北京现货免DNA提取PCR试剂盒(细胞组织裂解物直接PCR试剂盒)促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

北京现货免DNA提取PCR试剂盒(细胞组织裂解物直接PCR试剂盒)促销的品Pai：百奥莱博，是优质的核酸扩增(PCR)产品，用于生化研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多免DNA提取PCR试剂盒(细胞组织裂解物直接PCR试剂盒)等核酸扩增(PCR)产品请联系我司咨询订购。

名称：北京现货免DNA提取PCR试剂盒(细胞组织裂解物直接PCR试剂盒)促销
品Pai：百奥莱博
规格：100次
英文名：Cell Lysate PCR Mix
编号：BTN130985
本产品是可以直接用新鲜的动物、植物、细菌样品的裂解液进行PCR扩增的试剂盒。

产品特点：
1. 操作简单，免去DNA提取、蛋白去除、RNA去除等步骤，5分钟即得用于PCR的模板。
2. 兼容性广，可以用于几乎所有的分子生物学样品，包括细菌、昆虫、真菌、各种植物、各种动物、法医样品(包括全血液、血痕、精斑、唾液、毛发、组织样品、口腔细胞和FTA卡)、石蜡组织切片等。
3. 提供离心管专用研磨杵，便于处理棘手样品。
4. 环保健康，不使用任何有毒有害的试剂。
5. 尤其适用于大规模育种筛选和临床筛选。
6. 本试剂盒可以处理100份不同的样品，足够100次PCR实验。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	12ml
溶液B	12ml
PCR MagicMix 3.0	1ml
研磨杵	100只
说明书	1份

储存条件：溶液A、溶液B和离心管专用研磨杵可以常温和放置，PCR MagicMix 3.0需要低温运输、-20℃保存。有效期一年。

使用方法：
1. 首次使用本产品时需要详细检查溶液A和溶液B是否有结晶析出。如果有需要37℃溶解后摇晃均匀待用。未用完部分可以放常温保存。
2. 根据材料不同参考下表取少量样品到1.5mL塑料离心管中。

样品种类	取样量
动物组织	1-5mg
鼠尾	2mm长
血液样品	不超过20μl
植物叶片	1-5mg
植物种子(去皮)	1-5mg
酵母培养物	0.2-0.5mL培养物沉淀
细菌培养物	0.2-0.5mL培养物沉淀

注意：未列出样品，用户需要自己摸索ZJ用量。对富含多醌多酚的植物材料(如棉花)，组织使用量不要超过0.5mg。
3. 加入100μl溶液，确保溶液A完全将样品淹埋。
4. 用研磨杵小心将样品在离心管内捣碎。血液一般情况捣碎30秒即可；实体组织需要捣碎到溶液的颜色变浑浊(植物叶片的话，溶液的颜色将变成绿色)。如需更多研磨杵，可从我司另购。对棘手的样品，还可以增加95℃保温10-60分钟一步，待温度冷却到室温后再进入下一步。残留的实体组织碎片不会影响后续试验。
5. 加入100μL溶液B，震荡10秒混匀。
6. 常温12000rpm离心2分钟。
7. 将上清液转移到一个干净的1.5mL离心管中。如果不用，可以放-80℃长期保存。如果用于后续PCR，请直接进入下步。
8. 直接用裂解液作为模板设置30μl体系的PCR反应体系如下：

成分	用量
PCR MagicMix 3.0	15μl
细胞裂解液(来于上步)	1-5μl
自备PCR引物1(10uM)	1μl
自备PCR引物2(10uM)	1μl
补水到	30μl

注意：裂解液体积不要超过PCR体积的1/10。如果需要增加模板的加入量，则PCR体系应该相应的增加。如果加入5μL裂解液，则可以使用50μL的PCR体系。
9. 放入PCR仪中进行PCR,PCR参数需要根据引物Tm值和靶分子长度等参数设置。一般不低于35次循环。
10. PCR结束后取5-10μL直接上样电泳(本产品不需要上样液)，红色染料电泳速度相当于50bp DNA片段。

注意事项：
1．如果反应体系不是30μl，各成分需要等按比例增加或减少。
2．如果细胞裂解液中有不明PCRYZ物(植物、土壤和血液等DNA样品常含此类YZ物)，可以在PCR体系中加入1/10的PCRYZ物清除剂(BTN60804，30μL体系中加3μL)，可能会对PCR有帮助。

