Hoechst33258染色试剂盒 细胞组织染色
- 品牌:百奥莱博
- 型号:北京百奥莱博科技有限公司
- 产地:北京
- 供应商:北京百奥莱博科技有限公司
- 供应商报价:¥140 - 2210
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名称:Hoechst33258染色试剂盒 细胞组织染色
品Pai:百奥莱博
规格:100T
英文名:Apoptotic Cell Hoechst 33258 Detection Kit
产地:国产|进口
编号:KFS251
细胞凋亡时产生最显著的变化是染色体固缩,DNA 裂解使细胞核形态产发生变化。本试剂盒提供的荧光染料Hoechst 33258 是一种无毒、水溶性双苯咪唑类化合物,可作为荧光探针与DNA 分子结合。
在凋亡细胞中,细胞膜对Hoechst 33258 的摄取ZG,并且由于染色体高度浓缩,Hoechst 33258 与之结合增强,染色呈强蓝色荧光,而正常细胞只呈微弱荧光,死细胞则不被染色,由此可检测出凋亡。
注意事项
1. 染色时间严格控制,染色过久可导致假阳性。
2. 由于不同细胞对Hoechst 33258 的摄取能力不同,该法不一定适用所有细胞。
操作方法
1. 用适当的方法诱导细胞凋亡;
2. 用冷Buffer A 洗涤细胞二次,离心收集106 细胞于1.5mL 微量离心管中;(贴壁细胞原位固定染色)
3. 加入1mL 的4%甲醛溶液(用户自备),4℃固定细胞10min;
4. 离心去固定液,用Buffer A 洗两遍;离心后留50~100μL Buffer A 重悬细胞;
5. 取上步骤50~100μL 细胞悬液涂片,自然晾干;
6. 滴加100μL Hoechst 33258 工作液(备注1),室温染色10 min,水冲净晾干;
7. 以紫外光340nm 波长激发,荧光显微镜下观察。
储存:2-8℃,避光,有效期一年。
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·DyLight405标记抗小鼠免疫荧光染色试剂盒
编号:KFS055
规格:300T
适用于细胞或组织切片的免疫荧光染色。在有适当的一抗检测特定的目标蛋白时,就可以使用免疫荧光染色试剂盒检测到红色、绿色或蓝色等荧光。免疫荧光染色试剂盒-抗小鼠DyLight405,含有DyLight405标记的山羊抗小鼠IgG(H+L)抗体,可以用于检测小鼠来源的相应一抗,观察到的颜色为非常鲜艳的蓝色。
DyLight405(Ex/Em:400nm/421nm)是一种常用的非常明亮的蓝色荧光探针。它比绝大部分常用的蓝色荧光探针更加明亮,更加不容易淬灭,而且背景更低。由于很多荧光检测仪器缺少400nm左右的激发波长,DyLight405常局限于激光共聚焦显微镜下观察。
本试剂盒提供了含有荧光标记抗体稳定剂的免疫荧光染色二抗稀释液,可以确保荧光标记抗体稀释后在4℃可以保存长达6个月,并且在6个月内至少可以重复使用10次。本试剂盒含有抗荧光淬灭封片液,可以使荧光更加持久。
本试剂盒对于六孔板内的细胞样品或常规切片,至少可以检测300个样品。
注意事项:
需荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。
在使用抗荧光淬灭封片液的情况下可以减缓淬灭,但仍宜尽量避光,特别是需要尽量缩短在荧光显微镜下的观察时间。
荧光物质均易发生淬灭,染色后宜尽快进行荧光显微镜下的观察。如果不能及时观察可以4℃避光保存,但存放时间通常不宜超过一周,随着存放时间的延长可能会导致观察效果越来越差。免疫荧光染色效果的好坏和一抗的关系非常密切。
建议选购有较多文献报道的并注明可以用于免疫荧光染色的一抗用于本实验。
如果观察时发现荧光过弱,可以适当提高一抗的浓度;如果荧光还是比较弱,可以适当提高荧光标记抗体的浓度。
需自行配制用于免疫荧光染色的相关试剂,需自备盖玻片和载玻片。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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