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ALH337 通用载体连接试剂盒

产品信息




编号:ALH337

品Pai:百奥莱博

规格:20次

英文名:One Step Seamless Cloning kit

产地:国产|进口

本试剂盒不依赖于T4连接酶,不受载体和目的片段的酶切位点限制,而直接用重叠片段重组的方法,采用特殊的酶组合可以将任意方法线性化后的载体和与其两端具有16-25bp重叠区域的PCR片段定向重组连接,可以30分钟内实现A末端或者平末端PCR产物片段GX定向无缝克隆至载体的任意位点。



试剂盒特点:

1. 30分钟可以将一个50bp-15kb PCR扩增片段(平末端、A末端均可)克隆插入任意载体的任意位置。

2.不受载体和插入片段酶切位点的可用性和平端/粘性末端的限制,可以在任意位点进行克隆。

3.无缝克隆,插入点不会引入不需要的碱基序列。

4.不依赖于连接酶及磷酸酶,GX,准确,克隆阳性率可达95%以上。



储存条件:-20℃。



本制品别名:通用型克隆试剂盒|无缝克隆试剂盒



我公司的通用载体连接试剂盒特价促销,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销售下列产品:



·细胞组织蛋白/DNA/RNA分离提取试剂盒

编号:ALH025

英文名称:Tissue Cells RNA/DNA/Protein Isolation and Extraction Kit

规格:50次

本试剂盒用于快速从同一个动物细胞或者组织样品中同时提取分离基因组DNA和总RNA和Protein。独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA/DNA酶,然后裂解混合物DNA/RNA/Protein同时通过一个基因组DNA吸附柱,基因组DNA被吸附而RNA/Protein穿透滤过。DNA吸附柱上基因组DNA经过一系列漂洗-离心后洗脱得到纯净基因组DNA。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于RNA吸附柱上, 再通过一系列快速的漂洗-离心洗脱得到纯净的RNA。滤液经选择性沉淀得到Protein。无苯酚、氯仿DNA/RNA快速提取技术基础上配合独特的分离技术同时得到的RNA/基因组DNA纯度高,互不干扰。得到的RNA不需要DNase消化,可直接用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。基因组DNA也可以直接用于下游的Southern、酶切、PCR等各种试验。



试剂盒特点:

1.完全不使用有毒的苯酚,氯仿等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。

2.快速,简捷,单个样品RNA/基因组DNA/Protein分离操作一般可在1小时内完成。

3.试剂盒的独特吸附柱和配方确保有效清除基因组DNA残留,一般情况下得到的RNA不需要DNase消化,可直接用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。

4.多次柱漂洗确保RNA/基因组DNA高纯度,可直接用于下游各种实验。



试剂盒组份(50次):

裂解液RLT——————————————50ml

去蛋白液RW1—————————————40ml

漂洗液RW——————————————10ml

RNase-free H2O———————————10ml

70%乙醇———————————————9ml RNase-free H2O(一次使用前按说明加指定量乙醇)

YZ物去除液IR———————————25ml

漂洗液WB——————————————15ml

缓冲液APP——————————————60ml

洗脱缓冲液EB————————————10ml

基因组DNA吸附柱和收集管———————50套

RNA吸附柱和收集管——————————50套



注意事项:

1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。

2. 样品处理量不要超过基因组吸附柱和和RNA吸附柱处理能力,否则造成DNA残留或者产量降低。不同组织细胞种类RNA/DNA相差极大,例如胸腺脾脏DNA含量丰富,超过5mg就会超过柱子处理能力。COS细胞RNA含量丰富,超过3x106细胞就会超过柱子吸附能力。所以开始摸索实验条件时,如果不清楚样品DNA/RNA含量时宁可使用较少的样品处理量,如细胞不超过3-4x106,组织不超过10mg。将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。

3. 裂解液RLT 、YZ物去除液IR、去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。

4. 该试剂盒如需要用于植物样品有其实多糖多酚次级代谢产物丰富的困难样品的DNA/RNA/Protein提取,请咨询技术人员,可能需要用到其它试剂。

5. 关于DNA 的微量残留:

一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留( DNase 消化也无法做到 无残留), 本公司的组织/细胞RNA/DNA/Protein分提试剂盒,由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA分离清除技术,绝大多数DNA 已经被清除,不需要DNase 消化,可直接用于反转录PCR 和荧光定量PCR。个别特殊情况如DNA 含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA 表达量分析荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:

1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA 中的连接区,这样DNA 就不能作为模板参与扩增反应。

2) 选择基因组DNA 和cDNA 上扩增的产物大小不一样的引物对。

3) 将RNA 提取物用RNase-free 的DNase I 处理以提GX果。本试剂盒还可以用于DNase I 处理后的RNA 清洁(cleanup),请联系我们索取具体操作说明书。

