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蛋白快速染色液 蛋白质研究

产品信息
  • 特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

    北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括蛋白快速染色液 蛋白质研究在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。


    名称:蛋白快速染色液 蛋白质研究
    规格:500ml
    编号:WE0278
    英文名:FastStain Protein Staining Reagent
    品Pai:百奥莱博
    产地:国产|进口
      本产品采用独特的配方,可对电泳后凝胶上的蛋白质条带进行染色,而对凝胶本底几乎没有着色。染色过程仅需15分钟,染色后几乎不需要脱色。本产品灵敏度高,可检测到15ng BSA蛋白;若实验对检测灵敏度有较高要求,可将凝胶放置在染色液中2小时,可达到ZD灵敏度(BSA:5ng)。

    注意事项
    1、操作时请务必佩戴手套,如溅到皮肤上,请立即用大量水冲洗。
    2、染色前的凝胶洗涤非常重要,否则会造成凝胶染色背景加深。
    3、如染色后有轻微背景,可将染色后的凝胶用过量蒸馏水室温洗涤、脱色。
    4、本产品适用于变性和非变性凝胶电泳后的蛋白染色。

    操作步骤

    I 常规操作步骤
    1、常规PAGE电泳完成后,小心取下凝胶,根据凝胶的大小,将其放置在一个可微波加热的容器中。
    2、加入足量的纯水,使凝胶可以在其中自由晃动,微波加热至沸腾。室温晃动2 min,彻底弃去水。
    3、取20-25ml(以液面刚好覆盖凝胶为宜)凝胶染液加入到纯水洗涤后的凝胶的盒中,使其足以没过凝胶,轻轻晃动。并在微波炉中高火加热至沸腾,取出后室温轻轻摇动,5-10 min后凝胶中的蛋白条带开始显色,15 min后显色基本完成。
    注意:此操作检测的灵敏度为:用BSA检测,灵敏度为15ng。若实验对检测灵敏度有较高要求,可将凝胶放置在染色液中2小时,可达到ZD灵敏度(用BSA检测,灵敏度为5ng)。

    II 快速助染步骤:
    1、常规PAGE电泳完成后,小心取下凝胶,根据凝胶的大小,将其放置在一个可微波加热的容器中。
    2、加入足量的纯水,使凝胶可以在其中自由晃动,微波加热至沸腾。室温晃动2 min,弃去水。
    3、重复步骤2两次。
    4、取20-25ml(以液面刚好覆盖凝胶为宜)凝胶染液加入到含纯水洗涤后的凝胶的盒中,使其足以没过凝胶,轻轻晃动后,微波高火加热至沸腾,取出后置于室温并轻轻晃动,5-10 min后凝胶中的蛋白条带开始显色,15 min后显色完成。
    注意:此操作检测的灵敏度为:用BSA检测,灵敏度为5ng。

    储存条件:室温

    我公司的蛋白快速染色液 蛋白质研究,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:

    ·BaldStar Taq DNA Polymerase
    编号:WE0111
    英文名称:BaldStar Taq DNA Polymerase
    规格:500U|2500U
      BaldStar Taq DNA Polymerase是一种经化学修饰的、全新GX的Taq DNA Polymerase,在常温下酶的活性被完全封闭,使得该酶在低温或常温下没有活性,从而有效避免在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增,酶的激活须在95℃下孵育10分钟。独特的缓冲体系使酶的应用更为广泛,使GC含量高、二级结构复杂以及低拷贝的模板,均能GX扩增。用本品进行PCR扩增,PCR产物3"末端含有A,可直接用于T/A 克隆。本产品特异性强,PCR扩增后无需胶回收去除杂带,可直接用于下游克隆或芯片杂交等实验。主要应用于常规的PCR、RT-PCR、Real-time PCR、多重PCR、基因芯片分析和SNP检测,特别适用于对特异性要求较高的PCR反应。

    产品组成

     
    组份 500 U 2500U
    BaldStar DNA Polymerase,5 U/μl 100μl 5×100μl
    5×BaldStar PCR Buffer 1.9ml 5×1.9ml

    注意:本产品的5×BaldStar Taq PCR Buffer中含有8.5mM*离子。

    活性定义
    用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74℃,30分钟内,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位(U)。

    质量控制
    1、SDS-PAGE检测纯度大于99%;
    2、经检测无外源核酸酶活性;
    3、PCR方法检测无宿主残留DNA;
    4、能有效扩增人基因组中的单拷贝基因;
    5、室温存放一个月,无明显活性改变。

