ALH041 酵母RNA提取试剂盒

名称：酵母RNA提取试剂盒品Pai

编号：ALH041

英文名：Yeast RNA rapid extraction kit

品Pai：百奥莱博

产地：国产|进口

规格：50次

本试剂盒适用于酵母RNA的提取，酵母细胞经溶壁酶处理去除细胞壁后,独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶，然后用乙醇调节结合条件后,RNA选择性吸附于离心柱内硅基质膜， 再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质去除， 后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。



本试剂盒特点：

1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。

2.不需要使用有毒的苯酚,氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。

3.快速，简捷，单个样品操作一般可在20分钟内完成。

4.多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.9～2.0，基本无DNA残留,可用于RT-PCR，Northern-blot和各种实验。



试剂盒组份：

组份	10次
缓冲液SE	30ml
溶壁酶（10U/μl）	2500U
裂解液RLT	20
去蛋白液RW1	40
漂洗液RW	10
RNase-freeH2O	10ml
吸附柱和收集管	10套

储存条件：室温，有效期12个月(溶壁酶需-20℃保存)。



注意事项

1. 一次使用前请先在漂洗液RW瓶中加入指定量乙醇，加入后请及时打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!

2. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13000rpm 的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。

3. 需要自备乙醇，β-巯基乙醇，水浴锅。

4. 裂解液RLT 和去蛋白液RW1 中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。

5. 关于DNA 的微量残留:

一般情况下，一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留,本试剂盒由于采取了本公司独特的缓冲体系和选择了特殊吸附能力的吸附膜，在大多数RT-PCR 扩增过程中极其微量的DNA 残留（一般电泳EB 染色紫外灯下观察不可见）影响不是很大, 如果要进行严格的mRNA 表达量分析如荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时：

1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA 中的连接区,这样DNA 就不能作为模板参与扩增反应。

2) 选择基因组DNA 和cDNA 上扩增的产物大小不一样的引物对。

3) 将RNA 提取物用RNase-free 的DNase I 处理。本试剂盒还可以用于DNase I 处理后的RNA 清洁(cleanup),请联系我们索取具体操作说明书。

4) 在步骤去蛋白液RW1 漂洗前，直接在吸附柱 上进行DNase I 处理。请联系我们索取具体操作说明书。

6. RNA 纯度及浓度检测:

完整性：RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳(电泳条件：胶浓度1.2%；0.5×TBE 电泳缓冲液；150v，15 分钟)检测完整性。由于细胞中70%-80%的RNA 为rRNA，电泳后UV下应能看到非常明显的rRNA 条带。动物rRNA 大小分别约为5 kb 和2kb，分别相当于28S 和18S rRNA。动物RNA 样品中Z大rRNA 亮度应为次大rRNA 亮度的1.5-2.0 倍，否则表示RNA 样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。

纯度：OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的指标。高质量的RNA，OD260/OD280 读数（10mMTris, pH7.5）在1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的pH 值影响。同一个RNA 样品，假定在10mM Tris，pH7.5 溶液中测出的OD260/OD280 读数1.8-2.1 之间，在水溶液中所测读数则可能在1.5-1.9之间，但这并不表示RNA 不纯。

浓度：取一定量的RNA 提取物，用RNase-free 水稀释n 倍，用RNase-free 水将分光光度计调零，取稀释液进行OD260, OD280 测定，按照以下公式进行RNA浓度的计算：终浓度（ng/μl）= (OD260)×(稀释倍数n)×40



本制品别名：酵母RNA抽提试剂盒|酵母RNA纯化试剂盒



想要了解更多关于酵母RNA提取试剂盒品Pai的价格、品Pai、厂家、说明书、促销信息，请和我们联系。此外我公司还销售下面的产品：



·平末端克隆试剂盒(含多克隆位点)(拓扑连接酶技术)

编号：ALH333

英文名称：Zero Background TOPO-Blunt Cloning Kit (with MCS)

