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实时荧光定量PCR的预混体系(探针法)(低含量ROX校正染料)哪里卖

产品信息
  • 特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

    北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括实时荧光定量PCR的预混体系(探针法)(低含量ROX校正染料)哪里卖在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。

    北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应实时荧光定量PCR的预混体系(探针法)(低含量ROX校正染料)哪里卖,产品信息:

    类别:核酸扩增(PCR)

    英文名:BaldStar TaqMan Mixture(Low ROX)

    产品名 产品编号 包装规格
    实时荧光定量PCR的预混体系(探针法)(低含量ROX校正染料) WE0145 5ml

    品Pai:百奥莱博

    编号:WE0145

    规格:5ml

    产地:国产|进口

      本品是专用于探针法(TaqMan,Molecular Beacon等)实时荧光定量PCR的预混体系,浓度为2×,包含BaldStar Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs和Mg2+,操作简单方便。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后cDNA靶序列检测,如基因表达分析,拷贝数分析,SNP基因型分析等,适用于不同类型探针法荧光定量。本品含有的BaldStar Taq DNA Polymerase是一种经化学修饰的、全新GX热启动酶,在常温下没有聚合酶活性,有效避免了在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增,酶的激活须在95℃下孵育10分钟。独特的PCR缓冲体系与热启动酶的组合,显著提高了PCR的扩增效率,荧光信号更强,灵敏度更高,可以检测单拷贝的模板。使用本产品可以得到更广的线性范围,对目的基因定量更准确。适用于无需ROX作为校正染料的所有荧光定量PCR仪。

     

      ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差,一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同,因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。

    不需要ROX校正的仪器(WE0144):

    Roche LightCycler 480,Roche LightCyler 96,Bio-rad iCyler iQ,iQ5,CFX96等。

    需要Low ROX校正的仪器(WE0145):

    ABI Prism7500/7500 Fast,QuantStudio® 3 System,QuantStudio® 5 System,QuantStudio® 6 Flex System,QuantStudio® 7 Flex System,ViiA 7 system,Stratagene Mx3000/Mx3005P,Corbett Rotor Gene 3000等。

    需要High ROX校正的仪器(WE0146):

    ABI Prism7000/7300/7700/7900,Eppendorf,ABI Step One/Step One Plus等。

     

    产品组成

     

    组份 WE0144-5ml WE0145-5ml WE0146-5ml
    2×BaldStar TaqMan Mixture 5×1ml 5×1ml 5×1ml
    50×Low ROX - 200μl -
    50×High ROX - - 200μl
    ddH2O 5×1ml 5×1ml 5×1ml

     

    注意事项

    1.使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。

    2.避免反复冻融本品,反复冻融可能使产品性能下降。本产品长期保存可置于-20℃,避光。如果在短期内需要频繁使用,可在2~8℃保存。

     

    使用方法

    以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

     

    1、PCR反应体系:

     

     

    试剂 50μl反应体系 终浓度
    2×BaldStar Taq Man Mixture 25μl
    Forward Primer,10μM 1μl 0.2μM
    Reverse Primer,10μM 1μl 0.2μM
    Probe,10μM 1μl 0.2μM
    Template DNA 2μl  
    50×Low ROX or High ROX(可选) 1μl
    ddH2O up to 50μl  

    注意:

    1)通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果,可以在0.1-1.0μM作为设定范围的参考。

    2)使用的探针浓度,与使用的荧光定量PCR仪、探针种类、荧光标记物质种类有关,实际使用时请参照仪器说明书,或各荧光探针的具体使用要求进行浓度的调节。

    3)通常DNA模板的量以10-100ng基因组DNA或1-10ng cDNA为参照,因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同,可对模板进行梯度稀释,以确定ZJ的模板使用量。

    4)不同仪器的激发光学系统有所不同,根据使用荧光定量的仪器选择加入50× Low ROX or 50×High ROX。

     

    2、PCR反应程序:

    注意!本产品预变性反应必须在95℃ 10分钟下完成!

     

    两步法PCR:

     

    步骤 温度 时间 循环数
    预变性 95℃ 10 min  
    变性 95℃ 15 s 35-40个循环
    退火/延伸 60℃ 1 min

    注意:

    1)本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、10 min条件下实现酶的活化。

    2)建议采用两步法PCR反应程序,若因使用Tm值较低的引物等原因,得不到良好的实验结果时,可尝试进行三步法PCR扩增,退火温度请以 56℃-64℃的范围作为设定参考。

     

    储存条件:-20℃,避免反复冻融

    实时荧光定量PCR的预混体系(探针法)(低含量ROX校正染料)哪里卖专业优质供应商:北京百奥莱博科技有限公司

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    实时荧光定量PCR的预混体系(探针法)(低含量ROX校正染料)哪里卖正在火爆,除此之外,为您推荐下别产品:

    编号 类别 名称
    WE0151 核酸扩增(PCR) 快速实时荧光定量PCR的预混体系(荧光探针)
    WE0192 RNA纯化 超纯RNA提取试剂盒
    WE0286 蛋白质研究 SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(4×)
    WE0338 一抗 抗MBP标签单克隆抗体
    WE0384 FITC标记抗体 FITC标记山羊抗兔IgG(H+L)
    WE0247 克隆与表达 TA快速连接试剂盒(pUC-T Simple)(含载体,连接酶)
    WE0190 DNA纯化 通用型柱式DNA提取试剂盒
    WE0185 DNA纯化 血块基因组DNA提取试剂盒
    WE0309 蛋白质研究 TMB底物显色试剂盒(可溶型,20×)
    WE0206 DNA纯化 磁珠法琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒
    WE0308 蛋白质研究 高灵敏度ECL化学发光检测试剂盒
    WE0103 核酸扩增(PCR) Bes Taq DNA Polymerase
    WE0191 RNA纯化 TRIzon试剂(总RNA提取)
    WE0354 一抗 抗β-Actin单克隆抗体
    WE0400 DNA纯化 口腔拭子DNA样本保存管
    WE0100 核酸扩增(PCR) PCR Mix(含染料)(滴瓶装)
    WE0370 HRP标记抗体 HRP标记驴抗鸡IgY(IgG)(H+L)
    WE0403 DNA纯化 尿液DNA样本保存管
    WE0402 DNA纯化 唾液DNA样本保存管
    WE0129 核酸扩增(PCR) 一步法RT-PCR试剂盒
    WE0347 一抗 抗GFP标签多克隆抗体
    WE0363 HRP标记抗体 HRP标记兔抗绵羊IgG(H+L)
    WE0149 核酸扩增(PCR) 一步法逆转录实时荧光定量PCR试剂盒(低含量ROX校正染料)

     

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    温馨提示:不可用于临床ZL。
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