4) 在步骤去蛋白液RW1 漂洗前,直接在吸附柱 上进行DNase I 处理。请联系我们索取具体操作说明书。



储存条件:室温,有效期12个月。



本制品别名:核酸蛋白分离提取试剂盒





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·酵母RNA提取试剂盒

编号:ALH041

英文名称:Yeast RNA rapid extraction kit

规格:50次

本试剂盒适用于酵母RNA的提取,酵母细胞经溶壁酶处理去除细胞壁后,独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,然后用乙醇调节结合条件后,RNA选择性吸附于离心柱内硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。



本试剂盒特点:

1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。

2.不需要使用有毒的苯酚,氯仿等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。

3.快速,简捷,单个样品操作一般可在20分钟内完成。

4.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.0,基本无DNA残留,可用于RT-PCR,Northern-blot和各种实验。



试剂盒组份:

组份10次
缓冲液SE30ml
溶壁酶(10U/μl)2500U
裂解液RLT20
去蛋白液RW140
漂洗液RW10
RNase-freeH2O10ml
吸附柱和收集管10套




储存条件:室温,有效期12个月(溶壁酶需-20℃保存)。



注意事项

1. 一次使用前请先在漂洗液RW瓶中加入指定量乙醇,加入后请及时打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!

2. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm 的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。

3. 需要自备乙醇,β-巯基乙醇,水浴锅。

4. 裂解液RLT 和去蛋白液RW1 中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。

5. 关于DNA 的微量残留:

一般情况下,一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留,本试剂盒由于采取了本公司独特的缓冲体系和选择了特殊吸附能力的吸附膜,在大多数RT-PCR 扩增过程中极其微量的DNA 残留(一般电泳EB 染色紫外灯下观察不可见)影响不是很大, 如果要进行严格的mRNA 表达量分析如荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:

1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA 中的连接区,这样DNA 就不能作为模板参与扩增反应。

2) 选择基因组DNA 和cDNA 上扩增的产物大小不一样的引物对。

3) 将RNA 提取物用RNase-free 的DNase I 处理。本试剂盒还可以用于DNase I 处理后的RNA 清洁(cleanup),请联系我们索取具体操作说明书。

4) 在步骤去蛋白液RW1 漂洗前,直接在吸附柱 上进行DNase I 处理。请联系我们索取具体操作说明书。

6. RNA 纯度及浓度检测:

完整性:RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳(电泳条件:胶浓度1.2%;0.5×TBE 电泳缓冲液;150v,15 分钟)检测完整性。由于细胞中70%-80%的RNA 为rRNA,电泳后UV下应能看到非常明显的rRNA 条带。动物rRNA 大小分别约为5 kb 和2kb,分别相当于28S 和18S rRNA。动物RNA 样品中Z大rRNA 亮度应为次大rRNA 亮度的1.5-2.0 倍,否则表示RNA 样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。

纯度:OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的指标。高质量的RNA,OD260/OD280 读数(10mMTris, pH7.5)在1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的pH 值影响。同一个RNA 样品,假定在10mM Tris,pH7.5 溶液中测出的OD260/OD280 读数1.8-2.1 之间,在水溶液中所测读数则可能在1.5-1.9之间,但这并不表示RNA 不纯。

浓度:取一定量的RNA 提取物,用RNase-free 水稀释n 倍,用RNase-free 水将分光光度计调零,取稀释液进行OD260, OD280 测定,按照以下公式进行RNA浓度的计算:终浓度(ng/μl)= (OD260)×(稀释倍数n)×40



本制品别名:酵母RNA抽提试剂盒|酵母RNA纯化试剂盒





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PY01-082  胃蛋白胨  250克  

BL1439 胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%)含酚红

BL1136 JM109受体菌

517-28-2 Hematoxylin   苏木色精

632-99-5 碱性品红

胭脂红 Aspartame 1390-65-4

ARB12986 小鼠抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA(α-FodrIn IgG/IgA)Elisa分析 Mouse anti-alpha-fodrin igg/iga,α-fodrin igg/iga ELISA KIT

BL1225 Hanks,含钙镁,含酚红(HBSS)

分子筛型 N-P-K 69912-79-4

碱性磷酸酶缓冲液(pH7.5)   100ml|500ml

ARB11742 人输血传播病毒/辛型肝炎病毒(TTV)血清中含量检测 Human transfusion transmitted virus,ttv ELISA KIT

DEAE-Dextran细胞转染试剂盒   200T

PY02-229  42℃生长培养基  250克  

6014-58-1 亮蓝 Brilltant Blue

9050-68-4 葡聚糖凝胶G-10 Sephadex G-10 medium




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