名称:BTN80908型一站式动物mRNA提取试剂盒说明书
英文名:One-Stop Animal mRNA Isolation Kit
编号:BTN80908
规格:25次
产地:国产|进口
品Pai:百奥莱博
产品简介:
构建cDNA文库、蛋白质的体外翻译和RT-PCR方法检测稀有的mRNA等研究常常需要从总RNA中分离mRNA,mRNA只占总RNA的1%左右,但由于带poly(A)尾巴,所以可以通过与Oligo(dT)纤维素的亲和结合而与其他RNA(如rRNA、tRNA等)分离开。本产品专门用于从动物组织中提取mRNA。
它具有下列特点:
1.一站式,由柱式动物RNA提取试剂和mRNA提取试剂两个产品整合而成,即开即用,非常方便。
2.一次可以处理50-100 mg的动物组织,能得到约10-15 μ g总RNA,从中可得0.1-0.5 μ g左右的mRNA。
3.Oligo(dT)纤维素吸附能力强,每克可以吸附50-80 OD的mRNA,相当于2000-3000 μ g mRNA。
4.mRNA提取过程操作简单,只需要离心就可以完成,免去了常规的灌柱、洗柱等繁琐操作。
5.得到的mRNA可以直接用于构建cDNA文库、蛋白质的体外翻译和RT-PCR。
使用及效果:
1.用柱式动物RNAOUT的方法提取动物总RNA,后用50μL洗脱,将两管收集在一起,共得到100μL总RNA(详见柱式动物RNAOUT的使用手册)。
2.从总RNA中纯化mRNA:将0.5 mL 溶液A(结合液)加入到一管装有Oligo(dT)纤维素的离心管中,放置5分钟后离心吸弃上清后待用。将制备的总RNA100μL加热到65℃ 5分钟后加入等体积的溶液A,转移到装有Oligo(dT)纤维素的离心管中,颠倒混匀数次,离心后将上清转移到一个离心管中。用0.5 mL溶液A,混匀后4℃ 200 g 离心5分钟,小心弃上清。重复上步洗3-5次。用DEPC水洗脱并收集mRNA。
3.用微量核酸沉淀剂沉淀mRNA(详见微量核酸沉淀剂使用手册)。
注:所得mRNA只占总RNA的5%左右,很微量很珍贵,一般不宜电泳检测。
运输及保存:
常温运输,4℃保存,有效期一年。
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·MMLV逆转录酶(H-)
编号:BTN131209
英文名称:MMLV Reverse Transcriptase(H-)
规格:1000U
产品简介:
M-MLV 逆转录酶(RNase H缺失),是RNA 依赖的DNA聚合酶,可用于长mRNA(>5kb)为模板的cDNA合成。它是M-MLV 逆转录酶的一种类型,已经经过基因改造,去除了RNase H 的活性。虽然许多研究者已经成功使用M-MLV RT(H+)进行了一些cDNA 制备应用及分析,但是缺失了RNase H活性的逆转录酶为长cDNA 的制备及包含高比例全长cDNA 的文库制备提供了更好的选择。
运输及保存:
低温运输和-20℃保存、有效期一年。
·乙酰化牛血清白蛋白
编号:BTN131017
英文名称:Bovine Serum Albumin, Acetylated
规格:400μL
产品简介:
乙酰化牛血清白蛋白(BSA,Acetylated),可以用作酶的稳定剂或作为一种载体蛋白。本产品为浓度为它是利用经过改良的Gonzalez 等的方法制备的,并通过去离子水充分透析除去杂质,无DNA 酶及RNA酶活性。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·细菌DNAOUT
编号:BTN60707
英文名称:Bacterial DNAOUT
规格:50次/250次
产品简介:
本产品用于快速提取革氏阴性细菌和革氏阳性细菌的基因组DNA。
1.DNA纯净,OD260/280一般都在1.9左右,直接用于PCR、酶切、杂交等。DNA产量在20μg/mL左右。
2.操作简单,整个过程约15分钟。细菌处理量在0.1-1.5 mL之间。
3.价廉物美,与国外同类产品相比质量相当,但价格便宜。
4.安全,本试剂盒对人体无害,无腐蚀性和刺激性气味。
使用及效果:
将1.5 mL过了夜培养的细菌转移到塑料离心管中,离心3分钟,加入0.6 mL溶液A及15 μ L RNase溶液,混匀后65℃保温5分钟,离心1分钟,转移上清到新的离心管中并弃掉上清,加入等体积溶液B,混匀,冰浴2分钟,离心1分钟,转移上清到新的离心管中并加入等体积的氯仿,振荡混匀后离心3分钟,转移上清到新的离心管中并用等体积异丙醇,振荡混匀后离心5分钟得DNA沉淀,用1 mL 75%乙醇清洗2次后得DNA沉淀(G+细菌还有溶菌酶处理步骤,此处略)。
运输及保存:
常温(溶菌酶需要-20℃保存),有效期一年。
BTN80908型一站式动物mRNA提取试剂盒说明书关键词:一站式动物mRNA提取试剂盒,BTN80908,One-Stop Animal mRNA Isolation Kit
HAT培养基添加剂 HAT Media Supplement 50× 10ml|10×10ml
ARB12112 大鼠可溶性Toll样受体2(sTLR2)含量检测 Rat soluble toll-like receptor 2,stlr-2 ELISA KIT
羧肽酶A(牛胰) 4-C-3,5-DNBA 11075-17-5
ARB12240 大鼠血管内皮细胞生长因子受体1(VEGFR-1/Flt1)elisa测定使用说明书 Rat vascuoar endothelial cell growth factor receptor 1,vegfr-1/flt1 ELISA KIT
PY02-322 Skirrw琼脂 250克
水杨酸肟酸 Salicylaldoxime 89-73-6
