通用型全基因组扩增试剂盒 核酸扩增(PCR)

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百奥莱博专业生产销*(代"售")通用型全基因组扩增试剂盒 核酸扩增(PCR)，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：通用型全基因组扩增试剂盒 核酸扩增(PCR)
编号：BTN100941
规格：30次
产地：国产|进口
本产品是用于基因组DNA扩增全基因组的试剂盒，可以方便、简单、快速、经济的得到稳定产量的基因组DNA扩增样品。

产品特点：
1.基于phi29 DNA聚合酶的高保真性、高合成率和链取代能力。
2.可以扩增基因组达上万倍，具有高产量和高保真性的特点。
3.可使用各种来源的样品，包括全血，干血，发根，口腔粘膜刮液培养细胞，真菌和病毒等。
4. 操作简便快捷，恒温(30℃)反应，无须PCR仪即可实现扩增。
5.产物可用于多种后续试验，包括多重PCR、长片断PCR、定量PCR、克隆、文库构建、单倍型分析、测序、基因芯片分析、各种遗传分析(片段差异，微卫星差异，SNP，STR)等。

试剂盒组成：

 

成分	规格
WGA溶液A	75μl
WGA溶液B	30μl
dNTP(10mM)	20μl
BSA	10μl
超纯水	1ml
Phi 29 DNA聚合酶(10U/μL)	15μl
说明书	1份

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
本产品适用于纯化好的基因组DNA。

1.在PCR塑料管中加入1μL纯化好的基因组DNA，用量在100pg-100ng之间。可以同时做一个不加DNA模板的阴性对照。
2.在PCR管中依次加入2.5μL WGA溶液A，1μL WGA溶液B，超纯水4.3μL，轻柔吹打混合均匀(现在PCR管中总体积为8.8μL)。
3. 95℃保温3～5分钟，室温短暂离心半分钟，然后冰上放置15分钟。
4. 然后依次向上述反应液中加入0.5μL dNTP，0.2μL BSA，0.5μL Phi 29 DNA聚合酶(10U/μL)，轻柔吹打混合均匀。
5. 30℃保温3-12小时。使用PCR仪进行30℃保温并打开热盖保温。如果采用30℃水浴，在样品管中加入30-50μL石蜡油以防水分蒸发，因为30℃长时间的水浴也能使水分蒸发到管壁，从而改变反应体系中各成分的浓度、降低WGA反应效率。如果模板DNA量比较高，WGA三小时即可检测到DNA扩增。
6. 65℃保温10分钟使phi29 DNA聚合酶灭活。注：由于phi29 DNA聚合酶有DNA外切活性，所以将其灭活以免干扰后续反应。
7. 立即取3μL WGA反应液进行电泳检测扩增效果。注意：WGA缓冲液中不含有甘油和电泳染料，所以需要先加上样缓冲液。
8.扩增的DNA可以用于后续试验或冰箱长期保存。

更多有关通用型全基因组扩增试剂盒 核酸扩增(PCR)的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：
BL1408 SYBR Green I(PCR级，10000X)
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ARB10332 人水闸蛋白14(CLDN14)elisa检测说明书 Human claudin 14,cldn14 ELISA KIT
还原辅酶Ⅰ二*盐 Lithium bromide dihydrate 606-68-8
ARB12159 大鼠白介素2(IL-2)含量分析 Rat interleukin 2,IL-2 ELISA KIT
ARB12514 大鼠载脂蛋白H(Apo-H)酶标法分析 Rat apolipoprotein h,apo-h ELISA KIT
L-脯*酸 Beryllon I 147-85-3
68988-92-1 Wright stain  瑞士色素
S-腺甘基蛋*酸 Calcium propionate 17176-17-9
核糖核酸酶YZ剂 Tropaeolin O sodiu*(代"m") salt
ARB10231 人γ干扰素(IFN-γ)酶联免疫定量检测 Human interferon γ ,ifn-γ ELISA KIT
PUC19质粒 Vanillin
F030421 胶体金标记兔抗山羊IgG抗体 Rabbit Anti-Goat IgG*GOLD
铍试剂II Glass Fiber 51550-25-5
ARB11768 人腺相关病毒载体(AAV)代做ELISA实验 Human adeno-associated virus,aav ELISA KIT
BL0964 正常人血清
BTN130865 Hoechst 33342干粉 Hoechst 33342 Powder
HC0071 冻存离心管
ARB12050 大鼠二胺氧化酶(DAO)含量检测 Rat diamine oxidase,dao ELISA KIT
通用型全基因组扩增试剂盒 核酸扩增(PCR)关键词：BTN100941,通用型全基因组扩增试剂盒,Universal Whole Genome Amplification Kit


