福林酚试剂100mL说明书注意事项:
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响DY链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
福林酚试剂100mL说明书详细介绍:
福林酚试剂100mL说明书技术优势
1. 能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如: 真细菌孢子(eubacterial spores)、内芽孢(endospores)、格兰仕阳性菌(gram positive bacteria)、酵母(yeast)、线虫(nematodes)、海藻(algea)、真菌(fungi)等。
2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸,并ZD限度的降低RNA污染。
3. 基于硅珠的纯化方法,可有效地去除腐植酸、多元酚等PCRYZ物
4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切等后续实验之中。
5. 对腐植酸含量特别高的样品,附加额外的处理方法。
福林酚试剂100mL说明书操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml氯仿,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
9. 用75℅乙醇洗涤RNA沉淀。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75℅乙醇。2-8℃不超过7500×g离心5分钟,弃上清。
10.室温放置干燥或真空抽干RNA沉淀,大约晾5-10分钟即可.不要真空离心干燥,过于干燥会导致RNA的溶解性大大降低。加入25-200μl无RNase的水或0.5℅SDS,用枪头吸打几次,55-60℃放置10分钟使RNA溶解.如RNA用于酶切反应,勿使用SDS溶液。RNA也可用100℅的去离子甲酰胺溶解,-70℃保存。
12(S)-HEPE (100 ug) 12S-hydroxy-5Z,8Z,10E,14Z,17Z-eicosapentaenoic acid; 12(S)-HEPE
5(S)-HETrE (250 ug) 5S-hydroxy-6E,8Z,11Z-eicosatrienoic acid; 5(S)-HETrE
Acetic Anhydride (1 ea) Acetic Anhydride
Prostaglandin D2 Express EIA Monoclonal Antibody (500 dtn) Prostaglandin D2 Express EIA Monoclonal Antibody
13(S)-HpOTrE (5 mg) 13S-hydroperoxy-9Z,11E,15Z-octadecatrienoic acid; 13(S)-HpOTrE
Nonidet P-40 Assay Reagent (10%) (500 ul) Nonidet P-40 Assay Reagent (10%)
Saline Sodium Citrate Stock Solution (10X, pH 7。0) (250 mL) SSC Buffer; Saline Sodium Citrate Stock Solution (10X, pH 7。0)
Pyrrolidino PAF C-16 (10 mg) 1-O-hexadecyl-2-O-acetyl-sn-glyceryl-3-phosphoryl-N-methyl-pyrrolidinium ethanol; Pyrrolidino PAF C-16
Sphingosine-1-Phosphate (1 mg) 2S-amino-1-(dihydrogen phosphate)-4E-octadecene-1,3R-diol; S1P|Sphingosine-1-Phosphoric Acid; Sphingosine-1-Phosphate
LSD1 (human recombinant) Assay Reagent (1 ea) LSD1 (human recombinant)|Lysine-Specific Demethylase 1 Assay (human recombinant); LSD1 (human recombinant) Assay Reagent
JMJ Control Peptide (200 ul) JMJ Control Peptide
CAY10404 (5 mg) 3-[4-(methylsulfonyl)phenyl]-4-phenyl-5-(trifluoromethyl)-isoxazole; CAY10404
Meclofenamate (sodium salt) (1 g) 2-[(2,6-dichloro-3-methylphenyl)amino]-benzoic acid, monosodium salt; Meclofenamate (sodium salt)
GW 9662 (1 mg) 2-chloro-5-nitrobenzanilide; GW 9662
MS-PPOH (5 mg) N-(methylsulfonyl)-2-(2-propynyloxy)-benzenehexanamide; MS-PPOH
Curcumin (technical grade) (50 g) 1,7-bis(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-1E,6E-heptadiene-3,5-dione; Indian Saffron|Turmeric yellow; Curcumin (technical grade)
S-Nitroso-L-glutathione (100 mg) N-(N-L-。gamma。-glutamyl-S-nitroso-L-cysteinyl)-glycine; GSNO; S-Nitroso-L-glutathione
7(Z)-Tricosene (1 mg) 7Z-tricosene; 7(Z)-Tricosene RA, 大鼠星形胶质细胞
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
链霉菌 Streptomyces sp.
AllIP/Co-IP Kit(Rabbit/Human/Rat/Mouse)通用型免疫沉淀试剂盒(兔/人/大鼠/小鼠)50次50次
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
柱孢绿僵菌 Metarhizium eylindrosporae
福林酚试剂100mL说明书人肺腺细胞英文名称:NCI-H1975
EC109,人食管细胞 Human
鼠李糖杆菌 Lactobacillus rhamnosus
苏云金芽孢杆菌 Bacillus thuringiensis
RT4(人膀胱移行细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×2
婴儿双歧杆菌 Bifidobacterium infantis
浅玫瑰链霉菌 Streptomyces roseolus
狗肾细胞英文名称:MDCK
大鼠主动脉平滑肌细胞 Rattus
凝结芽孢杆菌 Bacillus coagulans
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
福林酚试剂100mL说明书公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列,5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
温馨提示:不可用于临床ZL。