人端粒酶活性检测技术服务-TRAP Service

服务介绍
端粒酶存在于85-90%的肿瘤组织中，因此通过检测端粒酶活性就能早期诊断大多数肿瘤。正常人体细胞中不能检测出端粒酶活性的表达，而肿瘤细胞株及大多数肿瘤组织中的端粒酶活性却异常的高表达。目前最常用的检测端粒酶活性的方法就是TRAP (telomeric repeat amplification protocol，端粒重复片段扩增)，它利用端粒酶能在底物DNA末端添加不同数量的TTAGGG序列这一特点，通过PCR检测延伸产物而GX检测端粒酶活性。利用银染技术检测端粒酶的活性。阳性结果在凝胶电泳上显示相隔6 bp的梯状条带，条带的深浅表示端粒酶活性的大小。TRAP技术原理图如下：

0.5M DTT    2ml
0.5M DTT    10ml
10% SDS    50ml
TEMED    5ml
1M Tris-HCl,pH6.8    50ml
1.5M Tris-HCl,pH8.8    100ml
Western转膜缓冲液 （20x）    100ml
Western一/二抗稀释液    100ml
Western封闭液(BSA型）    100ml
Western洗涤液    250ml
Western一抗二抗去除液    250ml
BCIP工作液 50mg/ml    100ul
NBT工作液 50mg/ml    100ul
10% Sodium Azide (叠氮钠)    100ml
Protease Inhibitor  A(广谱性)    1ml
人端粒酶活性检测技术服务-TRAP ServiceProtease Inhibitor  B(适用于细菌)    1ml
Protease Inhibitor  C(适用于哺乳动物)    1ml
Protease Inhibitor  D(适用于真菌)    1ml
Protease Inhibitor  E(适用于哺乳动物)    1ml
Phosphatase Inhibitor M(广谱性)    1ml
Lysozyme/溶菌酶(>20KU/mg)10mg/ml    1ml
Lysozyme/溶菌酶 50mg/ml    5ml
RNase A (10mg/ml)    1ml
RNase A (100mg/ml)    0.5ml
Proteinase K (20mg/ml)    0.2ml
Proteinase K (20mg/ml)    1ml
DEPC水(DNase、RNase free)    100ml
DEPC水(DNase、RNase free)    500ml
RNase Inhibitor    2000U
TE pH 8.0    100ml
3M NaAc pH5.2    100ml
1M MgCl2溶液    100ml
RNA上样缓冲液（6×）    120ul
DNA上样缓冲液(6×Ⅳ)    1ml
Zoman-Green (EB升级换代产品)    1ml