规格：20次|80次

本试剂盒和传统的T4连接酶原理不同，它依据拓扑异构酶可以在瞬间（几秒钟-几分钟）、GX（接近）连接DNA片段的原理采用本公司独特的工艺制成。



试剂盒组份(20次)：

TOPO-Blunt Vector(30ng/μl)————20μl

1000bp Control（40ng/μl）————5μl

10×Enhancer———————————20μl



产品特点：

1. 可以在瞬间（几秒钟-几分钟）完成连接。

2. 无需冰浴和热休克，室温5分钟内完成转化；无需1小时复苏，只需37℃10分钟复苏便可以涂板。从连接到涂板只需15-20分钟。

3. 无自连、零背景，无需繁琐蓝白斑筛选，见到长出的克隆便是有插入的（接近）。

4. 可以连接长达10kb片段（即使连接5kb片段，挑10个菌落，至少8个是有插入的），是目前世界上简单、快速、零背景免筛选的TOPO 平末端克隆载体。



储存条件：-20℃，有效期12个月。



本制品别名：TOPO Blunt克隆试剂盒





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·DNA/RNA/miRNA分离提取试剂盒

编号：ALH069

英文名称：Tissue Cells DNA/RNA/microRNA Extraction & Isolation Kit

规格：50次

本试剂盒适用于快速从同一个动物细胞或者组织样品中同时提取分离基因组DNA和包括miRNA的RNA(如购买额外miRNA吸附柱子和配套溶液，还可以将同一个样品的总RNA和miRNA分离并提取，富集miRNA。）。独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA/DNA酶，然后裂解混合物RNA/miRNA/ DNA同时通过一个基因组DNA吸附柱，基因组DNA被吸附而miRNA/RNA穿透滤过。DNA吸附柱上基因组DNA经过一系列漂洗-离心洗脱得到纯净基因组DNA。滤过的miRNA/RNA用乙醇调节结合条件后，miRNA/RNA在高离序盐状态下选择性吸附于miRNA/RNA吸附柱上， 再通过一系列快速的漂洗-离心洗脱得到纯净的miRNA/RNA。无苯酚、氯仿DNA/RNA快速提取技术基础上配合独特的分离技术同时得到的miRNA/RNA/基因组DNA纯度高，互不干扰。得到的miRNA/RNA不需要DNase消化，可直接用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。基因组DNA也可以直接用于下游的Southern、酶切、PCR等各种试验。



产品特点：

1. 完全不使用有毒的苯酚，氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。

2. 快速，简捷，单个样品miRNA/RNA/基因组DNA分离操作一般可在40分钟内完成。

3. 独特吸附柱和配方确保有效清除基因组DNA残留，一般情况下得到的miRNA/RNA不需要DNase消化可直接用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。

4. 多次柱漂洗确保miRNA/RNA/基因组DNA高纯度，可直接用于下游各种实验。



产品组分：

裂解液RLT Plus————50ml

Wash Solution 1————12ml

Wash Solution 2/3————10ml

RNase-free H2O—————10ml

YZ物去除液——————25ml

漂洗液—————————15ml

洗脱缓冲液———————10ml

基因组DNA吸附柱和收集管————50套

RNA吸附柱和收集管————50套



储存条件：室温，有效期12个月。



注意事项

1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。

2. 样品处理量不要超过基因组吸附柱和和RNA吸附柱处理能力，否则造成DNA残留或者产量降低。不同组织细胞种类RNA/DNA相差极大，例如胸腺脾脏DNA含量丰富，超过5mg就会超过柱子处理能力。COS细胞RNA含量丰富，超过3x106细胞就会超过柱子吸附能力。所以开始摸索实验条件时，如果不清楚样品DNA/RNA含量时宁可使用较少的样品处理量，如细胞不超过3-4x106，组织不超过10mg。将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。

3. 裂解液RLT Plus 、YZ物去除液IR、Wash solution 1、Wash solution 2/3中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。

4. 该试剂盒如需要用于植物样品尤其是多糖多酚次级代谢产物丰富的困难样品的DNA/miRNA/RNA提取，请咨询技术人员，可能需要用到其它试剂。

5. 如购买额外miRNA吸附柱子和配套溶液，还可以将同一个样品的总RNA和miRNA分离并提取，富集miRNA。请咨询我们。

6. 关于DNA 的微量残留：

一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留（ DNase 消化也无法做到 无残留）， 本试剂盒，由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA 分离清除技术，绝大多数DNA 已经被清除，不需要DNase 消化，可直接用于反转录PCR 和荧光定量PCR。个别特殊情况如DNA 含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA 表达量分析荧光定量PCR，我们建议在进行模板和引物的选择时：

1) 选用跨内含子的引物，以穿过mRNA 中的连接区，这样DNA 就不能作为模板参与扩增反应。

2) 选择基因组DNA 和cDNA 上扩增的产物大小不一样的引物对。



操作步骤：



操作步骤：（实验前请先阅读注意事项）

提示：

 一次使用前请先在漂洗液RW 瓶、漂洗液WB 和70%乙醇瓶中加入指定量无水乙醇!

1. 组织培养细胞

a. 收集<107 悬浮细胞到一个1.5ml 离心管，对于贴壁细胞，孔板培养可以直接裂解，细胞瓶培养应该先用胰蛋白酶消化后吹打下来收集。

b. 13000rpm 离心10 秒（或者300xg 离心5 分钟），使细胞沉淀下来。完全吸弃上清，留下细胞团，注意不完全弃上清会稀释裂解液导致产量纯度降低。

c. 轻弹管壁将细胞沉淀完全松散重悬， 加350μl（ <5×10^6细胞） 或600μl（5x106-1×10^7细胞）裂解液RLT Plus，吹打混匀后用手剧烈振荡20 秒充分裂解。

d. 匀浆：（处理细胞量极少时<1×10^5一般不需要，涡旋振荡一分钟匀浆）。用带钝针头的一次性1 ml(配0.9mm 针头) 注射器抽打裂解物5-10 次或直到得到满

