Caspase 8荧光法检测试剂盒(AFC) 细胞凋亡与增殖

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名称：Caspase 8荧光法检测试剂盒(AFC) 细胞凋亡与增殖
英文名：Caspase-8 Fluorescence Metric Assay
编号：KFS203
品Pai：百奥莱博
规格：20T|50T|100T
本试剂盒适用于培养细胞及新鲜组织Caspase-8 检测。Caspase 家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用，其中Caspase-8 为关键的执行分子，与DNA 断裂、染色质凝聚和凋亡小体形成有关。Caspase-8 在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中，没有活性；但在细胞发生凋亡阶段，它被激活，活化的Caspase-8 由两个大亚基和两个小亚基组成，裂解相应的胞浆胞核底物，ZZ导致细胞凋亡。Caspase-8 荧光检测试剂盒就是将Caspase-8 序列特异性的多肽偶联至发色基团。当底物被Caspase-8 剪切后，发色基团即游离出来，可通过荧光酶标仪测定其荧光强度（激发波长=485nm,发射波长=535nm）。

注意事项
1. Caspase-8 Substrate 避光保存及使用。
2. 对某些凋亡诱导剂引起的细胞凋亡可能存在非依赖于Caspase-8 活化的机制，这种情况时利用本试剂盒检测Caspase-8 活性无明显改变，需要考虑凋亡机制中的其他信号通路。
3. 细胞数量需达到3~5×106 个或新鲜组织50~100mg，以便能达到测定需要的100~200μg 蛋白的要求，因为Caspase-8 的活性与细胞裂解液的蛋白含量有关，如测定的RFU 值偏低，可以通过适当延长反应的时间，如果值还是不高，可通过增加细胞数量或组织量的方法来提高蛋白量。

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·FAS蛋白检测试剂盒
编号：KFS231
英文名称：FAS Detection Assay(Western Blot)
规格：50T
本试剂盒用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取全蛋白， 用含有蛋白酶YZ剂及磷酸酶YZ剂的裂解缓冲液LysisBuffer 匀浆裂解组织或细胞，作用温和，提取过程简便GX。获得的全蛋白可用于Western Blot、免疫共沉淀等后续研究（本试剂盒包含兔抗FAS抗体），但不能用于蛋白激酶及磷酸酶免疫共沉淀的研究，因本试剂盒中包括这两种酶的YZ剂。

·细胞衰老检测试剂盒(β-半乳糖苷酶检测试剂盒)
编号：KFS286
英文名称：Senescence β-Galactosidase Staining Kit
规格：100T
绝大多数正常细胞被认为仅有有限的分裂能力，在不能分裂后就进入衰老(senescence)状态。此时细胞仍然是存活的，但细胞的基因和蛋白的表达谱发生了很大改变。衰老(senescence)的细胞不能在一些常规的刺激下再诱导细胞分裂，并且衰老细胞的细胞周期分布也比较特殊，不同于一些损伤诱导的细胞休眠，也不同于细胞生长接触YZ的情况。衰老细胞细胞通常体积变大，表达pH 6.0 时有高酶活性的β-半乳糖苷酶。细胞衰老也被认为是生物体YZ肿瘤的一种方式，同时也是生物体老化(aging)的一种潜在原因。

细胞衰老β- 半乳糖苷酶染色试剂盒是一种基于衰老时SA-β-Gal(senescence-associated β-galactosidase)活性水平上调而对衰老细胞或组织进行染色检测的试剂盒。在普通的光学显微镜下就可以观测到细胞或组织的衰老情况。本试剂盒可以用于培养细胞的衰老检测，也可以用于组织切片的衰老检测。

本试剂盒仅染色衰老细胞，不会染色衰老前的细胞(presenescent cells)、静止期细胞(quiescent cells)、永生细胞(immortal cells)或肿瘤细胞。

操作步骤
1. 准备细胞或组织样品片用PBS 轻柔洗三遍。
2. 每片100ul 滴加固定液，室温固定10min。
3. 吸去固定液，PBS 轻柔洗三遍。
4. 配制染色工作液（临用前，以250μl 染色液B 完全溶解10mg 的X-gal，再将其与染色液A 充分混匀，2-8℃避光，现用现配），每片按用量滴加100ul 左右染色液工作液，37 度无CO2 温箱中避光反应10 小时。
5. 普通光学显微镜下观察，分别计数三个不同视野，计算蓝染的阳性细胞数。

注意事项
1.X-gal 注意避光保存。
2.染色工作液现用现配。如不能一次用完，请分装保存。

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