    使用方法
    以下举例为以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

    1、PCR反应体系
    试剂 50μl反应体系 终浓度
    5×BaldStar PCR Buffer 10μl
    dNTP Mix,10 mM each 1μl 200μM each
    Forward Primer,10μM 2μl 0.4μM
    Reverse Primer,10μM 2μl 0.4μM
    Template DNA <0.5μg <0.5μg/50μl
    BaldStar DNA Polymerase,5 U/μl 0.5μl 2.5 U/50μl
    ddH2O up to 50μl  

    注意:引物浓度,请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。

    2、PCR反应条件
    步骤 温度 时间 循环数
    预变性 95℃ 10 min  
    变性 95℃ 30 s 30-40个循环
    退火 55-65℃ 30 s
    延伸 72℃ 60 s
    终延伸 72℃ 5 min  

    注意:
    1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,退火时间一般为30-60 s,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
    2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,本产品中所包含的BaldStar Taq DNA Polymerase的扩增效率为1-2 kb/min。
    3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
    4)本产品须在预变性95℃,10 min条件下实现酶的活化。

    储存条件:-20℃,避免反复冻融。


    蛋白快速染色液 蛋白质研究关键词:WE0278,蛋白快速染色液,FastStain Protein Staining Reagent


    ·生物素标记驴抗小鼠IgG(H+L)
    编号:WE0361
    英文名称:Donkey Anti-Mouse IgG, Biotin Conjugated
    规格:100μl
    本产品为生物素标记的经亲和纯化的驴抗体,特异识别小鼠IgG重链和轻链,检测灵敏度高,本底低。生物素与链霉亲和素具有极高的亲和力,反应呈高度专一性。每个链霉亲和素分子具有4个生物素分子结合位点,因此,链霉亲和素可同时以多价形式结合生物素。生物素化的抗体与辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶标记的链霉亲和素联合使用,将检测信号级联放大,ZH通过显色反应或化学发光可检测到微量蛋白。

    免疫原:小鼠IgG
    缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
    稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
    防腐剂:0.05%叠氮*
    应用范围:
    WB 酶标链霉素检测(1:20000-400000)
    ELISA(1:20000-400000)
    Enzyme Immunohisto/cytochemistry(1:500-5000)
    Flow cytometry(1:200-1000)
    Fluorescence Immunohisto/cytochemistry(1:200-1000)


    蛋白快速染色液 蛋白质研究关键词:WE0278,蛋白快速染色液,FastStain Protein Staining Reagent


    ·Western中分子量蛋白Marker
    编号:WE0292
    英文名称:Western MidiWT Protein Marker
    规格:20次(100μl)
      本品是专门为Western Blot实验设计的分子量标准。由4种不同分子量的蛋白组成(20 kD、35 kD、60 kD、110 kD),这四种蛋白都可与人、小鼠、大鼠、山羊、绵羊、兔的IgG恒定区结合,因此该Marker能与待检抗原在同一张胶片上曝光,阳性信号的分子量大小可以直接通过MidiWT的位置做出准确判断,无需后续图片拼接即可确定目的蛋白。另外该Marker还可以作为Western Blot实验的阳性对照。本产品不经过任何化学修饰,分子量精确,可以准确衡量目的蛋白的分子量大小,推荐上样量为5-10 µl。

    注意事项
    1、本产品可直接使用,不需要加热。
    2、将产品取出后于室温放置融化,务必使其完全融化,否则影响实验结果。
    3、该产品与抗血清或高浓度多克隆抗体一起孵育时可能会出现非特异性条带,此时可降低该Western Blot Marker的上样量至2-5μl。
    4、使用新配制的凝胶,及时更换电泳缓冲液和转膜液,以免影响实验结果。

    操作步骤
    1、将产品取出后于室温放置融化。
    2、温和地充分混匀,取5μl至上样孔中,进行SDS-PAGE电泳。
    3、电泳完毕后将凝胶上蛋白转至NC或PVDF膜,依次孵育一抗、二抗。
    4、孵育完毕并经充分洗涤后,将印迹膜与ECL工作液反应数分钟,使用X-光胶片曝光或化学发光成像。

    实验图例

    12%的聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳后转膜,化学发光法曝光结果。

    储存条件:-20℃保存,避免反复冻融



    北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购蛋白快速染色液 蛋白质研究

    温馨提示:不可用于临床ZL。
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