意匀浆结果(或者电动匀浆30 秒) ，可以剪切DNA，降低粘稠度防堵塞柱子和提高产量。

e. 将裂解混合物或匀浆混合物全部加到DNA 吸附柱上（吸附柱放在收集管内）。

f. 接操作步骤项下3。



2. 动物组织（例如鼠肝脑）

a. 电动匀浆：新鲜组织用解剖刀迅速切成小碎块,加入350μl(<20mg 组织)或者600μl(20-30mg 组织)的裂解液RLT Plus 后电动彻底匀浆20-40 秒。

b. 液氮研磨+匀浆：在液氮中研磨组织成细粉后，取适量组织细粉(20mg/30mg)转入装有350μl/600μl 组织裂解液RLT Plus 的1.5ml 离心管中， 用手剧烈振荡20秒，充分裂解。用带钝针头的一次性1 ml(配0.9mm 针头) 注射器抽打裂解物10次或直到得到满意匀浆结果(或者电动匀浆30 秒) ，可以剪切DNA，降低粘稠度防堵塞柱子和提高产量。

c. 将匀浆后裂解物13，000rpm 离心3 分钟,沉淀可能存在的裂解困难的碎片或者不溶物，将裂解物上清全部加到DNA 吸附柱上（吸附柱放在收集管内）。

d. 接操作步骤项下3。



3. 13000rpm 离心30 秒，保留滤过液（miRNA/RNA 在滤过液中）。DNA 吸附柱子（膜上吸附有基因组DNA）短时间可存放4℃度备用。确保离心后液体全部滤过去，膜上没有残留，如有必要，可以加大离心力和离心时间。



以下步骤为提取RNA 步骤：

4. 用微量移液器较精确估计滤过液体积（350μl 或者600μl 左右，滤过时候损失体积应该减去），加入1.25 倍体积的无水乙醇，此时可能出现沉淀，但是不影响提取过程，立即吹打混匀，不要离心。

5. 立刻将混合物(每次小于700μl，多可以分两次加入)加入一个RNA 吸附柱 中，（吸附柱放入收集管中）13000rpm 离心30 秒，弃掉废液。装滤过液体和乙醇混合物的DNA 吸附柱的收集管（混合物转入RNA 吸附柱后剩下的空收集管）需要保留，将DNA 吸附柱放回此收集管保留在4℃，备用于步骤11 开始的基因组DNA提取。

6. 加700μl Wash Solution 1（请先检查是否已加入无水乙醇!），12,000rpm 离心30秒，弃掉废液。

7. 加入500μl Wash Solution 2/3（请先检查是否已加入无水乙醇!），12000rpm 离心30 秒，弃掉废液。加入500μl Wash Solution 2/3，重复一遍。

8. 将吸附柱 放回空收集管中，13000rpm 离心2 分钟，尽量除去漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇YZ下游反应。

9. 取出吸附柱，放入一个RNase free离心管中，根据预期RNA产量在吸附膜的中间部位加30-50μl RNase free water，室温放置1分钟，12000rpm离心1分钟。

10. 如得到的RNA 可以立即用于下游反应或者尽快置于低温保存。



以下步骤为提取DNA 步骤：

11. 在步骤3 的DNA 吸附柱上加入500μl YZ物去除液IR，12,000rpm 离心30 秒，弃废液。

12. 加入700μl 漂洗液WB（请先检查是否已加入无水乙醇!），12,000rpm 离心30 秒，弃掉废液。

13. 加入500μl 漂洗液WB，12,000rpm 离心30 秒，弃掉废液。

14. 将DNA 吸附柱放回空收集管中，13,000rpm 离心2 分钟，尽量除去漂洗液， 以免漂洗液中残留乙醇YZ下游反应。

15. 取出DNA 吸附柱，放入一个干净的离心管中，在吸附膜的中间部位加100μl 洗脱缓冲液EB （洗脱缓冲液事先在65-70℃水浴中预热效果更好）， 室温放置3-5分钟，12,000rpm 离心1 分钟。将得到的溶液重新加入离心吸附柱中，室温放置2 分钟，12,000rpm 离心1 分钟。洗脱体积越大，洗脱效率越高，如果需要DNA 浓度较高，可以适当减少洗脱体积， 但是Z小体积不应少于50μl，体积过小降低DNA 洗脱效率，减少DNA 产量。

16. DNA 可以存放在2-8℃，如果要长时间存放，可以放置在－20℃。



本制品别名：RNA/DNA分离提取试剂盒|DNA/RNA分离纯化试剂盒|RNA/miRNA/DNA分离提取试剂盒|细胞DNA/RNA分离提取试剂盒|DNA/RNA分别提取试剂盒|DNA/RNA分开提取试剂盒





酵母RNA提取试剂盒品Pai关键词：酵母RNA提取试剂盒,酵母RNA抽提试剂盒|酵母RNA纯化试剂盒,百奥莱博



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北京百莱博科技有限公司是RNA纯化产品的专业生产供应销售商，恭候您的咨询选购酵母RNA提取试剂盒品Pai。