一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(红色荧光)说明书

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名称：一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(红色荧光)说明书
英文名：One Step TUNEL Apoptosis Assay Kit
编号：YT136
产地：国产|进口
本试剂盒提供了一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。对于经过固定和洗涤的细胞或组织，只要经过一步染色反应，洗涤后就可以通过荧光显微镜或流式细胞仪检测到呈现红色荧光的凋亡细胞。本试剂盒足够检测20个样品。

试剂盒组分：
TdT酶—————————40μl
荧光标记液——————960μl
TdT酶稀释液(选用)———00μl

细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl
Transferase,TdT)的催化下加上红色荧光探针Cy3(Cyanine 3)标记的dUTP，从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测，这就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理。

本试剂盒有如下优点：
(1)高灵敏度：背景染色极低，阳性染色明亮，可以在单细胞水平检测到细胞凋亡，同时由于凋亡早期就有DNA断裂，可以检测到早期的细胞凋亡。
(2)特异性：TUNEL检测时通常更容易标记凋亡细胞，而不容易标记坏死细胞。
(3)快速：仅需约1-2个小时即可完成。
(4)方便：只需一步染色反应，洗涤后即可观察，不必使用二抗等进行多步操作。
(5)应用范围广：可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况，也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。

TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的DNA断裂，但不会检测出射线等诱导的DNA断裂(和细胞凋亡时的断裂方式不同)。这样一方面可以把凋亡和坏死区分开，另一方面也不会把射线等诱导发生DNA断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。

极少数细胞凋亡时没有DNA断裂，此时不适用TUNEL法检测。在个别类型的坏死细胞中也发现TUNEL检测呈阳性。在需要严格判断细胞凋亡的情况下，同时检测多个凋亡指标。

注意事项：
1. 需自备用于洗涤细胞的PBS或HBSS，用于封片的抗荧光淬灭封片液(YT097)，用于固定的4%多聚甲醛或向百奥莱博订购免疫染色固定液(YT086)，同时需自备含0.1% Triton X-100的PBS或向百奥莱博订购免疫染色洗涤液(YT089)。
2. 如果用于石蜡切片的检测，需自备蛋白酶K，二甲苯。

储存条件：-20℃。

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