·柱式藻类RNA大量提取试剂盒
编号：BTN120504
英文名称：Algae RNA Column large-scale extraction kit
规格：5次
本试剂盒是在本公司柱式藻类RNA提取试剂盒(BTN120503)的大提升级产品，跟柱式藻类RNA提取试剂盒相比，它具有下列特点：
1.样品处理量大，最多可以处理50mL液体藻类培养物。
2. 操作简单快捷，整个过程只需要约30分钟。
3. RNA 纯度高，OD260/280一般都在2.0左右，可直接用于RT-PCR、Northern杂交、microarray hybridization、cDNA 合成等。
4. RNA产量高，一般在20-70μg/mL液体藻类培养物(约2.0×107个细胞)。非酶细胞破裂法，适用于各种形态的藻类和各个种属的藻类。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	50ml
溶液C	150ml
溶液D	50ml
大提离心吸附柱	5套
通用洗柱液	100ml
RNA 洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 将50mL液体藻类培养物在塑料离心管中5000-7,000rpm 4℃离心1分钟，并弃尽液体培养基(可以分多次离心)。
2. 加入10mL溶液A并充分吹打混匀。注意：溶液A存放时容易产生沉淀，如果有沉淀，用前请置于65℃融化并充分摇晃均匀。
3. 加入10mL溶液B，剧烈振荡30秒。
4. 65℃保温5分钟。注意：不要超过5分钟，否则RNA 容易降解。
5. 5000-7,000rpm 4℃离心3～5分钟，转移上清到一自备的、干净的50mL塑料离心管中。
6.在上清液中加入2mL自备的*仿，充分振荡30秒混匀。
7. 4℃ 5000-7,000rpm离心3～5分钟，转移上清液到一自备的、干净的50mL塑料离心管中。
8. 加入相当于上清液(约10mL左右)3倍体积的溶液C和1倍体积的溶液D，充分混匀。如果上清为10mL，则加入30mL溶液C和10mL溶液D。
9. 将混合液分多次转移到离心吸附柱中，每次转移后需要室温放置2-3分钟以让RNA跟吸附膜充分结合，然后5000-7,000rpm室温离心30-60秒，弃收集管中的穿透液，然后再加入后一批混合液，重复操作，直到混合液全部挂柱。
10. DY次洗涤：将10mL 通用洗柱液加到离心吸附柱中，室温离心半分钟，弃收集管中的穿透液。
11. 第二次洗涤：一次洗涤一般足够去除杂质，但如果样品OD260/280 比值不高，可以再用10mL 通用洗柱液重复上步洗涤一次。
12.室温离心空柱子(带收集管)半分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会影响RNA的使用。
13. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 50mL塑料离心管中，加入1mL RNA 洗脱液。
14.室温离心半分钟，离心管中溶液即为RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
15. RNA完整性的电泳检测：
注意：普通DNA上样液不含变性剂，更没经过去RNase处理，所以不要用于RNA电泳。
16. RNA产量和纯度产率测定：
将5-10μL RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/细菌用量)。注意不要将RNA 稀释在DEPC 水中检测OD260和OD280，否则光吸收比在TE中测得的低10%-15%；也不要稀释过度，使OD读数在仪器的有效范围之外，这样得到的OD 比值没有意义。

疑难解答：
Q：上样孔里的红色荧光物一定是污染的基因组DNA 吗？
A：不是。用TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳RNA时容易产生此现象，百奥莱博初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA 通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物，加RNase处理后，这些红色荧光物一般会消失。为避免此现象，建议使用甲醛变性胶电泳。如果需要使用非变性胶，也必须在上样前使RNA变性。使用百奥莱博优化的上样/变性/染色三用溶液RNAload可以使RNA在非变性胶上电泳时也有较好分辨率。使用非变性胶时，可以使用TAE或超快电泳液SuperBuffer-2，不要使用TBE缓冲液，因为TBE中的硼*(代"酸")能与RNA的多羟基形成复合物，RNA 很难形成锐利的条带。
Q：如何确认和去处除污染的基因组DNA？
A：如果怀疑有DNA污染，可以用RNase处理RNA样品，然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失，则表示是基因组DNA污染。进一步确认可以使用PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用5分钟柱式DNA 清除剂、非酶的DNA 去除剂DNA Scavenger或RNase-free DNase，由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染，所以必须严格按照厂家提供的使用说明书进行操作。


通用型全基因组扩增试剂盒 核酸扩增(PCR)关键词：BTN100941,通用型全基因组扩增试剂盒,Universal Whole Genome Amplification Kit

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