北京现货DAPI染液(即用型)厂家直销
- 品牌:百奥莱博
- 型号:28718-90-3
- 产地:北京
- 供应商:北京百奥莱博科技有限公司
- 供应商报价:¥180 - 1590
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特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应北京现货DAPI染液(即用型)厂家直销,我公司销*(代"售")全品类的细胞生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京现货DAPI染液(即用型)厂家直销
英文名:DAPI Dying Solution
编号:SY0496
品Pai:百奥莱博
规格:10ml
本产品浓度已经过优化,确保可以满足各种常规染色的需要。如需使用特定浓度的DAPI,请选购DAPI(SY0495)或DAPI染液(5mg/ml)(SY0496)。
DAPI,也称DAPI dihydrochloride,是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光。和EB(ethidium bromide)相比,对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。因为DAPI是含有特定AT序列DNA的一种嵌入剂,它能像Hoechst染料一样粘附在DNA双螺旋的小沟区。尽管DAPI不能通过活细胞膜,但却能穿透扰乱的细胞膜而对核染色。DAPI具有很高的光漂白承受水平,能用来检测酵母线粒体DNA,叶绿体DNA,病毒DNA,microplasm DNA以及染色体DNA。DAPI-DNA复合物的激发和发射波长分别为360nm和460nm。
DAPI染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。
CAS:28718-90-3
分子式:C16H17Cl2N5
分子量:350.25
储存条件:4℃,有效期六个月
注意事项
1)DAPI对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
2)荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
3)为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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·X-Gal
编号:SY0275
规格:1g
X-Gal常用于β-半乳糖苷酶的原位染色检测以及蓝白斑筛选。X-Gal是β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)的显色底物,在β-半乳糖苷酶的催化下会产生蓝色产物。基于这个特点,当pUC系列载体DNA以lacZ 缺欠细胞作为宿主进行转化时,或M13噬菌体载体DNA进行转染时,如果在培养基中加入X-Gal和IPTG,由于β–半乳糖苷酶的α–互补性,可以根据是否呈现白色而方便地挑选择出基因重组体。
·淋巴细胞分离液1.077
编号:SY0532
英文名称:Lymphocyte Separation Medium 1.077
规格:100ml
淋巴细胞分离液(Lymphocyte Separation Medium,简称LSM)是一种无菌的即用型分离液,基于Böyum的Ficoll-甲泛影*溶液做过一些改良,使得操作简单快速且分离效率更高。每100 ml淋巴细胞分离液中含有6.2 g 聚蔗糖(Ficoll)和9.4 g 泛影酸*,20℃下的密度为1.0770-1.0800 g/ml。不仅适用于外周血淋巴细胞,也可分离其他组织来源的淋巴细胞,包括脐带血和细胞。
工作原理
去纤维蛋白或肝素化人血以1:1的比例用生理盐水或平衡盐溶液稀释,加在分离液上层,之后低速离心30 min。在离心过程中,差速迁移使其ZZ形成几个细胞分层。聚集在管底的颗粒主要是红细胞和多形核粒细胞,通过梯度迁移至管底。根据其密度的大小,淋巴细胞和其他单个核细胞如单核细胞,以及血小板分布在血浆和LSM两层之间。淋巴细胞可以通过吸取分界层溶液回收,并通过进一步清洗来去除血小板,LSM和血浆。
操作方法
注:此操作流程适用于去纤维蛋白或抗凝血剂处理过的人血。对于其他物种或者其他组织的血液,可能需要对此步骤做出一定的改进。
1)轻轻颠倒瓶子使LSM充分混合;
2)无菌条件转移3 ml LSM到15 ml离心管中;
3)用2 ml 生理盐水混合2 ml去纤维蛋白血液或肝素化血液;
4)小心将稀释血液加入3 ml LSM(室温即可)的上层,使得在血液和LSM间形成一个明显的分层。不要将稀释血液混入LSM中;
5)室温下400g离心15-30min,离心可以沉淀红细胞和多形核白细胞,同时可以在LSM上形成一层单核-淋巴细胞分层,如下图所示(从上到下,依次分为血浆层-淋巴细胞层-LSM层-RBC颗粒);
6)吸出淋巴细胞层上方2-3 mm内的血浆;
7)吸取淋巴细胞层以及它下面一半的LSM层,并转移到另外一个离心管。加入等体积的平衡盐缓冲液至离心管内的淋巴细胞层中,室温离心10 min,离心速度设定在既不损伤细胞又能沉淀细胞的范围,例如160 – 260 g(清洗去除LSM和降低血小板含量);
8)用平衡盐缓冲液再清洗细胞一次,ZH取适当的培养基重悬细胞。
注意事项
1)稀释去纤维蛋白血液或肝素化血液用的生理盐水为无菌液体。
2)为保持淋巴细胞的活性,应该采血后尽快进行分离。分离细胞层实际上是单个核细胞层,包括淋巴细胞和单核细胞。
3)若溶液变浑浊,呈现出不同的黄色或可能有受污染迹象,不可再使用。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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