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人急性非B非T淋巴细胞性白血病细胞;Reh操作步骤

产品信息
  • 细胞名称     人急性非BT淋巴细胞性白血病细胞;Reh操作步骤
    形态特性    淋巴母细胞
    生长特性   悬浮生长
    特征特性    CD3 A (17%) B (17%) C (20%), CD4 (15%), CD10 (55%) 
    培养条件     RPMI 1640 (w/o Hepes) 优质胎牛血清,10%
    传代方法    1:2。3天内可长满。 
    传代情况    PN5
    冻存条件     完全培养基+8%DMSO
    支原体检测   阴性
    STR     
    同工酶
    染色体
    使用权限 A类
    使用方法
    售后:收到细胞后7天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时传真致销售人员,我们将尽快为您解决。
    人急性非BT淋巴细胞性白血病细胞;Reh操作步骤收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
    1. 取出25cm2 培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中
    静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。
    2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
    3. 细胞传代
    1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
    2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中,37℃温浴3min左右;倒置显微镜下
    观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入完全培养液终止消化;
    3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全
    培养基至5mL,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中培养;
    4) 待细胞完全贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。
    人急性非BT淋巴细胞性白血病细胞;Reh操作步骤分裂图展示图:​

    人急性非BT淋巴细胞性白血病细胞;Reh操作步骤操作步骤:
    1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
    2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
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