平末端载体连接试剂盒(不含多克隆位点)(T4连接酶技术)哪里买

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名称：平末端载体连接试剂盒(不含多克隆位点)(T4连接酶技术)哪里买
产地：国产|进口
品Pai：百奥莱博
规格：20次|40次
本试剂盒是一种先进的自杀基因阳性选择克隆系统，可以GX克隆平末端 PCR 产物和任何具有平末端的DNA 片段。该试剂盒对磷酸化或非磷酸化的 DNA 片段都有效。 阳性选择载体和插入片段连接仅需 5 分钟即可获得超过 90%的阳性重组克隆。由具有校正活性的聚合酶（如：Pfu polymerase）扩增的平末端 PCR 产物可直接连入克隆载体。连接产物可直接转化常用的大肠杆菌菌株。

本试剂盒提供一个新颖的自杀基因阳性选择克隆载体。该载体含有致死的自杀基因，当载体与片段连接成功，自杀基因无法正确表达，包含重组子的细胞可以正常生长；当载体与片段连接不成功，载体自连后自杀基因正确表达，包含自连空载体的细胞无法存活，即“零ZERO”背景。这种阳性筛选策略无需蓝白斑筛选，极大地加速了克隆筛选进程。

本试剂盒载体消除了插入位点附近的多克隆酶切位点，需要在PCR扩增引物上导入合适的酶切位点。此时如果使用PCR扩增引物导入的酶切位点进行DNA酶切时，酶切反应将不会受到T载体上其它多克隆酶切位点上的限制酶影响，可以大大提高酶切效率，增加亚克隆成功率。

试剂盒组份(20次)：
平末端Simple Vector(40ng/μl)——————————20μl
1000bp Control（40ng/μl）-———————————5μl
2×Quick Ligation Buffer-————————————100μl
T4 DNA ligase（5U/μl）—————————————20μl
Forward Sequencing Primer (10μM)————————100μl
Reverse Sequencing Primer (10μM)————————100μl
注：
forward sequencing primer, 23-mer 5’-CGACTCACTATAGGGAGAGCGTC- 3’
reverse sequencing primer, 24-mer 5’-AAGAACATCGCTTTTCGATGGCAG- 3’

储存条件：-20℃，有效期6个月。

本品别名：平末端载体连接试剂盒（不含多克隆位点）(T4连接酶技术)|平末端克隆试剂盒

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青霉素链霉素溶液 Zinc gluconate
ARB13027 小鼠免疫球蛋白A(IgA)Elisa方法检测 Mouse immunoglobulin a,IgA ELISA KIT
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·细胞组织蛋白/DNA/RNA分离提取试剂盒
编号：ALH025
英文名称：Tissue Cells RNA/DNA/Protein Isolation and Extraction Kit
规格：50次
本试剂盒用于快速从同一个动物细胞或者组织样品中同时提取分离基因组DNA和总RNA和Protein。独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA/DNA酶，然后裂解混合物DNA/RNA/Protein同时通过一个基因组DNA吸附柱，基因组DNA被吸附而RNA/Protein穿透滤过。DNA吸附柱上基因组DNA经过一系列漂洗-离心后洗脱得到纯净基因组DNA。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后，RNA在高离序盐状态下选择性吸附于RNA吸附柱上， 再通过一系列快速的漂洗-离心洗脱得到纯净的RNA。滤液经选择性沉淀得到Protein。无*酚、*仿DNA/RNA快速提取技术基础上配合独特的分离技术同时得到的RNA/基因组DNA纯度高，互不干扰。得到的RNA不需要DNase消化，可直接用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。基因组DNA也可以直接用于下游的Southern、酶切、PCR等各种试验。

试剂盒特点：
1.完全不使用有毒的*酚，*仿等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.快速，简捷，单个样品RNA/基因组DNA/Protein分离操作一般可在1小时内完成。
3.试剂盒的独特吸附柱和配方确保有效清除基因组DNA残留，一般情况下得到的RNA不需要DNase消化，可直接用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。
4.多次柱漂洗确保RNA/基因组DNA高纯度，可直接用于下游各种实验。

试剂盒组份(50次)：
裂解液RLT——————————————50ml
去蛋白液RW1—————————————40ml
漂洗液RW——————————————10ml
RNase-free H2O———————————10ml
70%乙醇———————————————9ml RNase-free H2O(DY次使用前按说明加指定量乙醇)
YZ物去除液IR———————————25ml
漂洗液WB——————————————15ml
缓冲液APP——————————————60ml
洗脱缓冲液EB————————————10ml
基因组DNA吸附柱和收集管———————50套
RNA吸附柱和收集管——————————50套

注意事项：
1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 样品处理量JD不要超过基因组吸附柱和和RNA吸附柱处理能力，否则造成DNA残留或者产量降低。不同组织细胞种类RNA/DNA相差极大，例如胸腺DNA含量丰富，超过5mg就会超过柱子处理能力。COS细胞RNA含量丰富，超过3x106细胞就会超过柱子吸附能力。所以开始摸索实验条件时，如果不清楚样品DNA/RNA含量时宁可使用较少的样品处理量，如细胞不超过3-4x106，组织不超过10mg。将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
3. 裂解液RLT 、YZ物去除液IR、去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4. 该试剂盒如需要用于植物样品有其实多糖多酚次级代谢产物丰富的困难样品的DNA/RNA/Protein提取，请咨询技术人员，可能需要用到其它试剂。
5. 关于DNA 的微量残留：
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留（ DNase 消化也无法做到100% 无残留）， 本公司的组织/细胞RNA/DNA/Protein分提试剂盒，由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA分离清除技术，绝大多数DNA 已经被清除，不需要DNase 消化，可直接用于反转录PCR 和荧光定量PCR。个别特殊情况如DNA 含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA 表达量分析荧光定量PCR，我们建议在进行模板和引物的选择时：
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA 中的连接区,这样DNA 就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA 和cDNA 上扩增的产物大小不一样的引物对。
3) 将RNA 提取物用RNase-free 的DNase I 处理以提GX果。本试剂盒还可以用于DNase I 处理后的RNA 清洁(cleanup),请联系我们索取具体操作说明书。
4) 在步骤去蛋白液RW1 漂洗前，直接在吸附柱 上进行DNase I 处理。请联系我们索取具体操作说明书。

储存条件：室温，有效期12个月。

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