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北京现货SABC免疫组化试剂盒(小鼠/兔IgG)(DAB显色)怎么卖

产品信息
  • 特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产供应北京现货SABC免疫组化试剂盒(小鼠/兔IgG)(DAB显色)怎么卖,我公司销*(代"售")高质量、高纯度的生化试剂,同时价格极具竞争力,满心期待您的咨询订购。


    名称:北京现货SABC免疫组化试剂盒(小鼠/兔IgG)(DAB显色)怎么卖
    品Pai:百奥莱博
    编号:QN1223
    产地:国产|进口
    英文名:SABC(Mouse/Rabbit IgG)-POD Kit
    规格:100T-200T
    本试剂盒适合于一抗为小鼠/兔IgG的免疫组化实验,DAB显色。

    试剂盒组份:
    封闭液(5% BSA)——————————10ml
    3% H2O2-—————————————10ml
    Bio-羊抗小鼠/兔IgG浓缩液—————200ul
    SABC-POD浓缩液——————————100ul
    稀释液——————————————30ml
    20×DAB显色液A——————————1ml
    20×DAB显色液B——————————1ml

    SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的,用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质,同亲和素一样,对生物素有极高的亲和力,亲和素是一个碱性蛋白质(IP=10),经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性,对组织和细胞的非特异吸附很低,基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex,SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶将保证SABC具有很高的敏感性。

    操作步骤:(以石蜡切片为例)
    1. 切片常规脱蜡至水(三次二甲*,三次乙醇)。
    2. 3% H2O2室温处理5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
    3. 可选步聚:
    a、热修复抗原,将切片浸入0.01M柠檬酸*缓冲液(PH6.0),电炉或微波炉加热至沸腾 后断电,间隔5-10分钟后,反复1-2次。冷却后PBS(pH7.2-7.6)洗涤1-2次。
    b、酶消化,滴加消化液,37℃10分钟,PBS(pH7.2-7.4)洗涤2-3次。
    c、跳过此步,直接进入下一步。
    4. 滴加5% BSA封闭液,室温20分钟。甩去多余液体, 免洗。
    5. 用稀释液将一抗按一定比例稀释(稀释后的一抗4℃可保存一周),也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗37℃ 孵育1小时左右或20℃ 2小时左右,也可4℃过夜。PBS(pH7.2-7.4)洗涤3次,每次2分钟(一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说,阳性染色强度不够时,可提高一抗浓度和延长孵育时间;背景过高时,可降低一抗浓度和缩短孵育时间)。
    6. 根据用量,用稀释液将Bio-羊抗小鼠/兔IgG浓缩液按1:50-100稀释成工作液(1ml稀释液加入10-20ul Bio-羊抗小鼠/兔IgG浓缩液混匀,此工作液4℃可保存一周)。滴加Bio-羊抗小鼠/兔IgG工作液,20-37℃ 孵育30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗涤3次,每次2分钟。
    7. 根据使用量,用稀释液将SABC-POD浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-POD浓缩液混匀,此工作液4℃可保存一周)。滴加SABC-POD工作液,20-37℃,30分钟。PBS (pH7.2-7.4)洗涤4次,每次5分钟。
    8. DAB显色:根据用量,用PBS(pH7.2-7.4)配制,按1ml PBS加入50ul 20×DAB显色液A,加入50ul 20×DAB显色液B 。充分混匀后滴加到切片上。室温显色,镜下控制反应时间,一般在5-30分钟之间。蒸馏水洗涤终止反应。
    9. 苏木素轻度复染。脱水,透明,封片。显微镜观察。

    对于细胞爬片,固定后,PBS漂洗两次,再用0.5% Triton X-100室温孵育20分钟,PBS漂洗两次,3% H2O2处理15分钟;PBS漂洗两次,接上述第4步。
    对于冰冻切片,固定后,PBS漂洗两次,接上述第二步。

    注意事项:如果染色背景过高,在SABC反应之后,DAB显色之前,用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次,PBS洗2次,然后DAB显色。

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    ·质粒大量提取试剂盒
    编号:QN0903
    英文名称:Plasmid Extraction Maxi Kit
    规格:10T
    本试剂盒采用碱裂解法裂解细胞,根据离心吸附柱在高盐状态下特异性地结合溶液中的DNA的原理特异性提取质粒DNA。 离心吸附柱中采用的硅基质材料能GX、专一地吸附DNA,可ZD限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物,一般从50-100ml大肠杆菌LB培养液中,可快速提取200-300μg高纯度高拷贝的质粒DNA,提取率达85-90%。 使用本试剂盒提取的质粒DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、连接和转化等试验。

    使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶体上的标签。溶液Ⅰ在使用前先加入RNaseA(将试剂盒中提供的 RNaseA 全部加入),混匀,置于 2~8℃保存。如非指明,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

    ·胰蛋白酶-EDTA消化液(不含酚红)
    编号:QN0477
    英文名称:Trypsin-EDTA solution,0.25% (without phenol red)
    规格:100ml|100ml*20
    本消化液含0.25%胰酶和0.02%EDTA(0.53mM),溶于无**平衡盐溶液中,经过滤CJ,可以直接用于培养细胞和组织的消化。本产品具有方便快速、稳定安全、细胞状态好等特点。

    别名:胰酶;胰蛋白酶
    CAS号:9002-07-7
    分子式:C6H15O12P3
    分子量:24000
    储存条件:-20℃,有效期12个月。

    在组织细胞的体外培养和原代细胞培养中的组织细胞分散(将组织块制备成单个细胞悬液)以及传代细胞培养中,贴壁生长细胞的消化分散均要使用组织细胞消化液。常用的消化液为胰蛋白酶,EDTA等,其功能主要是使细胞间的蛋白质(如细胞外基质)水解,使组织或贴壁细胞分散成单个细胞,制成细胞悬液用于进一步的实验。

    使用方法:
    1. 贴壁细胞的消化:
    a) 吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
    b) 加入少量胰蛋白酶消化液,盖过细胞即可,室温放置1-2分钟。不同的细胞消化时间有所不同,对于贴壁牢固的细胞可适当延长消化时间。
    c) 显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除消化液。加入含血清的细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
    d) 如果发现消化不足,可加入胰蛋白酶消化液重新消化。
    e) 如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
    2. 组织的消化:
    不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。

    注意事项:
    1.由于组织或细胞性质不同,实验人员应依据具体情况,确定ZJ消化时间;消化细胞时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁和生长状况;
    2.本产品不含YJ剂,在使用过程中要特别注意无菌操作,避免消化液被微生物污染;
    3.不宜4℃长期保存,切忌反复冻融,小量使用时建议分装冻存;
    4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


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