60 VBT
BL1191 醋酸洋红染色液
ARB10140 人P物质(SP)含量分析 Human substance p ELISA KIT
钨酸 10% Iron chelate 7783-03-1
BTN131230 DNase I干粉 DNase I Powder
ARB11640 人淀粉样前体蛋白(βAPP)ELISA检测服务 Human β amyloid precursor protein,βapp ELISA KIT
BL1313 2×Taq Plus PCR MasterMix(不含染料)
D-山梨糖 DTAB 3615-56-3

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