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·植物RNA柱式提取试剂盒
编号：BTN71203
英文名称：Plant RNA Column extraction kit
规格：50次
本试剂盒是植物RNA提取试剂盒(BTN3080)的柱式升级产品，它结合了BTN3080GX性(其效果在近五十多种各类植物中得到验证，植物名单见BTN3080产品介绍的附录)和百奥莱博柱式纯化系列产品的快捷性。

试剂盒特点：
1. 操作更加简单快速，处理一个样品只需要约十分钟，比植物RNA提取试剂盒快一倍。
2. RNA纯度更高，平均 OD260/280一般都在2.0左右，能够有效去除大多数植物中的多糖污染。
3.小RNA回收效率更高。
4.适用于所有用植物RNA提取试剂盒能提出RNA的植物(注:对有些植物可能需要在溶液A中额外添加RVC)。
5. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA合成等实验。
6. 性价比高于进口的柱式植物RNA提取产品。
7.一站式，提供RNase-free的样品收集管。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	15ml
溶液C	50ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
RNA洗脱液	10ml
说明书	1份

注：溶液B为淡黄色液体，使用前请观察颜色是否正常。若溶液B有油粒状颗粒及分层，属正常现象，不影响使用。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 估算组织细胞的用量。每次微量提取一般需要100-200mg植物叶片、或50-100mg植物种子、或200-500mg植物果实。
2. 先将新鲜植物组织剪切成小块(保存在RNAhold中的植物组织需用纸吸去RNAhold液体后再剪切成小块)，放入10-15mL塑料离心管中，加入1mL溶液A，然后用匀浆器匀浆5-20秒。匀浆时会产生泡沫，但不影响提取效果。也可以使用液氮砚磨法破碎植物组织，砚磨完后加入1mL溶液A。注意：溶解溶液A沉淀。溶液A在4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3. 将匀浆物或砚磨物转移至干净的1.5mL塑料离心管中(可以不必转移非液体的细胞碎片)。有的植物组织(比如果实)含有大量水份，匀浆液会多于1mL，转移时也只取1mL。
4.在离心管中加入0.3mL的溶液B和0.2mL自备*仿，在振荡器上振荡30秒混匀，此时溶液呈均匀的乳浊状。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
5.室温12000～15000g离心3～5分钟，两相间将有约5-10毫米厚的细胞破碎物。
6. 将上清液(约0.6mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中，下层有机相和中间层含有DNA、蛋白质和其他杂质，避免触及或吸取。留下100μL上清液不取。
7. 加入等体积的溶液C，充分颠倒混匀。如果有沉淀产生(对某些植物，属于正常现象)，千万不要去掉沉淀，一定要把所有的混合物上柱。
8. 将一半的溶液(如果有沉淀，则先混匀)转移到离心吸附柱中，13000-15000g室温离心半分钟，弃穿透液。
9. 将剩下的一半溶液(如果有沉淀，则先混匀)转移到同一离心吸附柱中，13000-15000g室温离心半分钟，弃穿透液。
10. 加0.7mL通用洗柱液，室温离心半分钟，弃穿透液。再加0.3mL通用洗柱液，室温离心半分钟，弃穿透液。一般样品如此洗涤两次即可，但如果在第7步加入溶液C后有沉淀产生，则需要洗三次，每次加入的通用洗涤液的量分别为0.4、0.3和0.3mL。
11.室温离心半分钟。此步十分重要，否则残留的乙醇会影响RNA的使用。
12. 将离心吸附柱转移到RNase-free收集管中，加入50-100μl RNA洗脱液，室温放置1-2分钟。
13. 13000-15000g室温离心半分钟，离心管中溶液即为RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
14. RNA完整性的电泳检测：如果需要做Northern杂交，强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳，因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques，28：414，2000)。
15. RNA产量产率测定：将5-10μl RNA溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
16. RNA纯度测定：无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染，但一般不影响RT-PCR等反应。