ARB11712 人链球菌(Streptococcus)尿液中含量检测
甜菜碱溶液(5mol/L,PCR级) 10ml
BTN120402 PCR专用LIC克隆套装 LIC Cloning Kit for PCR
ARB12996 小鼠抗平滑肌抗体(ASMA)含量测试 Mouse anti-smooth muscle antibody,asma ELISA KIT
硫酸-5-羟色胺肌酐 L-Phenylalanine 61-47-2
BL0962 封闭山羊血清正常(原液)
嘌呤霉素盐酸盐 L-(+)-Lactic acid 58-58-2
BTN131094 生物素化的牛血清白蛋白 Biotin-BSA
ARB14043 猴Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)含量检测 Monkey collagen type Ⅳ,col Ⅳ ELISA KIT
PY01-167 虎红 ind 10克
ARB13208 小鼠高铁血红蛋白(MHB)elisa测定使用说明书 Mouse methemoglobin,mhb ELISA KIT
木质素磺酸钠 Potassium hydrogen tartrate 8061-51-6
BTN80908型一站式动物mRNA提取试剂盒说明书关键词:一站式动物mRNA提取试剂盒,BTN80908,One-Stop Animal mRNA Isolation Kit
·巯基磁珠
编号:BTN130519
英文名称:Magnetic beads,Sulfydryl
规格:2mL
产品简介:
本产品为表面标记有巯基基团的具有超顺磁性的生物纳米磁珠,直径1μm,浓度为30mg/mL。它可用于金属阳离子的检测及后续污水处理。该磁珠磁感应距离大,用普通磁铁即可轻松的实现对磁珠的富集与转移,避免了高磁场对人体的危害,同时不易被误吸入体内,避免对人体造成潜在危害。
运输及保存:
常温运输,4℃密闭、竖直保存,有效期一年。
·中性亲和素蛋白
编号:BTN131090
英文名称:Nuetral Avidin
规格:10mg
产品简介:
中性亲和素蛋白是一种去糖基化形式的亲和素,因此对外源凝集素的结合降低至检测不出的水平,而对结合生物素的亲和性(Ka=1015M-1)没有任何损失。中性亲和素蛋白等电点为中性,这样可以避免非特异的结合。另外它表面的赖氨酸残基让它可以被衍生或者进行蛋白标记。中性亲和素蛋白的分子量为60000,对生物素的特异结合能力大约为14μg/mg 蛋白,接近理论Z大活性。它具有如下特点:用于检测组氨酸标签蛋白
1.相比抗组氨酸抗体背景更低。
2.可进行抗体剥离和重新检测。
3.去糖基化,将外源凝集素结合降低至不可检测水平。
4.可在组织化学中用于生物素封闭试剂。
5.结合能力为11-17μg 生物素/mg 中性亲和素蛋白。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·T4 RNA连接酶
编号:BTN120421
英文名称:T4 RNA Ligase
规格:1000U
产品简介:
本酶催化ATP降解为AMP和焦磷酸的反应,释放的能量能使寡核苷酸的5’-P末端和3’-OH末端结合,也能催化分子内连接的环化反应以及分子间的连接反应。Z小底物为NpNpNOH(3’-OH Oligomer、受体)、pNp(5’、3’-DPmonomer、供体)。连接效率受供体和受体各自的碱基影响很大。与RNA相比DNA连接的效率较低。本产品主要用途:
1. 单链RNA及单链DNA的3’-OH末端的标记。
2. 单链Oligo RNA及单链Oligo DNA的合成。
3. 合成全长cDNA。
活性单位定义:
以Oligo (A)n为底物,在5℃、10分钟内使1 pmol[5’–32P]pCp 掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。
纯度:
1. 100 U的本酶和1μg的λ-Hin d III片段在37℃下反应16小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
2. 100 U的本酶和1μg的16S,23S rRNA在37℃下反应16小时,RNA的电泳谱带不发生变化。
3. 20 U的本酶和6μg的λ-Hind III片段或6μg λ-Pst I片段在37℃下反应16小时,通过T4 DNA Ligase可将90%以上的DNA进行连接,同时,所连接的DNA可通过Hind III或Pst I 地再切断。
4. SDS-PAGE: >90%。
Buffer成分:
储存Buffer:Tris-HCl(pH7.5) 20 mM,NaCl 50 mM,DTT 1 mM,EDTA 0.1 mM,Glycerol 50 % 。反应Buffer,10×:Tris-HCl(pH7.5) 500 mM,MgCl2 100 mM,DTT 100 mM,ATP 10 mM。
备注:
1. 连接反应的适反应温度为5~15℃,若超过该温度活性会被YZ。
2. PEG共存的条件下能够促进反应,且反应特异性不变。为了提高连接反应效率,建议使用酶浓度高而ATP浓度尽量低的反应条件。
3. 在10×反应缓冲液中如果直接加入0.1%的BSA会产生大量白色沉淀,因此在配制反应液时,请按下面顺序添加试剂:dH2O→10×Buffer→0.1% BSA→底物RNA or DNA。
4. BSA在-20℃下易产生沉淀,应尽量避免多次反复冻融。短期使用请在4℃下保存。产生稍许沉淀不影响反应效果。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
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