HIF-1-Luc报告基因慢病毒颗粒 报告基因检测

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名称：HIF-1-Luc报告基因慢病毒颗粒 报告基因检测
编号：SY0148
英文名：Lentivirus HIF-1 Luciferase Reporter
产地：国产|进口
品Pai：百奥莱博
HIF-1报告基因慢病毒是用于检测HIF-1转录活性水平为目的的报告基因慢病毒颗粒。HIF-1(hypoxia-inducible factor-1)是氧平衡有关的关键蛋白，并且在癌症的发展以及在心血管疾病中有着显著作用。

HIF-1报告基因慢病毒主要用于检测细胞中细胞中Hypoxia信号通路、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGMLV-HIF-1-Lu是在pGMLV-Lu慢病毒载体的多克隆位点插入了多个HIF-1结合位点，可以高灵敏度地检测HIF-1的激活水平。采用慢病毒作为报告基因的优点在于它能够感染多种难感染的细胞，比如原代细胞，干细胞，神经元细胞等。而且慢病毒能够将外源基因插入细胞基因组内，实现稳定转染。

质粒图谱



使用说明
HIF-1报告基因慢病毒颗粒采用慢病毒转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。

注意事项
1）病毒操作时使用生物安全柜，如使用普通超净工作台操作病毒，请不要打开风机。
2）病毒操作时请穿实验服，带口罩和乳胶手套。
3）操作病毒时必须特别小心，不要产生气雾或飞溅。如操作时超净台有病毒污染，立即用10%次*酸*溶液搽拭干净。接触过病毒的枪头、离心管和培养板等需用10%次*酸*溶液浸泡1h以上后弃去。
4）用显微镜观察细胞感染情况时应遵从以下步骤：拧紧培养瓶或盖紧培养板。用70%乙醇清理培养瓶外壁后到显微镜处观察拍照。离开显微镜试验台前，用70%乙醇清理实验台。
5）病毒操作完成后，用肥皂清洗双手。
6）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存条件：-80℃。

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·D-荧光素*盐
编号：SY0232
英文名称：D-Luciferin, Potassium Salt
规格：100mg
D-荧光素（D-Luciferin）是荧光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍用于整个生物技术领域，特别是体内活体成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下，荧光素（底物）能够被氧化发光。当荧光素过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性（见下图）。将携带荧光素酶编码基因（Luc）的质粒转染入细胞后，导入研究动物如大小鼠体内，之后注入荧光素，通过生物发光成像技术（BLI）来检测光强度变化，从而实时监测疾病发展状态或药物的ZL功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响，根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。



D-荧光素也常用于体外研究，包括荧光素酶和ATP水平分析；报告基因分析；高通量测序和各种污染检测。目前市场上有三种产品形式，D-荧光素（游离酸），D-荧光素*盐，以及D-荧光素*盐。这三种产品主要的差别在于溶解特性上。D-荧光素（游离酸）水溶性以及缓冲体系的溶解性都很弱，除非溶于弱碱如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇（10 mg/ml）和DMSO（50 mg/ml）。但*盐和*盐形式的D-荧光素能够非常容易且快速的溶入水或者缓冲液中，使用方便，溶剂无毒性，特别适合体内实验。配成液体后的这三种产品，在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。

中文别名	D-荧光素*盐；
英文别名	(S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid potassiu*(代"m") salt; D-Luciferin firefly, potassiu*(代"m") salt;
CAS号	115144-35-9
分子式	C11H7N2O3S2 K
分子量	318.42 g/mol
外观	淡黄色粉末
溶解性	溶于水（60 mg/ml）
纯度	＞99%

储存条件：-20℃。


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·25×TAE预混粉末
编号：SY0262
英文名称：25×TAE Premixed Powder
规格：1pk
TAE即Tris acetate-EDTA buffer，是常用的DNA电泳缓冲液。
25×TAE Premixed Powder（预混粉末）可以配制40L 1×TAE工作液。使用时，可先用蒸馏水配制1L 25×TAE浓缩液。

产品组分
1×TAE工作液中含有40 mM Tris base，40 mM Acetate和1mM EDTA，pH8.2-8.4 (25 ℃)。

运输与保存方法
室温运输。18~25℃干燥储存。

注意事项
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

·脂质体核酸转染试剂
编号：SY0603
英文名称：Liposome nucleic acid transfection reagent
规格：0.5ml
脂质体核酸转染试剂是一种多用途的脂质体转染试剂，适用于DNA、RNA和寡核苷酸的转染，对大多数真核细胞具有很高的转染效率。其独特的配方使其可直接加入培养基中，血清的存在不会影响转染效率，这样可以减少去除血清对细胞的损伤。转染后不需要除去核酸-复合物或更换新鲜培养基，也可在4～6小时后除去。

以无菌的液体形式提供。通常情况下对于 24 孔板转染，每次用1.5μl左右，则1ml 约可做660 次转染；对于6孔板，每次用6μl左右，则1ml 约可做160 次转染；

储存条件：4℃，有效期一年。

注意事项

1）脂质体核酸转染试剂要求细胞铺板密度较高，以90%-95%为佳，这有助于减少阳离子脂质体细胞毒性造成的影响；如果你研究的基因要求比较长的表达时间，比如细胞周期相关基因，或者细胞表面蛋白，选择细胞铺板密度要求较低的转染试剂，不适合用脂质体核酸转染试剂。
2）脂质体核酸转染试剂可用于有血清培养基的转染，并且转染前后不需要换培养基。但是，制备转染复合物时要求用无血清培养基稀释DNA和转染试剂，因为血清会影响复合物的形成。另外，要检测所用的无血清培养基与脂质体核酸转染试剂的相容性，已知CD293, SFMII, VP-SFM 就不相容。
3）转染的时候培养基中不能添加抗生素。
4）使用高纯度的DNA或RNA有助于获得较高的转染效率，质粒中的内毒素是转染的大敌。
5）阳离子脂质体应该在4度保存，要注意避免多次反复长时间开盖，因为可能会导致脂质体氧化而影响转染效率。
6）初次使用应优化DNA浓度和阳离子脂质体试剂量以得到ZD的转染效率。DNA 和转染试剂的比例，通常推荐是1:2-1:3，比如24孔板内接种0.5-2×105个细胞，使用0.5 µg DNA和1-1.5 µl 转染试剂。通过调整DNA/脂质体核酸转染试剂比例优化转染效率，保证细胞密度大于90%，DNA（μg）: （μl）比值在1：0.5-1：5。

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