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·糖蛋白染色试剂盒
编号：BTN131075
英文名称：Staining Kit for Glycoprotein
规格：10次
本产品为在SDS-PAGE凝胶或蛋白免疫印记硝酸纤维素膜上检测糖蛋白的试剂盒。该方法使用三种试剂，所需时间仅需不到两小时，而其他的染色方法需要四到五小时。染色后的糖蛋白为品红色条带，背景为浅粉色或者无色。

产品特点：
1．包括一种阳性对照蛋白及一种阴性对照蛋白。
2．简洁、易储存的试剂盒。
3．本产品足够10张mini-PAGE胶或20张8×8cm蛋白免疫印记硝酸纤维素膜染色。

产品组成：

成分	规格
氧化试剂	2.5g
糖蛋白染色试剂	250ml
还原试剂	1.25g
阳性对照(辣根过氧化物酶)	1mg
阴性对照(大豆胰蛋白酶YZ剂)	1mg
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

自备试剂：0.9%NaCl溶液或PBS缓冲液、BCA工作液。

使用方法：

实验前准备
1．配制3%乙酸溶液：将30mL冰醋酸与970mL超纯水混匀，室温保存备用。
2．配制50%甲醇溶液：将250mL甲醇与250mL超纯水混匀，室温保存备用。
3．配制氧化试剂：向氧化试剂干粉中加入250mL的3%乙酸溶液，充分混匀溶解后得到氧化试剂溶液，室温保存备用。
4．配制还原试剂：向还原试剂干粉中加入250mL的超纯水，充分混匀溶解后得到还原试剂溶液，室温保存备用。
5．配制阳性对照(辣根过氧化物酶)：向1mg固体中加入0.5mL超纯水，使得溶液浓度为2mg/mL。用SDS-PAGE上样缓冲液将溶液稀释到终浓度为1mg/mL。对于80mm×80mm的凝胶来说，每个泳道加5到10μl的阳性对照。将配制好的阳性对照分装后-20℃保存。
6．配制阴性对照(大豆胰蛋白酶YZ剂)：向1mg固体中加入0.5mL超纯水，使得溶液浓度为2mg/mL。用SDS-PAGE上样缓冲液将溶液稀释到终浓度为1mg/mL。对于80 mm×80 mm的凝胶来说，每个泳道加5到10μl的阴性对照。将配制好的阴性对照分装后-20℃保存。
7．样品稀释：用SDS-PAGE上样缓冲液将样品浓度稀释为1mg/mL，对于80mm×80mm的凝胶来说，每个泳道加5到10μl的样品。

凝胶染色的操作步骤(注意:请在通风橱中进行以下操作)
1．取出电泳后的SDS-PAGE凝胶，加入到100mL 50%甲醇溶液中，完全浸泡30分钟后，倒出甲醇溶液。
2．用100mL 3%乙酸溶液洗涤胶块两次，每次轻轻振荡10分钟。
 注：如有需要，此步的胶块可在超纯水中4℃过夜处理。
3．将胶块转移到25mL氧化试剂中，轻轻振荡15分钟。
4．用100mL 3%乙酸溶液洗涤胶块3次，每次轻轻振荡5分钟。
5．将胶块转移到25mL糖蛋白染色试剂中，轻轻振荡15分钟。
 注：若染色试剂中有晶体析出，只需离心取上清液去除晶体即可，不要加热来溶解晶体。
6．将胶块转移到25mL还原试剂中，轻轻振荡5分钟。
7．用3%乙酸溶液洗涤胶块，然后用超纯水洗涤至显色，糖蛋白将显现为品红条带。胶块保存在3%乙酸溶液中。

硝化纤维素膜染色的操作步骤(注意:请在通风橱中进行以下操作)
1．用20mL 3%乙酸溶液洗涤膜两次，每次轻轻振荡10分钟。
2．将膜转移到10mL的氧化试剂中，轻轻振荡15分钟。
3．用10mL 3%乙酸溶液洗涤膜3次，每次轻轻振荡5分钟。
4．将膜转移到10mL的糖蛋白染色试剂中，轻轻振荡15分钟。(注：若染色试剂中有晶体析出，只需离心取上清液去除晶体即可，不要加热来溶解晶体。)
5．将膜转移到10mL还原试剂中，轻轻振荡5分钟。
6．用3%乙酸溶液洗涤膜，然后用超纯水洗涤至显色，糖蛋白将显现为品红条带。膜可保存在3%乙酸溶液中。


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