规格:50次/250次
编号:BTN60707
品Pai:百奥莱博
英文名:Bacterial DNAOUT
产地:国产|进口
产品简介:
本产品用于快速提取革氏阴性细菌和革氏阳性细菌的基因组DNA。
1.DNA纯净,OD260/280一般都在1.9左右,直接用于PCR、酶切、杂交等。DNA产量在20μg/mL左右。
2.操作简单,整个过程约15分钟。细菌处理量在0.1-1.5 mL之间。
3.价廉物美,与国外同类产品相比质量相当,但价格便宜。
4.安全,本试剂盒对人体无害,无腐蚀性和刺激性气味。
使用及效果:
将1.5 mL过了夜培养的细菌转移到塑料离心管中,离心3分钟,加入0.6 mL溶液A及15 μ L RNase溶液,混匀后65℃保温5分钟,离心1分钟,转移上清到新的离心管中并弃掉上清,加入等体积溶液B,混匀,冰浴2分钟,离心1分钟,转移上清到新的离心管中并加入等体积的氯仿,振荡混匀后离心3分钟,转移上清到新的离心管中并用等体积异丙醇,振荡混匀后离心5分钟得DNA沉淀,用1 mL 75%乙醇清洗2次后得DNA沉淀(G+细菌还有溶菌酶处理步骤,此处略)。
运输及保存:
常温(溶菌酶需要-20℃保存),有效期一年。
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·Lambda核酸外切酶
编号:BTN130628
英文名称:Lambda Exonulease
规格:1000U
产品简介:
Lambda 核酸外切酶作用于双链 DNA,沿 5' →3'方向逐步切去 5' 单核苷酸。
适底物是 5' 磷酸化的双链 DNA,也能缓慢降解单链 DNA 和非磷酸化底物。该酶不能从 DNA 的切刻或缺口处起始消化。其反应示意图如下:
具体有下列特点:
1.GX5' →3' 核酸外切酶
2.切下双链 DNA 的 5' 单核苷酸
反应条件:
1X Lambda 核酸外切酶反应缓冲液 [67mM Glycine-KOH (pH 9.4 @ 25℃),2.5 mM MgCl2,50μg/ml BSA],37℃ 温育。
单位定义:
1 单位指在 50 μl 反应体系中,37℃条件下,30 分钟内能从双链 DNA 底物上催化产生 10 nmol 酸溶性脱氧核糖核苷酸所需的酶量。
Buffer 成分:
25 mM Tris-HCl,50 mM NaCl,1 mM DTT,0.1 mM EDTA,50% Glycerol,pH 8.0 @ 25℃
热失活:
75℃ 10 分钟。
备注:
5' -0H 端的切割速度比 5' -PO4 端慢 20 倍。单链 DNA 比双链 DNA 慢 100倍。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期半年。
·Carnoy固定液
编号:BTN131225
英文名称:Carnoy Solution
规格:2L
产品简介:
Carnoy氏液是由乙醇、氯仿和乙酸按6:3:1的比例混合而来的混合型固定液。该液渗透快速,固定只需1-2小时。固定后可以直接用95%乙醇脱水,固定核酸和糖原的效果,常用于组织化学。
运输及保存:
常温,有效期一年。
·大提柱式细菌DNAOUT
编号:BTN80927
英文名称:Maxi Column Bacterial DNAOUT
规格:4次(A)/4次(B)
产品简介:
本产品在我公司柱式细菌DNAOUT(CAT#:60802)基础上改良而得的大提升级产品,主要用于大量快速从各种革氏阳性和革氏阴性细菌材料中提取基因组DNA。跟柱式细菌DNAOUT相比,它具有下列特点
1.处理量大,一次可以处理30 mL的饱和菌液。
2.纯度高,OD260/280一般在1.8以上。不含污染和YZ剂,得到的DNA可以不经稀释直接用于酶切、PCR、 real-time PCR、multiplex PCR、RAPD、RFLP、AFLP、Southern Blotting等各种后续分子生物学实验。
3.产率一般在5μg/mL细菌样品。离心吸附柱Z大吸附量为200μg。
4.DNA片段长度一般在20-40 Kb左右。
5.适用范围广,适用于绝大多数常见的细菌材料。
使用及效果:
对革氏阴性细菌:将30 mL过了夜培养的细菌在50 mL离心管中离心沉淀,弃上清,加入6 mL溶液A,吹打均匀后加入3 mL 溶液B,颠倒混匀,加入5 mL自备氯仿,振荡混匀3分钟,室温离心5分钟,转移上清到新的50 mL离心管中,加入1.5倍体积的溶液C和溶液D的混合溶液,混匀后转移到大提离心吸附柱中,室温放置3-5分钟,离心2分钟,用10 mL通用洗柱液洗2次后,用1 mL通用预洗脱液洗1次,加1
mL DNA洗脱液洗脱即得细菌基因组DNA溶液。对革氏阳性细菌:增加一步溶菌酶预处理步骤,其余相同。
运输及保存:
常温(溶菌酶需要-20℃保存),有效期一年。
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·人源脱嘌呤/脱嘧啶(AP)核酸内切酶
编号:BTN130634
英文名称:APE 1
规格:1000U
产品简介:
人源脱嘌呤/脱嘧啶 (AP) 核酸内切酶 APE1(Apurinic-Apyrimidinic Endonuclease I),也称为 HAP 1 或 Ref-1,与大肠杆菌外切酶 III 蛋白具有同源性。APE 1水解断裂脱嘌呤/脱嘧啶位点 5' 端的磷酸二酯键,产生单链 DNA 断裂,留下3' 羟基和 5' 脱氧核糖磷酸末端。除具有 AP 核酸内切酶活性外,据报道 APE1还具有弱的 DNA 3' 二酯酶、3' 到 5' 外切酶和 RNase H 活性。除 DNA 修复活性外,APE 1 还能通过一种氧化还原机制,体外调控许多转录因子的 DNA 结合活性。作为这个功能的一部分,APE 1 已被证实能刺激 Fos-Jun 异源二聚体、Jun-Jun同源二聚体、Hela 细胞AP-1 蛋白以及包括 NF-kB、Myb和ATF/CREB 家族成员在内的其它几种转录因子的 DNA 结合活性。
具体有下列特点:
1.单细胞凝胶电泳(彗星试验),彗星试验的推荐稀释倍数1:103 。
2.碱洗脱
3.碱解旋
4.改良切刻翻译
反应条件:
1X Buffer [50 mM KAc,20 mM Tris-Ac,10 mM Mg(Ac)2,1 mM DTT (pH7.9 @ 25℃) ],37℃ 温育。
单位定义:
1 单位指在 10 μl 总反应体系中,37℃ 条件下 1 小时,能切割 20 pmol 含一个单独 AP 位点*的 34 mer 寡核苷酸双链所需要的酶量。
*AP 位点的创建方法如下:37℃ 条件下,用 1 单位尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)处理 20pmol 含一个尿嘧啶碱基的 34 bp 寡核苷酸双链 2 分钟。
Buffer 成分:
10 mM Tris-HCl,50 mM NaCl,1 mM DTT,0.05 mM EDTA,200μg/ml BSA,50% Glycerol,pH 8.0 @ 25℃
热失活:
65℃ 20 分钟。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
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